Name: La prova di infezione di pianta: Spray e ferita-mediata di inoculazione con la pianta patogeno Magnaporthe Grisea (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-04T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Impara la prova di infezione su piante con Magnaporthe grisea mediante inoculazione spray e ferita-mediata. Questo metodo consente lo screening rapido dei patotipi fungini su riso e orzo per studiare i meccanismi di resistenza vegetale.

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Questo lavoro è stato sostenuto il progetto speciale di ricerca scientifica dell'Università di agricoltura di Pechino (YQ201603) e il progetto scientifico del Comitato educativo di Pechino (KM201610020005).

1. spray inoculazione con una sospensione di M. grisea conidi
<ol><li>
Coltura fungosa per M.grisea
	<ol>
<li>Preparare il terreno di coltura agar (OTA) pomodoro fiocchi d'avena per ceppi fungini.</li>
		<li>Pesare 30-50 g di farina d'avena, aggiungere questo a 800 mL di acqua distillata/deionizzata (ddH2O) e far bollire per 30 min in pentola elettrica.</li>
		<li>Filtrare il succo bollito farina d'avena nel becher attraverso un pezzo di garza.</li>
		<li>Aggiungere 150 mL di succo di pomodoro e 20 g di agar per il filtrato nel becher e aggiungere ddH2O fino a 1.000 mL.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparazione di materiali sperimentali
	<ol>
<li>Mettere a bagno circa 50 semi di cultivar di riso (Oryza sativa) Lijiangxintuan-heigu (LTH), ddH2O per 3 d o immergere circa 50 semi di orzo (Hordeum vulgare cv Golden Promise) ddH2O per circa 1 d.</li>
		<li>Avvolgono i semi di riso o di orzo in garza umida e li germinare su carta umida filtro in circa 30 capsule di Petri con un diametro di 10 cm x 10 cm a 28 ° C. Il tempo di germinazione del seme di riso è circa 2-3 d, il tempo di germinazione del seme di orzo è circa 2 d. L'umidità relativa nella serra è circa il 70%.</li>
		<li>Piantare le piantine di riso o di orzo in vaso utilizzando il terreno di impregnazione in autoclave e irrigazione e poi coprirli con uno strato di vermiculite.</li>
		<li>Collocare le piante in una serra adatto o crescita armadio a 25 ° C per circa 1 ~ 2 settimane.</li>
		<li>Tagliare 3 strati di carta da filtro nei circoli con forbici chirurgiche sterili (ogni cerchio dovrebbe avere un diametro di 8 cm) e metterli su piatti di plastica sterile di 100 mm.</li>
		<li>Aggiungere ddH2O ad ogni piatto in ammollo la carta da filtro.</li>
		<li>Assicurarsi che la carta da filtro è completamente bagnata, ma non aggiungere acqua supplementare.</li>
		<li>Rimuovere l'acqua in eccesso con una pompa a vuoto.</li>
		<li>Foglie di Place 2 stuzzicadenti sterili nella piastra di coltura per supportare il riso e orzo; spazio gli stuzzicadenti ~ 2-3 cm di distanza.</li>
		<li>Raccogliere le foglie del riso 2 settimane dopo la semina i semi o prendere le foglie dell'orzo 7D dopo la semina i semi.</li>
		<li>Utilizzando 4 - 6 foglia piantine di riso e orzo, tagliare la parte inferiore del gambo a ~ 5 cm dall'alto e raccogliere le foglie.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Protocollo di inoculazione di spruzzo
	<ol>
<li>Il ceppo fungo sulle piastre di OTA in un Incubatore termostatico (25 ° C) per ~ 4 d della coltura.</li>
		<li>Aggiungere mL ~ 2 di ddH2O utilizzando un 0,5 - pipetta da 5 mL per ogni piatto 4-giorno-vecchio.</li>
