Name: Iniezione di acido oleico in maiali come modello per la sindrome da Distress respiratorio (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: Scopri come indurre lesioni polmonari acute nei maiali mediante iniezione di acido oleico per studiare la sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS). Questo modello riproduce le alterazioni patologiche umane.

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Gli autori vogliono ringraziare Dagmar Dirvonskis per il supporto tecnico eccellente.

Tutti gli esperimenti sugli animali descritti qui sono stati approvati dal Comitato istituzionale e statale cura degli animali (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Coblenza, Germania; numero di omologazione G14-1-077) e sono stati condotti in conformità con le linee guida della Società europea e tedesca delle scienze animali di laboratorio. Gli esperimenti sono stati condotti in suini maschi anestetizzati (sus scrofa domestica) di età 2-3 mesi, peso kg 27-29.
1. anestesia, l'intubazione e ventilazione meccanica
<ol><li>Trattenere il cibo per 6 ore prima dell'anestesia per ridurre il rischio di aspirazione, ma consentire il libero accesso all'acqua per ridurre lo stress.</li>
	<li>Per la sedazione, iniettare una combinazione di ketamina (4 mg kg-1) e Azaperone (8 mg kg-1) nel collo o il muscolo del gluteo del maiale con un ago per iniezione intramuscolare (20 G) mentre l'animale è nella finestra di animale. Attenzione: Usare i guanti quando si lavora con l'animale.</li>
	<li>Inserire il catetere vena periferica (20 G) in una vena dell'orecchio dopo disinfezione locale con alcool.</li>
	<li>Iniettare fentanil (4 µ g kg-1), propofol (3 mg kg-1) e atracurium (0,5 mg kg-1) per via endovenosa per l'induzione dell'anestesia.</li>
	<li>Quando il maiale smette di respirare, posto in posizione supina sulla barella e immobilizzare esso con bende.</li>
	<li>Iniziare a monitorare la saturazione periferica di ossigeno (SpO2) fissando il sensore su uno delle orecchie o la coda dell'animale.</li>
	<li>Ventilare il maiale con una maschera per la ventilazione cani, taglia 2, con un picco di pressione inspiratoria sotto 20 cm H2O, un positivo fine pressione espiratoria (PEEP) di 5 cm H2O, una frequenza respiratoria di 14-16/min e una frazione inspiratoria di ossigeno (FiO2) di 1.0.</li>
	<li>Iniziare un'infusione continua con soluzione elettrolitica equilibrata (5 mLkg-1 h-1), propofol (8-12 mg kg-1 h-1) e del fentanyl (0.1-0.2 mg kg-1 h-1) per mantenere l'anestesia.</li>
	<li>Per l'intubazione, preparare un comune tubo endotracheale adatto per l'animale (ad es., peso di 25-30 kg, diametro interno del tubo endotracheale (ID) 6-7 mm) armati con tubo endotracheale introduttore e un laringoscopio comune con un Macintosh lama 4. Nota: Due persone sono necessari per l'intubazione.</li>
	<li>Persona 1: Tirare fuori la linguetta con una mano e premere il muso dorsalmente con l'altro.</li>
	<li>Persona 2: Inserire il laringoscopio e come al solito farlo avanzare fino a visualizzare l'epiglottide.</li>
	<li>Tirare il laringoscopio ventralmente per visualizzare le corde vocali. Nota: A volte l'epiglottide "si attacca" a Palatino morbido. In questo caso, mobilitare e con la punta del tubo.</li>
	<li>Inserire il tubo attraverso le corde vocali e tirare fuori l'introduttore.</li>
	<li>Bloccare il manicotto del tubo con una siringa con 10 mL di aria.</li>
	<li>Collegare il tubo al ventilatore.</li>
	<li>Verificare il corretto posizionamento del tubo di esalazione regolare di anidride carbonica (CO2) con capnografia e ventilazione uguale di entrambi i polmoni con l'auscultazione.</li>
	<li>Iniziare la ventilazione meccanica (tidal volume 6-8 mL/kg, positivo PEEP 5 cm H20, FiO2 per mantenere la saturazione periferica dell'ossigeno (SpO2) tra il 94-98%17, frequenza respiratoria per mantenere la pressione delle maree fine di biossido di carbonio (etCO 2) tra 35 – 45 mmHG).</li>
