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DOI: 10.3791/57797-v
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Substrati con rigidità nella gamma kilopascal sono utili per studiare la risposta delle cellule a rigidità di micro-ambiente fisiologicamente rilevanti. Utilizzando solo un microscopio a fluorescenza widefield, il modulo di Young di gel di silicone morbido può essere determinato utilizzando un rientro con una sfera adatta.
Questo metodo può essere utilizzato per classificare i substrati utilizzati per studiare fenomeni chiave in meccanobiologia, migrazione cellulare e prima generazione. Il vantaggio principale di questa tecnica è che richiede l'uso di un microscopio a campo largo, un'apparecchiatura comunemente disponibile in molti laboratori. Questo metodo può essere applicato per misurare il modulo di Young del gel di silicio o poliacrilammide, nonché di qualsiasi materiale elastico lineare isotropo morbido.
Il substrato preparato e caratterizzato con questo metodo può essere utilizzato anche per esperimenti di auto-allungamento con la base in silicone rigido. Per fabbricare il substrato di silicone morbido dopo aver pesato circa 1,75 grammi ciascuno dei componenti A e B dal kit di elastomeri siliconici morbidi, aggiungere la maggior parte della parte pesata del componente A al vassoio di pesata in polistirene del componente B e utilizzare un bastoncino applicatore appropriato per mescolare i due componenti insieme per cinque minuti. Trasferire il composto in una capsula di Petri da 35 millimetri e lasciare che il substrato si distribuisca uniformemente sulla piastra di Petri per alcuni minuti.
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