		<li>Con un ciclo di inoculazione, raschiare il micelio del ceppo di selvaggio-tipo di M. grisea e il ceppo mutante in detriti dei miceli.</li>
		<li>Raccogliere i detriti di Miceli e trasferirlo in una nuova piastra OTA. Prendere i detriti di Miceli e colpo secco nel banco pulito.</li>
		<li>Coprire la piastra con 3 strati di garza per assicurare l'umidità necessaria per la crescita di conidi in una serra a 25 ° C nel corso della giornata (14 h) e 23 ° C nella notte (10 h) per 24-48 h.</li>
		<li>Aggiungere 2 mL di ddH2O ad ogni piatto e raschiare delicatamente i conidi con tamponi di cotone sterile, seguiti da una filtrazione attraverso 2 strati di carta per lenti. Fare attenzione a non graffiare la superficie del terreno di coltura.</li>
		<li>Trasferire la sospensione di conidi in una nuova provetta da 50 mL con una pipetta di 100-1.000 µ l.</li>
		<li>Centrifugare per 5 minuti, a un minimo di 5.000 x g e a 25 ° C.</li>
		<li>Rimuovere il supernatante e risospendere il pellet per dare 2 x 104 conidi / mL in un 0.025% soluzione di Tween-20 (v/v). La soluzione di Tween-20 è di solito circa 10-20 mL.</li>
		<li>Versare la sospensione di spore in uno spruzzatore portatile.</li>
		<li>Spay circa 10 mL della sospensione conidial sulle foglie delle piantine di riso 2-settimana-vecchio o orzo riso foglie delle piantine d'orzo 7-giorno-vecchio e li Incubare a 25 ° C in una camera buia, umida per ~ 24 h. Spray le piante di controllo con 0.025% soluzione di Tween-20 (v/v).</li>
		<li>Trasferire le foglie in un'altra camera umida sotto una luce fluorescente a 25 ° C per un fotoperiodo di 12 h.</li>
		<li>Registrare i sintomi di malattia a 5 d dopo l'inoculazione. Esaminare le lame di riso e orzo malato di ~ 6 cm di lunghezza. La valutazione standard è secondo il sistema di punteggio per resistenza all'esplosione dell'International Rice Research Institute (IRRI). I dettagli del sistema di punteggio per resistenza all'esplosione sono riportati nella tabella 1.</li>
		<li>Fotografare le foglie per valutare l'infezione dei ceppi testati. L'infezione è stata valutata dal numero di lesioni per 3,6 cm2.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. ferendo l'inoculazione con cubetti di micelio o goccioline di Conidial sospensione di M. grisea
<ol><li>Utilizzando un ago anatomico, raschiare tre ferite lunghe 2-3 cm in vene principali di fogli staccati riso e orzo; fare attenzione a non per penetrare le foglie.</li>
	<li>Mettere le foglie raschiate su stuzzicadenti e spruzzare un 0,02% Tween-20 soluzione sulle foglie per formare uno strato di goccioline (v/v).</li>
	<li>Tagliare una spina miceliari 0,5 x 0,5 cm per ogni ceppo di M. grisea (ceppi wild-type e mutanti, complemento, o altri ceppi di prova) da una piastra OTA.</li>
	<li>Mettere i tappi miceliari o 25 µ l gocce di sospensione conidial sui feriti lascia e incubare le foglie a 25 ° C in una camera umida per 3-8 d.</li>
	<li>Esaminare le lesioni al post-inoculazione d 5-7. Il metodo di esame è lo stesso come è stato per il metodo di inoculazione di spray (Vedi punto 1.3.13).</li>
	<li>Esaminare le lame di riso e orzo malato di ~ 6 cm di lunghezza e fotografarli per valutare l'infezione dei ceppi testati. L'infezione è stata valutata dal numero di lesioni per 3,6 cm2.</li>
</ol>