</ol>2. Strumentazione
<ol><li>Arti posteriori con bende per tendere la pelle sopra l'area femorale per cateterismo necessarie navi si ritraggono.</li>
	<li>Preparare una siringa da 5 mL, una siringa da 10 mL, ago di un Seldinger, 3 guaine introduttore (5 Fr, 6 Fr, 8 Fr) con guide metalliche orientabili, un catetere venoso centrale con 3 porte (7 Fr, 30cm) con filo guida e un catetere arterioso polmonare (7,5 Fr, 110 cm).</li>
	<li>Generosamente disinfettare la zona femorale con disinfettante della pelle applicando una tecnica di strofinare.</li>
	<li>Riempire completamente i catetere con soluzione fisiologica.</li>
	<li>Posizionare la sonda ad ultrasuoni sul legamento inguinale destra e scansione per vasi femorali.</li>
	<li>Ruotare la sonda di 90° per visualizzare completamente l'arteria femorale in asse lungo.</li>
	<li>Incannulare arteria femorale di destra sotto visualizzazione ad ultrasuoni in linea con l'ago di Seldinger. Nota: Ci sono diversi modi per ottenere l'accesso vascolare con o senza ultrasuoni. Ultrasuono-guida di incannulamento vascolare non è necessario per questo modello.</li>
	<li>Quando il pulsante luminoso sangue scorre fuori, introdurre il filo guida e ritrarre l'ago.</li>
	<li>Visualizzare la vena femorale e incannulare la vena sotto visualizzazione ad ultrasuoni in linea e aspirazione continua con l'ago.</li>
	<li>Quando il sangue venoso è aspirabili, scollegare la siringa e inserire il filo guida.</li>
	<li>Ritirare l'ago.</li>
	<li>Controllare la posizione dei fili con l'ultrasuono.</li>
	<li>Inserire l'introduttore arterioso (5 Fr) e catetere venoso centrale utilizzando la tecnica di Seldinger (per maggiori dettagli sulla tecnica di Seldinger, vedere Metodo pubblicato18).</li>
	<li>Ripetere la puntura arteriosa e venosa su altro lato e inserire le guaine di introduttore con tecnica di Seldinger´s, come descritto in precedenza (arteria 6 Fr, vena 8 Fr).</li>
	<li>Collegare l'introduttore arterioso e il catetere venoso centrale ad un sistema di trasduttore adatto all'attrezzatura.</li>
	<li>Calibrare il monitoraggio invasivo contro atmosfera (zero) aprendo i tre-modo-rubinetti di arresto per l'atmosfera e premere Zero tutto sul monitor.</li>
	<li>Tornare indietro tre-modo-Rubinetti per misurare emodinamica.</li>
	<li>Avviare il monitoraggio emodinamica.</li>
	<li>Posizionare tutti i trasduttori di pressione all'altezza dell'atrio destro.</li>
	<li>Passare l'infusione di propofol (8-12 mg kg-1 h-1) e del fentanyl (0.1-0.2 mg kg-1 h-1) a una delle porte della linea venosa centrale per mantenere l'anestesia.</li>
</ol>3. ultraveloce misurazione della pressione parziale dell'ossigeno (pO2)
Nota: La misurazione della pO2 con la sonda per ultraveloce pO2-misurazione non è obbligatorio ma aiuta a visualizzare le modifiche in tempo reale a pO2.
<ol><li>Aprire il software NeoFox visualizzatore e fare clic su Opzioni.</li>
	<li>Scegliere la scheda di calibrazione e fare clic sul pulsante di Calibrazione aperta .</li>
	<li>Scegliere file di calibrazione e fare clic su Apri e Scarica.</li>
	<li>Confermare la finestra popup facendo clic su Sì.</li>
	<li>Aprire la finestra di dialogo Opzioni .</li>
	<li>Scegliere la scheda di calibrazione e fare clic su calibrazione a punto singolo.</li>
	<li>Immettere 21% nel campo dell'ossigeno e la temperatura nel campo di temperatura.</li>
	<li>Fare clic su uso corrente Tau e scaricare. In seguito, confermare la finestra popup facendo clic su Sì.</li>
	<li>Inserire la sonda per misure ultraveloce di pO2 attraverso l'introduttore arterioso sinistro.</li>
</ol>4. INSERIMENTO DEL CATETERE DELL'ARTERIA POLMONARE
<ol><li>Verifica il palloncino del catetere arterioso polmonare per danni.</li>
	<li>Connettersi al sistema di trasduttore adatto all'attrezzatura.</li>
