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DOI: 10.3791/57872-v
Giulio Russo1,2, Franziska Lehne1, Sol M. Pose Méndez1, Stefan Dübel2, Reinhard W. Köster1, Wiebke A. Sassen1
1Division of Cellular and Molecular Neurobiology, Zoological Institute,Braunschweig University of Technology, 2Department of Biotechnology, Institute of Biochemistry, Biotechnology and Bioinformatics,Braunschweig University of Technology
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Vi presentiamo un protocollo efficiente e facile da usare per la preparazione di colture cellulari primarie di embrioni di zebrafish per la transfezione e live cell imaging nonché un protocollo per preparare cellule primarie dal cervello di zebrafish adulto.
Questo metodo fornisce alla comunità del pesce zebra uno strumento per l'analisi delle dinamiche intercellulari con una risoluzione irraggiungibile in vivo. E permette anche di compensare la mancanza di linee cellulari di zebrafish. Il vantaggio principale di questa tecnica è che si isolano e si trasfettano quelle cellule primarie direttamente dal tessuto originale, in modo da non dover mantenere le linee cellulari.
Per iniziare il protocollo, prepara gli embrioni di zebrafish due giorni dopo la fecondazione, o dpf. Il primo giorno sono stati allestiti diversi incroci del ceppo di pesce zebra preferito. Il secondo giorno accoppia il pesce e raccogli le uova subito dopo la deposizione delle uova in una capsula di Petri di plastica di 10 centimetri.
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