<ol><li>Li, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+natural+allele+of+a+transcription+factor+in+rice+confers+broad-spectrum+blast+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A natural allele of a transcription factor in rice confers broad-spectrum blast resistance.</a> Cell. 170 (1), 114-126 (2017).</li>
<li>Chi, M. H., Park, S. Y., Kim, S., Lee, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+pathogenicity+gene+is+required+in+the+rice+blast+fungus+to+suppress+the+basal+defenses+of+the+host%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">A novel pathogenicity gene is required in the rice blast fungus to suppress the basal defenses of the host.</a> PLoS Pathogens. 5 (4), 1000401(2009).</li>
<li>Jia, Y., Valent, B., Lee, F. N. <a target="_blank" href="https://apsjournals.apsnet.org/doi/10.1094/PDIS.2003.87.2.129">Determination of host responses to Magnaporthe grisea.on detached rice leaves using a spot inoculation method.</a> Plant Disease. 87 (2), 129-133 (2003).</li>
<li>Ebbole, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnaporthe+as+a+model+for+understanding+host-pathogen+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Phytopathology%22%5BJournal%5D)">Magnaporthe as a model for understanding host-pathogen interactions.</a> Annual Review of Phytopathology. 45, 437-456 (2007).</li>
<li>Hamer, J. E., Talbot, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infection-related+development+in+the+rice+blast+fungus+Magnaporthe+grisea%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Infection-related development in the rice blast fungus Magnaporthe grisea.</a> Current Opinion in Microbiology. 1 (6), 693-697 (1998).</li>
<li>Howard, R. J., Valent, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breaking+and+entering%3A+host+penetration+by+the+fungal+rice+blast+pathogen+Magnaporthe+grisea%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Breaking and entering: host penetration by the fungal rice blast pathogen Magnaporthe grisea.</a> Annual Review of Microbiology. 50, 491-512 (1996).</li>
<li>Chen, X. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-Glycosylation+of+Effector+Proteins+by+an+%CE%B1-1%2C3-+Mannosyltransferase+Is+Required+for+the+Rice+Blast+Fungus+to+Evade+Host+Innate+Immunity%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">N-Glycosylation of Effector Proteins by an α-1,3- Mannosyltransferase Is Required for the Rice Blast Fungus to Evade Host Innate Immunity.</a> The Plant Cell. 26 (3), 1360-1376 (2014).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((M.ARG1%2C+MoARG5%2C6+and+MoARG7+involved+in+arginine+biosynthesis+are+essential+for+growth%2C+conidiogenesis%2C+sexual+reproduction%2C+and+pathogenicity+in+Magnaporthe+oryzae%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiological+Research%22%5BJournal%5D)">M.ARG1, MoARG5,6 and MoARG7 involved in arginine biosynthesis are essential for growth, conidiogenesis, sexual reproduction, and pathogenicity in Magnaporthe oryzae.</a> Microbiological Research. 180, 11-22 (2015).</li>
<li>Du, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+serine%2Fthreonine-protein+phosphatase+PP2A+catalytic+subunit+is+essential+for+asexual+development+and+plant+infection+in+Magnaporthe+oryzae%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Genetics%22%5BJournal%5D)">A serine/threonine-protein phosphatase PP2A catalytic subunit is essential for asexual development and plant infection in Magnaporthe oryzae.</a> Current Genetics. 59 (1-2), 33-41 (2013).</li>
<li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+protein+com1+is+required+for+normal+conidium+morphology+and+full+virulence+in+Magnaporthe+oryzae%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant-Microbe+Interactions%22%5BJournal%5D)">A novel protein com1 is required for normal conidium morphology and full virulence in Magnaporthe oryzae.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions. 23 (1), 112-123 (2010).</li>
<li>Cao, Z. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+ash1-like+protein+MoKMT2H+null+mutant+is+delayed+for+conidium+germination+and+pathogenesis+in+Magnaporthe+oryzae%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">An ash1-like protein MoKMT2H null mutant is delayed for conidium germination and pathogenesis in Magnaporthe oryzae.</a> BioMed Research International. 2016, 1575430(2016).</li>
<li>Bryan, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+amino+acid+difference+distinguishes+resistant+and+susceptible+alleles+of+the+rice+blast+resistance+gene+Pi-ta%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">A single amino acid difference distinguishes resistant and susceptible alleles of the rice blast resistance gene Pi-ta.</a> The Plant Cell. 12 (11), 2033-2045 (2000).</li>
<li>Zhou, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+pathology%3A+a+life+and+death+struggle+in+rice+blast+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Plant pathology: a life and death struggle in rice blast disease.</a> Current Biology. 26 (18), 843-845 (2016).</li>
<li>Guo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MoGrr1%2C+a+novel+F-box+protein%2C+is+involved+in+conidiogenesis+and+cell+wall+integrity+and+is+critical+for+the+full+virulence+of+Magnaporthe+oryzae%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Microbiology+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">MoGrr1, a novel F-box protein, is involved in conidiogenesis and cell wall integrity and is critical for the full virulence of Magnaporthe oryzae.</a> Applied Microbiology and Biotechnology. 99 (19), 8075-8088 (2015).</li>
<li>Talbot, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+trail+of+a+cereal+killer%3A+Exploring+the+biology+of+Magnaporthe+grisea%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Microbiology%22%5BJournal%5D)">On the trail of a cereal killer: Exploring the biology of Magnaporthe grisea.</a> Annual Review of Microbiology. 57, 177-202 (2009).</li>
<li>Wilson, R. A., Talbot, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Under+pressure%3A+investigating+the+biology+of+plant+infection+by+Magnaporthe+oryzae%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Under pressure: investigating the biology of plant infection by Magnaporthe oryzae.</a> Nature Reviews Microbiology. 7, 185-195 (2009).</li>
<li>Jia, Y. L., Lee, F. N., McClung, A. <a target="_blank" href="https://apsjournals.apsnet.org/doi/10.1094/PDIS-93-6-0639">Determination of Resistance Spectra of the Pi-ta and Pi-k Genes to U.S. Races of Magnaporthe oryzae Causing Rice Blast in a Recombinant Inbred Line Population.</a> Plant Disease. 93, 639-644 (2009).</li>
<li>Peng, Y. L., Shishiyama, J. <a target="_blank" href="http://www.nrcresearchpress.com/doi/abs/10.1139/b88-107?journalCode=cjb1#.WvnHgogvzIU">Temporal sequence of cytological events in rice leaves infected with Pyricularia oryzae.</a> Canadian Journal of Botany. 66 (4), 730-735 (1988).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Geni di resistenza di malattia pianta svolgono un ruolo essenziale nella prevenzione delle infezioni da agenti patogeni, tra cui funghi patogeni1,12. Esplosione di riso è stato utilizzato come modello per comprendere la natura delle strutture di popolazione dell'agente patogeno e per identificare geni della pianta resistenza4. Pertanto, è necessario esaminare il genotipo di resistenza di malattia e genotipi di avirulenza delle principali v...