	<li>Calibrare la pressione arteriosa polmonare monitoraggio contro l'atmosfera (zero) aprendo il rubinetto a tre vie per l'atmosfera e premere Zero sul monitor.</li>
	<li>Girare il rubinetto a tre vie indietro per misurare la pressione arteriosa polmonare.</li>
	<li>Avviare il monitoraggio della pressione arteriosa polmonare.</li>
	<li>Inserire il catetere arterioso polmonare attraverso l'introduttore venoso sinistro (palloncino sgonfiata).</li>
	<li>Quando il catetere dell'arteria polmonare è passato attraverso l'introduttore, gonfiare il palloncino con 1 mL di aria.</li>
	<li>Far avanzare il catetere dell'arteria polmonare e monitorare le forme d'onda tipiche (vasi venosi, atrio destro, ventricolo destro, arteria polmonare e la pressione di cuneo capillare polmonare). Sgonfiare il palloncino e verificare, se è possibile aspirare il sangue attraverso tutte le porte del catetere dell'arteria polmonare. Nota: per istruzioni dettagliate su come inserire il catetere arterioso polmonare, fare riferimento alla precedente pubblicazione19.</li>
</ol>5. l'induzione di danno polmonare
<ol><li>Preparare la soluzione di acido oleico: 0,1 mL kg-1 di acido oleico in un 20ml siringa e collegarlo a un rubinetto a 3 vie.</li>
	<li>Assumere 2 mL di sangue in un'altra siringa da 20 mL e aggiungere soluzione fisiologica per un volume totale di 20 mL in entrambi siringhe.</li>
	<li>Collegare anche la seconda siringa al rubinetto a 3 vie. Attenzione: Utilizzare guanti e occhiali protettivi quando si lavora con acido oleico.</li>
	<li>Preparare la norepinefrina (0,1 mg/mL) per infusione continua e per iniezione in bolo (10 µ g/mL).</li>
	<li>Collegare la pompa a siringa noradrenalina a una delle porte del catetere venoso centrale senza avviarla.</li>
	<li>Avviare l' ultraveloce pO2-misura.</li>
	<li>Prima dell'induzione del danno polmonare, registrare i valori (baseline) da tutti i parametri rilevanti.</li>
	<li>Impostare il FioO2 1.0 e condurre una manovra di reclutamento del polmone (altopiano pressione 40 cm H2O per 10 s).</li>
	<li>Collegare il rubinetto a 3 vie alla porta prossimale del catetere dell'arteria polmonare.</li>
	<li>Miscelare bene l'acido oleico e la miscela di sangue/saline, iniettando ripetutamente da una siringa a altra tramite il rubinetto a 3 vie e mantenere tutto il tempo di miscelazione.</li>
	<li>Quando si tratta di un'emulsione omogenea, iniettare 2 mL di emulsione e continuare a mescolare. Nota: Se la miscelazione viene arrestato, l'emulsione può separare in un lipofilico e una parte idrofila.</li>
	<li>Seguire da vicino l'emodinamica dopo l'iniezione di acido oleico e tenere a portata di mano la norepinefrina. Se necessario, dare noradrenalina come iniezione in bolo (10 – 100 µ g) o l'infusione continua per mantenere la pressione arteriosa media superiore a 60 mmHg.</li>
	<li>Ripetere l'iniezione di 2 mL di soluzione ogni 3 minuti fino a quando la pressione parziale arteriosa di ossigeno (PaO2) / FiO2-rapporto è inferiore a 200 mmHg.</li>
	<li>Se la siringa è vuota prima del PaO2stato2-rapporto tra 100 e 200 mmHg, preparare 2 siringhe più come descritto al punto 5.1.</li>
	<li>Attendere 30 min e rivalutare il PaO2stato2-rapporto. Se è ancora oltre 200 mmHg, ripetere i passaggi da 5.5-5.8 fino al PaO2stato2-rapporto è compreso tra 100 e 200 mmHg.</li>
	<li>Se PaO2stato2-rapporto è tra 100 e 200 mmHg, aspettare 30 minuti e verificare nuovamente.</li>
	<li>Se è persistente inferiore a 200 mmHg avviare esperimento per trattamenti e massaggi, altrimenti preparare 2 siringhe più come descritto al punto 5.1 e ripetere i passaggi 5.5-5,9.</li>
	<li>Impostare la ventilazione secondo i suggerimenti dalla rete ARDS20.</li>
</ol>6. fine dell'esperimento e l'eutanasia
<ol><li>Iniettare 0,5 mg di fentanil inoltre al continuo anestesia e attendere per 5 min. iniettare 200 mg di propofol e 40 mmol di cloruro di potassio per eutanasia animale in anestesia profonda.</li>
</ol>

