Name: Un tronco polmonare Banding modello di sovraccarico pressorio indotto da fallimento e ipertrofia ventricolare destra (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-29T13:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 47 s
Description: Impara la tecnica chirurgica di banding del tronco polmonare per indurre ipertrofia e insufficienza ventricolare destra nel ratto. Questo metodo consente un aumento preciso e riproducibile del postcarico per studiare i meccanismi patologici.

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Questo lavoro è stato supportato dal Consiglio danese per la ricerca indipendente [11e108410], il danese Heart Foundation [12e04-R90-A3852 e 12e04-R90-A3907] e la Novo Nordisk Foundation [NNF16OC0023244].

Tutti i ratti sono stati trattati secondo le linee guida nazionali danesi descritte nella legge danese sulla sperimentazione animale e decreto ministeriale sugli esperimenti sugli animali. Tutti gli esperimenti sono stati approvati dal comitato di revisione etica istituzionale e condotte in conformità con la legge danese per la ricerca sugli animali (numero di autorizzazione 2012-15-2934-00384, Ministero della giustizia danese).
1. adeguamento dell'applicatore Ligating
Nota: Il banding del tronco polmonare viene eseguito con un applicatore di clip ligating aperto modificate con una mascella angolato. L'applicatore è modificato con un meccanismo di arresto regolabile per interrompere la compressione quando le ganasce arriva una distanza esatta da altro. Quando un piccolo titanio legando il clip è stato compresso con l'applicatore modificata, un lume persiste tra le gambe della clip con un diametro specifico secondo la regolazione del meccanismo di arresto (Figura 1).
<ol><li>Scegliere il diametro del banding desiderata, ad esempio, 0,6 mm.</li>
	<li>Regolare ligating applicatore fino a quando la distanza fra le ganasce è 1,0 mm quando completamente compressa. Questo lascia un lume di 0,6 mm, come le gambe di due clip hanno uno spessore di 0,2 mm ciascuno.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58050/58050fig1.jpg"> Figura 1: procedura il PTB. (A) il chirurgico strumenti utilizzati per la procedura PTB compreso applicatore ligating (freccia blu). Applicatore di clip (B) l'arresto regolabile meccanismo della legatura. Girando la ruota dentata (freccia blu) regolerà la posizione del perno (freccia gialla), che ferma la chiusura dell'applicatore quando le ganasce raggiungono una certa distanza gli uni dagli altri. La distanza corrisponde a due volte lo spessore delle gambe della clip più il diametro interno della clip, quando la clip è compresso e può essere calibrata utilizzando ad esempio un ago con un diametro esterno noto. (C) l'applicatore comprime una clip di titanio per un esatto diametro interno pre-specificato dall'adeguamento dell'applicatore. Diametro (D) all'interno della clip compressi possa essere regolato per indurre diversi livelli di gravità di RV ipertrofia e scompenso. Per i dati presentati, un diametro interno di 1,0 mm è stato utilizzato per indurre l'ipertrofia delicata di RV, un diametro interno di 0,6 mm è stato utilizzato per indurre insufficienza moderata di RV e un diametro interno di 0.5 mm è stato utilizzato per indurre il guasto severo di RV. (E) la clip dopo applicazione intorno al tronco polmonare. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58050/58050fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
2. preparazione del ratto
Nota: Altri regimi di analgesici possono essere applicati.