Esplosione di riso, causata da M. grisea, è una delle malattie più gravi per riso varietà in tutto il mondo1,2. Il processo mediante il quale M. grisea infetta piante ospiti comprende una produzione di conidi e collegamento di superficie, una germinazione di conidi e appressorium formazione, una formazione del peg di penetrazione e differenziazione di IFA infettiva, e una malattia diffusa 3. tutte queste fasi sono comuni in molti altri funghi patogeni vegetali e, infatti, un blocco di ogni singola fase previene l'infezione delle piante ospiti. Grazie alla sua importanza economica e trattabilità genetica, M. grisea è emerso come organismo modello per lo studio dei meccanismi delle interazioni pianta-fungo patogeno1,4. Pertanto, studiare la base molecolare di questi stadi di sviluppo in M. grisea contribuirà a delucidare i meccanismi molecolari sottostanti fungine patogenicità e l'identificazione di geni bersaglio candidato per lo screening e il romanzo di progettazione fungicidi5.
Recenti rapporti riguardo M. grisea infezione si sono concentrati sui meccanismi molecolari delle fasi pre-penetrazione, soprattutto il conidiation, la formazione di appressorium, i pioli di penetrazione e la crescita infettive3, 6. Pertanto, è essenziale per sviluppare un protocollo dettagliato per eseguire il test M. grisea infezione. Qui, presentiamo un metodo dettagliato per un test di infezione che utilizza l'analisi di un'infezione dello spruzzo-mediata con una sospensione conidial e l'inoculazione delle ferite con spine miceliale di M. grisea. In questo rapporto, il protocollo si concentra sulla cultura dei ceppi, la preparazione della soluzione conidiation per la spruzzatura e l'inoculazione micelio spina-mediata delle piante con M. grisea. Questi passaggi vengono descritti in dettaglio qui di seguito e una vista schematica che mostra l'intero flusso di lavoro del metodo e una lesione tipica sono riportati nelle figure 1 e 2, rispettivamente.