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<li>Wang, H. M., Bodenstein, M., Markstaller, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+the+pathology+of+three+widely+used+animal+models+of+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Overview of the pathology of three widely used animal models of acute lung injury.</a> European Surgical Research. 40 (4), 305-316 (2008).</li>
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Tutti gli autori non divulgare alcun conflitto di interessi finanziario o di qualsiasi altra.

In questo articolo viene descritto un metodo della lesione di polmone indotta da acido oleico come modello per studiare i vari aspetti della ARDS grave. Ci sono anche altri protocolli con emulsioni differenti, differenti siti di iniezione e diverse temperature dell'emulsione23,24,25,26,27,28 ,29<...

La sindrome da distress respiratorio (ARDS) è una sindrome di cure intensive che è stato ampiamente studiata dalla relativa prima descrizione circa 50 anni fa1. Questo corpo di ricerca hanno portato a una migliore comprensione della patofisiologia e provoca lo sviluppo di ARDS conseguente migliore cura del paziente e risultato2,3. Tuttavia, la mortalità nei pazienti affetti da ARDS rimane molto alta con circa 35-40%4,5,6. Il fatto che circa il 10% dei ricoveri di ICU e il 23% dei pazienti di ICU che richiedono la ventilazione meccanica è a causa di ARDS sottolinea la rilevanza per ulteriori ricerche in questo campo.
Modelli animali sono ampiamente utilizzati nella ricerca per esaminare i cambiamenti patofisiologici e potenziali modalità di trattamento per i diversi tipi di malattie. A causa della complessità di ARDS, non esiste nessun singolo modello animale di imitare questa malattia, ma diversi modelli che rappresentano diversi aspetti7. Un modello ben consolidato è iniezione di acido oleico (OAI)-ha indotto la lesione del polmone. Questo modello è stato utilizzato in una vasta gamma di animali, tra cui topi8, ratti9, maiali10, cani11e pecore12. L'acido oleico è un acido grasso insaturo e l'acido grasso più comune nel corpo di esseri umani sani13. È presente nel plasma, le membrane cellulari e del tessuto adiposo umano13. Fisiologicamente, è associato all'albumina mentre è trasportato attraverso il flusso sanguigno13. Aumento dei livelli di acidi grassi nel sangue è associati con diverse patologie e la gravità di alcune malattie correla con livelli di siero acido grasso13. L'acido oleico ARDS-modello è stato sviluppato nel tentativo di riprodurre ARDS causato da embolia lipidica, come si è visto in pazienti di trauma14. L'acido oleico ha effetti diretti su recettori immuni innati nel polmoni13 e trigger l'accumulazione del neutrofilo15, mediatore infiammatorio produzione16e delle cellule morte13. Fisiologicamente, acido oleico induce velocemente di progressione ipossiemia, aumento della pressione arteriosa polmonare e l'accumulo di acqua polmonare extravascolare. Inoltre, induce ipotensione arteriosa e depressione del miocardio7. Gli svantaggi di questo modello sono la necessità di accesso venoso centrale, la dubbia rilevanza meccanicistica e il potenziale progresso letale causata da rapida ipossiemia e depressione cardiaca. Il vantaggio di questo modello rispetto ad altri modelli è l'usabilità in piccoli e grandi animali, la riproducibilità valido dei meccanismi fisiopatologici in ARDS, l'inizio acuto di ARDS dopo l'iniezione di acido oleico, e la possibilità di studiare isolato ARDS senza infiammazione sistemica come molti altri sepsi modelli7. Nel seguente articolo, diamo una descrizione dettagliata della ferita polmonare indotta da acido oleico nei suini e fornire dati rappresentativi per caratterizzare la stabilità dei compromessi nella funzione polmonare. Esistono diversi protocolli per la ferita di polmone OAI-indotta. Il protocollo fornito qui è in grado di indurre in modo affidabile il danno polmonare acuto.

