Preparazione di campioni larvale della drosofila per spettrometria della cromatografia-massa del Gas (GC-MS)-base di metabolomica

Questo metodo può rispondere a domande chiave nel campo del metabolismo, come ad esempio come l'oncometabolita L2-idrossiglutarato viene sintetizzato nelle cellule sane. Il vantaggio principale di questa tecnica è che consente all'utente di misurare direttamente oltre 100 metaboliti in modo sensibile e riproducibile. In generale, le persone che non conoscono questo metodo avranno difficoltà perché il protocollo richiede un'elaborazione efficiente dei campioni ed è estremamente sensibile al vapore acqueo.

Per iniziare il protocollo, aggiungere un millilitro di cloruro di sodio ghiacciato allo 0,9% in una provetta da 1,5 millilitri contenente larve precedentemente preparate. Chiudere il coperchio, capovolgere verticalmente il tubo per lavare accuratamente le larve e posizionare il tubo sul ghiaccio per 30 secondi. Le larve affonderanno sul fondo del tubo, ma il lievito rimarrà in sospensione.