<ol><li>Utilizzare ristallo di ratto Wistar pesa circa 100 – 120 g. Al fine di mantenere la temperatura corporea durante l'intervento chirurgico, è necessario utilizzare un termoforo coperto.</li>
	<li>Per la chirurgia, utilizzare un ventilatore meccanico impostato su un tidal volume di circa 1,75 mL e frequenza respiratoria pari a 75 min.</li>
	<li>Anestetizzare il ratto con sevoflurane (7% mix in 1,5 L di O2) in una camera di induzione per 5 minuti. Intubare il ratto utilizzando una cannula IV 17 G, dove il 2 mm distale dell'ago sono state tagliate in modo che il catetere morbido coprire la punta. Rimuovere l'ago e collegare la cannula al ventilatore.</li>
	<li>Posto il ratto sul dorso il termoforo. Assicurarsi che l'intubazione è corretto osservando i movimenti del torace. Questi dovrebbero essere senza differenze di lato e in pace con il ventilatore. Nota: Assenza di movimenti del torace, contrazioni addominali e inflazione dello stomaco nella parte superiore sinistra dell'addome sono segni di un tubo fuori luogo. Rimuovere la cannula, rimettere il ratto nella camera di induzione e ri-intubarla.</li>
	<li>Dopo intubazione corretta, ridurre il sevoflurane per concentrazione di manutenzione (mix di 3,5% di O2, 1,5 L/min) e fissare le zampe del ratto per il rilievo di riscaldamento.</li>
	<li>Confermare amputate prober controllando i riflessi di ritiro delle estremità usando una pinza per spremere le zampe del ratto.</li>
	<li>Iniettare i ratti con buprenorfina (0,1 mg/kg per via sottocutanea (s.c.)) e carprofene (5 mg/kg s.c.) per alleviare il dolore post-operatorio.</li>
	<li>Radere il torace e disinfettare con clorexidina.</li>
</ol>3. isolamento del tronco polmonare
<ol><li>Con un paio di forbici, praticare un'incisione di 2 cm in pelle lungo la parte centrale dello sterno. Identificare i principali muscoli pettorali e tagliare il suo attacco sternale. Identificare la 2nd, 3rde 4th costa sottostante.</li>
	<li>Facoltativamente, è possibile afferrare il costa 2nd con una pinza di fissaggio, metta una sutura (4-0, multifilamento, assorbibile) tutto il costa 2nd dallo spazio intercostale 1st alla parte mediale inferiore dello spazio intercostale 2nd . Fare un nodo costante al fine di legare l'arteria toracica anteriore. Nota: Questo può essere utile se l'emorragia dall'arteria toracica anteriore è un problema ricorrente.</li>
	<li>Tagliare i 4th, 3rde costa 2nd vicino allo sterno con un paio di forbici e attentamente sezionare i muscoli intercostali fino a quando è stato eseguito un thoracotomy di sinistra completo. Se qualsiasi emorragia dall'arteria toracica anteriore si verifica, comprimere con un pean e legare l'arteria.</li>
	<li>Inserire un divaricatore tra lo sterno e la costae e aprirlo per ottenere un buon campo di funzionamento. Nella parte superiore del campo è il timo che copre l'aorta e il tronco polmonare. Attentamente sollevare il timo utilizzando un pean e girarla verso l'alto al fine di esporre l'aorta e il tronco polmonare sottostante.</li>
	<li>
Guidare la punta di un piccolo hooklet chirurgica con un angolo di 85° attraverso il seno pericardico trasversale situato dietro l'auricola sinistra. Tirare a metà strada attraverso il seno e guidare la punta del gancio verso l'alto fino a quando non appare fra l'aorta ascendente e tronco polmonare.
	<ol>
<li>Rimuovere qualsiasi tessuto connettivo che copre la punta con una forbice iris al fine di separare il tronco polmonare dall'aorta ascendente.</li>
		<li>Ripetere il passaggio con un gancio più grande (opzionale).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Guida un forcipe angolato muscolo intorno al tronco polmonare attraverso il passaggio fatto con il hook(s). Afferrare l'estremità di una legatura di circa 10 cm (4-0, multifilamento) e tirare la metà della legatura indietro attraverso il passaggio. Ora il tronco polmonare è separato dall'aorta ascendente e può essere controllato tramite la legatura intorno ad esso.</li>
</ol>4. applicazione della Clip
<ol><li>Caricare l'applicatore ligating regolato con una clip. Guidare con attenzione una delle ganasce e una gamba del clip però il passaggio intorno al tronco polmonare. Utilizzare la legatura per tirare delicatamente il tronco polmonare verso l'alto e nella forcella della clip.</li>
	<li>Quando il tronco polmonare è nella forcella della clip e le due punte delle gambe clip sono liberi di tutto il tessuto connettivo, comprimere il clip con l'applicatore per applicare il banding.</li>
	<li>Osservare come la RV dilata immediatamente in risposta al banding e rimuovere la legatura.</li>
</ol>5. chiusura del torace
<ol><li>Rimuovere il pean da timo e riposizionare il timo nella sua posizione naturale. Rimuovere il retrattore.</li>
	<li>Chiudere il torace in tre strati: lo strato dell'intercostale, il grande muscolo pettorale e la pelle con sutura (4-0, multifilamento, assorbibile). Iniettare 2 mL di salino s.c. per sostituire il liquido perdita durante l'intervento chirurgico.</li>