<table><tbody><tr><td>Rubinetto a 3 vie blu</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Svezia</td><td>394602</td><td></td></tr><tr><td>rubinetto a 3 vie rosso</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Svezia</td><td>394605</td><td></td></tr><tr><td>Atracurium</td><td>Hikma Pharma GmbH , Martinsried</td><td>4262659</td><td></td></tr><tr><td>Canula 20 G</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna</td><td>301300</td><td></td></tr><tr><td>Datex Ohmeda S5</td><td>GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finlandia</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Disinfezione</td><td>Sch&uuml; lke & Mayr GmbH, Germania</td><td>104802</td><td></td></tr><tr><td>Tubo endotracheale</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malesia</td><td>112482</td><td></td></tr><tr><td>Introduttore per tubo endotracheale</td><td>R&uuml; sch</td><td>5033062</td><td></td></tr><tr><td>Engstr&ouml; m Carestation</td><td>GE Heathcare, Madison USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Janssen-Cilag GmbH, Neuss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gloves</td><td>Paul Hartmann, Germania</td><td>9422131</td><td></td></tr><tr><td>Incetomat-line 150 cm</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>9004112</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Hameln Pharmaceuticals GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laringoscopio</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malesia</td><td>671067-000020</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di monitoraggio della pressione logica</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MX9606</td><td></td></tr><tr><td>Logicath 7 Fr 3-lumen 30cm</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MXA233x30x70-E</td><td></td></tr><tr><td>Masimo Radical 7</td><td>Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Maschera per cani ventilanti</td><td>Henry Schein, Germania</td><td>730-246</td><td></td></tr><tr><td>Neofox Kit</td><td>Ocean optics Largo, FL USA</td><td>NEOFOX-KIT-PROBE</td><td></td></tr><tr><td>Noradrenalina</td><td>Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH</td><td>73016</td><td></td></tr><tr><td>Acido oleico</td><td>Applichem GmbH Darmstadt, Germania</td><td>1.426.591.611</td><td></td></tr><tr><td>Siringa originale Perfusor 50ml Luer Lock</td><td>B.Braun Melsungen AG, Germania</td><td>8728810F</td><td></td></tr><tr><td>PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110cm</td><td>Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USA</td><td>744F75</td><td></td></tr><tr><td>Set introduttore per guaina percutanea 8,5 e 9 Fr, 10 cm con valvola per emostasi integrata/porta laterale</td><td>Arrow international inc. Reading, PA, USA</td><td>AK-07903</td><td></td></tr><tr><td>Perfusore FM Braun</td><td>B.Braun Melsungen AG, Germania</td><td>8713820</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro di potassio</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>6178549</td><td></td></tr><tr><td>Propofol 2%</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Saline</td><td>B.Braun Melsungen AG, Germania</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem</td><td>Sonosite Bothell, WA, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acciaio inossidabile Macintosh Taglia 4</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malesia</td><td>670000</td><td></td></tr><tr><td>Sterofundin</td><td>B.Braun Melsungen AG, Germania</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stresnil 40mg/ml</td><td>Lilly Germany GmbH, Abteilung Elanco Siringa per la salute</td><td></td><td></td>degli animali</tr><tr><td>10 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna</td><td>309110</td><td></td></tr><tr><td>Siringa 2 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna</td><td>300928</td><td></td></tr><tr><td>Siringa 20 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna</td><td>300296</td><td></td></tr><tr><td>Siringa 5 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spagna</td><td>309050</td><td></td></tr><tr><td>catetere venoso 22G</td><td>B.Braun Melsungen AG, Germania</td><td>4269110S-01</td><td></td></tr></tbody></table>

iniezione di acido oleico in maiali come modello per la sindrome da distress respiratorio

