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JoVE Journal Bioengineering
Stiffness Measurement of Soft Silicone Substrates for Mechanobiology Studies Using a Widefield Fluorescence Microscope

Misura di rigidità dei substrati in morbido Silicone per gli studi di Mechanobiology usando un microscopio a fluorescenza Widefield

Full Text
7,288 Views
07:02 min
July 3, 2018

DOI: 10.3791/57797-v

Yashar Bashirzadeh*1, Siddharth Chatterji*1, Dakota Palmer*2, Sandeep Dumbali*1, Shizhi Qian1, Venkat Maruthamuthu1

1Department of Mechanical & Aerospace Engineering,Old Dominion University, 2Department of Biological Sciences,Old Dominion University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Substrati con rigidità nella gamma kilopascal sono utili per studiare la risposta delle cellule a rigidità di micro-ambiente fisiologicamente rilevanti. Utilizzando solo un microscopio a fluorescenza widefield, il modulo di Young di gel di silicone morbido può essere determinato utilizzando un rientro con una sfera adatta.

Questo metodo può essere utilizzato per classificare i substrati utilizzati per studiare fenomeni chiave in meccanobiologia, migrazione cellulare e prima generazione. Il vantaggio principale di questa tecnica è che richiede l'uso di un microscopio a campo largo, un'apparecchiatura comunemente disponibile in molti laboratori. Questo metodo può essere applicato per misurare il modulo di Young del gel di silicio o poliacrilammide, nonché di qualsiasi materiale elastico lineare isotropo morbido.

Il substrato preparato e caratterizzato con questo metodo può essere utilizzato anche per esperimenti di auto-allungamento con la base in silicone rigido. Per fabbricare il substrato di silicone morbido dopo aver pesato circa 1,75 grammi ciascuno dei componenti A e B dal kit di elastomeri siliconici morbidi, aggiungere la maggior parte della parte pesata del componente A al vassoio di pesata in polistirene del componente B e utilizzare un bastoncino applicatore appropriato per mescolare i due componenti insieme per cinque minuti. Trasferire il composto in una capsula di Petri da 35 millimetri e lasciare che il substrato si distribuisca uniformemente sulla piastra di Petri per alcuni minuti.

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