<table><tbody><tr><td>Carta da filtro</td><td>marchio GE Healthcare (Svezia)&nbsp; &nbsp;</td><td></td><td></td>10311387</tr><tr><td>Provetta da 50 mL</td><td>CORNING(Amercia)</td><td>430290</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga</td><td>Eppendorf(Amercia)</td><td>5804R</td><td></td></tr><tr><td>Piatto di coltura</td><td>Thermofisher(Amercia)</td><td>150326</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta da 0,5-5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>&nbsp; </td><td></td>4920000105</tr><tr><td>Pipetta 100-1000uL</td><td>Eppendorf</td><td>4920000083</td><td></td></tr><tr><td>Pompa a vuoto</td><td>Leybold</td><td>D25B</td><td></td></tr><tr><td>Ago di dissezione</td><td>FST</td><td>26000-35</td><td></td></tr><tr><td>Incubatore</td><td>MEMMERT</td><td>PYX313</td><td></td></tr><tr><td>Anello di inoculazione</td><td>Greiner Bio One</td><td>731175</td><td></td></tr></tbody></table>

la prova di infezione di pianta: spray e ferita-mediata di inoculazione con la pianta patogeno magnaporthe grisea

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Piante possiedono un potente sistema per difendersi contro le minacce potenziali dei funghi patogeni. Per piante sul piano agricolo importanti, tuttavia, attuali misure di lotta contro tali agenti patogeni hanno dimostrato troppo conservatore e, quindi, non sufficientemente efficaci e possono potenzialmente rappresentare rischi ambientali. Pertanto, è estremamente necessario identificare i fattori di resistenza ospite per assistere nel controllo malattie delle piante naturalmente attraverso l'identificazione di germoplasma resistente, l'isolamento e caratterizzazione di geni di resistenza e l'allevamento molecolare di cultivar resistenti. A questo proposito, c'è bisogno di stabilire un metodo di inoculazione accurata, rapida e su larga scala per allevare e sviluppare i geni di resistenza della pianta. Il riso blast agente patogeno fungoso Magnaporthe grisea cause sintomi di grave malattia e le perdite di rendimento. Recentemente, M. grisea è emerso come organismo modello per lo studio dei meccanismi delle interazioni pianta-fungo patogeno. Quindi, segnaliamo lo sviluppo di un metodo di test di virulenza di pianta che è specifico per M. grisea. Questo metodo fornisce per inoculazione di spruzzo con una sospensione conidial e ferendo inoculazione con cubetti di micelio o goccioline di conidial sospensione. Il passaggio chiave del metodo ferentesi inoculazione per foglie di riso indipendente è di rendere le ferite sulle foglie delle piante, che evita qualsiasi interferenza causata da resistenza di penetrazione ospite. Questo spray/ferendo protocollo contribuisce per lo screening rapido, accurato e su larga scala di patotipi degli isolati di M. grisea . Questo integrato e metodo di infezione sistematica impianto servirà come punto di partenza eccellente per ottenere una prospettiva ampia di problemi in patologia vegetale.