Oleic Acid-Injection in Pigs As a Model for Acute Respiratory Distress Syndrome

La sindrome da distress respiratorio acuta è una malattia di rilevanti intensiva con un'incidenza compresa tra 2,2% e 19% dei pazienti di terapia intensiva. Nonostante i progressi del trattamento negli ultimi decenni, ARDS pazienti soffrono ancora i tassi di mortalità tra i 35 e 40%. C'è ancora una necessità di ulteriori ricerche migliorare l'outcome dei pazienti affetti da ARDS. Un problema è che nessun singolo modello animale può imitare il pathomechanism complesso della sindrome da distress respiratorio, ma esistono diversi modelli per studiare le diverse parti di esso. Iniezione di acido oleico (OAI)-ferita indotta del polmone è una modella ben affermata per studiare strategie di ventilazione, distribuzione di meccanica e ventilazione/perfusione polmonare negli animali. OAI conduce allo scambio di gas gravemente compromessa, deterioramento della meccanica polmonare e rottura della barriera alveolo-capillare. Lo svantaggio di questo modello è la controversa rilevanza meccanicistica di questo modello e la necessità di accesso venoso centrale, che è una sfida soprattutto in modelli animali più piccoli. In sintesi, OAI-indotta del polmone ferita conduce a risultati riproducibili in piccoli e grandi animali e quindi rappresenta un modello particolarmente adatto per lo studio di ARDS. Tuttavia, ulteriore ricerca è necessaria per trovare un modello che imita tutte le parti di ARDS e manca i problemi associati con i diversi modelli esistenti oggi.

PaO2stato2-rapporto diminuisce dopo l'applicazione frazionata di acido oleico (Figura 1). Nello studio presentato, 0,185 ± 0,01 ml kg-1 acido oleico era necessaria per l'induzione di danno polmonare. Tutti gli animali hanno mostrato un'alterata ossigenazione dopo l'induzione di danno polmonare, con varietà nel tempo ulteriore corso. In animale 1 e 3, è rimasto a un livello con piccole fluttuazioni; in animali 2, si osserva un ...

In questo articolo, presentiamo un protocollo per indurre lesioni polmonari acute nei suini tramite l'iniezione venosa centrale di acido oleico. Si tratta di un modello animale stabilito per lo studio della sindrome da distress respiratorio (ARDS).

Iniezione di acido oleico in maiali come modello per la sindrome da Distress respiratorio

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit ...

Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave sui cambiamenti fisiopatologici che si verificano durante l'ARDS per lo sviluppo e la valutazione di nuove opzioni di trattamento per questa malattia. Il principale vantaggio di questa tecnica è che riproduce i cambiamenti patologici di base osservati nell'ARDS umano. Per la strumentazione guidata da ultrasuoni, posizionare una sonda ad ultrasuoni sul legamento inguinale destro del maiale sperimentale e scansionare i vasi femorali.Ruotare la sonda di 90 gradi per visualizzare completamente l'arteria femorale nell'asse lungo e utilizzare l'ago di un Seldinger per cannuare l'arteria femorale destra sotto la visualizzazione ad ultrasuoni in linea. Quando il sangue luminoso pulsante fuoriesca, introdurre il filo di guida e ritrarre l'ago. Verificare che il posizionamento del filo del Seldinger sia corretto visualizzandolo con ultrasuoni.Visualizza la vena femorale e cannulati la vena sotto l'ultrasonografia in linea in continua aspirazione con l'ago. Quando il sangue venoso può essere aspirato, inserire il filo di Seldinger e ritrarre l'ago. Usa la tecnica di Seldinger per inserire una torcia introducibile arteriosa a 5 francesi e un catetere venoso essenziale e tornare indietro i corrispondenti fermacock a tre.Prima di inserire il catetere dell'arteria polmonare, verificare che funzioni correttamente e inserirlo attraverso la torcia venosa sinistra dell'intro intromettitore. Quando il catetere dell'arteria polmonare è passato attraverso la torcia dell'intro introducibile, gonfiare il palloncino con un millilitro d'aria e far avanzare il catetere dell'arteria polmonare monitorando le tipiche forme d'onda. Quindi sgonfiare il palloncino e verificare se il sangue può essere aspirato attraverso tutte le porte del catetere dell'arteria polmonare.Quindi inserire la sonda per la misurazione ultraveloce della pressione parziale dell'ossigeno attraverso la torcia dell'introdura arteriosa destra. Per indurre lesioni polmonari, caricare una siringa da 20 millilitri con 0,1 millilitri per chilogrammo di acido oleico e una seconda siringa da 20 millilitri con due millilitri di sangue appena estratto. Aggiungere la soluzione salina alla siringa con il sangue, per un volume totale di 20 millilitri in entrambe le siringhe e collegare entrambe le siringhe a un fermacock a tre.Collegare una pompa per siringhe noradrenalina a una porta del catetere venoso centrale e iniziare una misurazione della pressione parziale dell'ossigeno ultraveloce. Registrare i valori di base di tutti i parametri rilevanti e impostare la frazione di ossigeno ispirato su 1.0. Condurre una manovra di reclutamento polmonare e collegare il fermacock a tre alla porta prossimale del catetere dell'arteria polmonare.Quindi iniettare le miscele oleiche e saline di sangue, ripetutamente da una siringa all'altra, attraverso il fermaglio a tre vie, per mescolare accuratamente le soluzioni. Quando è stata raggiunta un'emulsione omogenea, iniettare due millilitri dell'emulsione nel catetere venoso centrale e continuare la miscelazione. Monitorare da vicino l'emodinamica dopo l'iniezione, dando noradrenalina come iniezione di bolo da 10 a 100 microgrammi se necessario per mantenere la pressione arteriosa media sopra i 60 millimetri di mercurio.Ripetere l'iniezione di soluzione di acido oleico dei due millilitri ogni tre minuti, fino a quando la pressione parziale arteriosa della frazione di ossigeno del rapporto ispirato è inferiore a 200 millimetri di mercurio. Attendere 30 minuti e rivalutare la pressione parziale della frazione di ossigeno del rapporto ispirato. Se il rapporto è ancora superiore a 200 millimetri di mercurio, ripetere le iniezioni fino a quando la pressione parziale della frazione di ossigeno del rapporto ispirato scende al di sotto dei 200 millimetri di mercurio.Quindi impostare la ventilazione in base ai suggerimenti della rete della sindrome da distress respiratorio acuto. La frazione parziale di pressione dell'ossigeno del rapporto ossigeno ispirato è diminuita dopo l'applicazione frazionata di acido oleico. Nonostante una tipica compromissione dell'ossigenazione dopo l'induzione di lesioni polmonari, si osservano frequenti variazioni di compromissione dell'ossigeno tra gli animali durante il corso del tempo di compromissione.Necessità di un attento monitoraggio della frazione di pressione parziale dell'ossigeno del rapporto ossigeno ispirato durante l'erogazione dell'acido oleico. La diminuzione della frazione di pressione parziale dell'ossigeno del rapporto ossigeno ispirato è parallela ad un aumento della pressione arteriosa polmonare che in genere rimane elevata per il resto dell'esperimento, con alcune fluttuazioni osservate anche tra gli animali. La lesione polmonare è visivamente rilevabile nei polmoni raccolti sei ore dopo l'induzione della lesione polmonare e l'analisi istologica rivela edema alveolare ed emorragia.Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come indurre una lesione polmonare acuta nei maiali per iniezione venosa essenziale di acido oleico. Non dimenticare che lavorare con l'acido oleico può essere estremamente pericoloso e prendere precauzioni come indossare guanti e le classi di sicurezza dovrebbero sempre essere prese durante l'esecuzione di questa procedura.

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lavaggi polmonari ripetute in maiali anestetizzati inducono il danno polmonare simile a importanti aspetti della sindrome da distress respiratorio acuto umana (ARDS). A tal fine i polmoni sono ripetutamente lavaged con soluzione fisiologica 0,9% a 37 ° C. L'obiettivo del protocollo è una attenuazione riproducibile di scambio di gas e emodinamica per la ricerca in ARDS.

Lavage indotta surfattante esaurimento nei suini come un modello della sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS)

Descriviamo un modello di sindrome da distress respiratorio acuto indotto da acido cloridrico (ARDS) in suinetti sottoposti a sedazione con agenti alogenati, isoflurano e sevoflurano, attraverso un dispositivo utilizzato per la sedazione in terapia intensiva inalatoria. Questo modello può essere utilizzato per studiare i meccanismi biologici degli agenti alogenati sulle lesioni polmonari e sulla riparazione.

Somministrazione di agenti alogenati in modelli suini di sindrome da distress respiratorio acuto tramite un dispositivo di tipo unità di terapia intensiva

Il presente protocollo descrive un modello di danno polmonare nei topi che utilizza acido oleico per imitare la sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS). Questo modello aumenta i mediatori dell'infiammazione sull'edema e diminuisce la compliance polmonare. L'acido oleico viene utilizzato sotto forma di sale (oleato) poiché questa forma fisiologica evita il rischio di embolia.

Modello murino di sindrome da distress respiratorio acuto indotto da acido oleico

L'infusione continua di acido oleico nell'arteria polmonare di un maiale adulto anestetizzato induce un'insufficienza respiratoria acuta, consentendo una sperimentazione controllata durante lo spenso respiratorio acuto.

Un modello suino di insufficienza respiratoria acuta con un'infusione continua di acido oleico

Descriviamo una tecnica di ricerca per la broncoscopia a fibre ottiche e di lavaggio broncoalveolare con l'aspirazione a bassa pressione. La tecnica è utilizzata per raccogliere cellule immunitarie dalle superfici bronco polmonare. Viene utilizzato anestesia locale e sedazione cosciente lieve (midazolam). Soggetti tollerano gli effetti collaterali minimi procedura di bene e di esperienza.

Lavaggio broncoalveolare (BAL) di ricerca; ottenere un&#39;adeguata Yield Esempio

Continuo a 12 derivazioni elettrocardiografico (ECG) di monitoraggio in grado di identificare transitoria ischemia miocardica, anche in assenza di sintomi, tra i pazienti con sospetta sindrome coronarica acuta (ACS). In questo articolo si descrive il nostro metodo per avviare il monitoraggio dei pazienti con un dispositivo Holter, scaricando i dati ECG per analisi off-line, e come utilizzare il software ECG per identificare ischemia transitoria.

Un metodo di ricerca per il rilevamento transitoria ischemia miocardica in pazienti con sospetta sindrome coronarica acuta Uso continuo del tratto ST Analisi

Il presente lavoro illustra la convenienza dell'uso dell'immunoterapia sublinguale per aumentare la risposta immunitaria innata nei polmoni e conferire protezione contro la polmonite pneumococcica acuta nel topo.

L&#39;immunoterapia sublinguale come alternativa di indurre una protezione contro le infezioni respiratorie acute

Questo protocollo induce un danno polmonare acuto in un topo che ha una stretta fedeltà alla patogenesi della polmonite acida osservata nell'uomo. Generiamo una lesione polmonare acuta massimale non letale a basso pH e teniamo conto delle differenze nella struttura respiratoria anatomica del roditore utilizzando una tracheostomia aperta accoppiata a un rilascio di pressione circonferenziale.

Aprire tracheostomia gastrico acido aspirazione Modello murino di lesioni polmonari acute Risultati in massima acuta non letale Lung Injury

Questo lavoro descrive un protocollo che utilizza un approccio risolti dai componenti per studiare la sensibilizzazione agli allergeni pollenici in una coorte di pazienti provenienti dalla Cina meridionale con rinite allergica e / o asma.

Un approccio diagnostico risolto con componente per uno studio sugli allergeni di polline delle erbe nei meridionali cinesi con rinite allergica e / o asma

Questo protocollo descrive un metodo per infliggere un'abrasione sulla superficie oculare del mouse e a seguire da allora in poi il processo di cicatrizzazione. Il protocollo si avvale di un oculare burr parzialmente rimuovere l'epitelio di superficie dell'occhio nei topi anestetizzati.

Guarigione delle ferite di abrasione epiteliale corneale con oculare Burr come un modello per Cornea

Scopri come indurre lesioni polmonari acute nei maiali mediante iniezione di acido oleico per studiare la sindrome da distress respiratorio acuto (ARDS). Questo modello riproduce le alterazioni patologiche umane.

Iniezione di acido oleico in maiali come modello per la sindrome da Distress respiratorio

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