L'intero flusso di lavoro per la tecnica è illustrata nella Figura 1. I dosaggi di infezione della pianta sono stati effettuati su semenzali del riso suscettibili 14-giorno-vecchio (o. sativa cv CO-39) o suscettibile 7-giorno-vecchio orzo lascia (H. vulgare cv Golden Promise)7,8,9. Per verificare un'infezione sulle foglie di riso, una sospensione co...

Qui, presentiamo un protocollo per testare la virulenza della pianta con la pianta patogeno Magnaporthe grisea. Questa relazione contribuirà alla proiezione su grande scala di patotipi di funghi isolati e servire come un ottimo punto di partenza per la comprensione dei meccanismi resistenti delle piante durante l'allevamento molecolare.

La prova di infezione di pianta: Spray e ferita-mediata di inoculazione con la pianta patogeno Magnaporthe Grisea

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current ...

Questo video può aiutare a istruire i metodi chiave nel campo dell'infezione delle piante, come l'inoculazione mediata gratuita e desiderata con il patogeno delle piante Magnaporthe grisea. Il vantaggio principale di questa tecnica è che il protocollo di irrorazione e ferita contribuisce allo screening rapido, accurato e su larga scala dei patotipi di funghi isolati. Le implicazioni di questa tecnica riguardano lo studio della fisiologia per combattere i patogeni delle piante perché è molto importante per la prevenzione e il controllo delle malattie delle piante su larga scala.Questo metodo può fornire informazioni sul meccanismo patogeno della conservazione nei funghi. Può essere applicato anche alle principali varietà di piante agricole come il riso o l'orzo. Generalmente le persone che non conoscono questo metodo avranno difficoltà perché è difficile raschiare delicatamente i conidi con i tamponi di cotone sterili.La dimostrazione di questo metodo è fondamentale in quanto è difficile raccogliere ferite da graffio senza penetrare le foglie come mezzo principale per staccare le foglie di riso o orzo. Per iniziare, pesare da 30 a 50 grammi di farina d'avena. Aggiungere la farina d'

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Una morte saggio basato su cellule di PTI in piante di Nicotiana benthamiana è descritto.

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Source: Liu, X., et al. Bacterial Leaf Infiltration Assay for Fine Characterization of Plant Defense Responses using the Arabidopsis thaliana-Pseudomonas syringae Pathosystem. J. Vis. Exp. (2015).This video demonstrates a method to assess the bacterial load in Arabidopsis thaliana leaves infected with Pseudomonas syringae. Leaf discs from infected leaves are homogenized, serially diluted, and plated onto nutrient-rich agar to promote bacterial colony formation. Colony counts are then used to...

Assessing Pseudomonas syringae Infection Load in Arabidopsis thaliana Leaves

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Stabilire funghi entomopatogeni come endofiti: Verso endofiti Controllo Biologico

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Presentiamo un protocollo per la costruzione di un semplice sistema di distribuzione delle spore costituito da una scatola di inoculazione con una maglia di ~ 50 μm e una camera di plastica trasparente. Questo può essere utilizzato per inoculare uniformemente le piante con spore di oidio, consentendo così una valutazione accurata e riproducibile dei fenotipi di malattia delle piante in studio.

Un metodo di inoculazione semplice e flessibile per valutare accuratamente i fenotipi di infezione da oidio di Arabidopsis e altre piante

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Strategie di inoculazione per infettare le radici delle piante con microrganismi trasmessi dal suolo

Impara la prova di infezione su piante con Magnaporthe grisea mediante inoculazione spray e ferita-mediata. Questo metodo consente lo screening rapido dei patotipi fungini su riso e orzo per studiare i meccanismi di resistenza vegetale.

La prova di infezione di pianta: Spray e ferita-mediata di inoculazione con la pianta patogeno Magnaporthe Grisea

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