	<li>Spegnere il sevoflurano ed e tenere il ratto sul ventilatore (1,5 L di O2) fino a quando comincia a respirare spontaneamente. Quindi, estubare il ratto.</li>
	<li>Trattare i ratti con buprenorfina nell'acqua potabile per i tre giorni seguenti14 o applicare un protocollo simile analgesico. Dopo tre giorni, i ratti hanno recuperato e sono senza disagio.</li>
	<li>Nelle settimane successive, il benessere dei ratti e dei possibili effetti negativi dovrebbe essere valutato su una base quotidiana. La guarigione della ferita dalla toracotomia dovrebbe ricevere un'attenzione particolare durante la prima settimana al fine di rilevare eventuali segni di infezione o insufficienza delle cicatrici. Se i ratti mostrano segni di omissione di prosperare tra cui pelo ispido, difficoltà motorie, problemi respiratori e perdita di peso, devono essere strettamente monitorati ed eutanasia se perdono più del 20% del loro peso corporeo o sviluppare fulminante respiratoria insufficienza.</li>
</ol>6. sham chirurgia
<ol><li>Eseguire un intervento chirurgico di sham seguendo tutti i passaggi sopra tranne per l'applicazione della clip (passaggio 4).</li>
</ol>

<ol><li>Kaufman, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+profiling+of+left+and+right+ventricular+hypertrophy+in+congenital+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">Genomic profiling of left and right ventricular hypertrophy in congenital heart disease.</a> Journal of Cardiac Failure. 14 (9), 760-767 (2008).</li>
<li>Zungu-Edmondson, M., Suzuki, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+stress+response+mechanisms+in+right+and+left+ventricles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Rare+Diseases+Research+%26+Treatment%22%5BJournal%5D)">Differential stress response mechanisms in right and left ventricles.</a> Journal of Rare Diseases Research & Treatment. 1 (2), 39-45 (2016).</li>
<li>Zaffran, S., Kelly, R. G., Meilhac, S. M., Buckingham, M. E., Brown, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+myocardium+derives+from+the+anterior+heart+field%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Right ventricular myocardium derives from the anterior heart field.</a> Circulation Research. 95 (3), 261-268 (2004).</li>
<li>de Raaf, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SuHx+rat+model%3A+partly+reversible+pulmonary+hypertension+and+progressive+intima+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22The+European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">SuHx rat model: partly reversible pulmonary hypertension and progressive intima obstruction.</a> The European Respiratory Journal. 44 (1), 160-168 (2014).</li>
<li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 302 (4), L363-L369 (2012).</li>
<li>Bogaard, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+pulmonary+artery+pressure+elevation+is+insufficient+to+explain+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Chronic pulmonary artery pressure elevation is insufficient to explain right heart failure.</a> Circulation. 120 (20), 1951-1960 (2009).</li>
<li>Borgdorff, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+enhances+systolic+adaptation%2C+but+does+not+prevent+diastolic+dysfunction%2C+in+the+pressure-loaded+right+ventricle%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil enhances systolic adaptation, but does not prevent diastolic dysfunction, in the pressure-loaded right ventricle.</a> European Journal of Heart Failure. 14 (9), 1067-1074 (2012).</li>
<li>Mendes-Ferreira, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+right+ventricle+remodeling+in+response+to+pressure+overload+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Distinct right ventricle remodeling in response to pressure overload in the rat.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 311 (1), H85-H95 (2016).</li>
<li>Piao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inhibition+of+pyruvate+dehydrogenase+kinase+improves+impaired+cardiac+function+and+electrical+remodeling+in+two+models+of+right+ventricular+hypertrophy%3A+resuscitating+the+hibernating+right+ventricle%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">The inhibition of pyruvate dehydrogenase kinase improves impaired cardiac function and electrical remodeling in two models of right ventricular hypertrophy: resuscitating the hibernating right ventricle.</a> Journal of Molecular Medicine. 88 (1), 47-60 (2010).</li>
<li>Hirata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+Model+of+Pulmonary+Artery+Banding+Leading+to+Right+Heart+Failure+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Novel Model of Pulmonary Artery Banding Leading to Right Heart Failure in Rats.</a> BioMed Research International. 2015, 753210(2015).</li>
<li>Schou, U. K., Peters, C. D., Kim, S. W., Frøkiær, J., Nielsen, S. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0939860006000186">Characterization of a rat model of right-sided heart failure induced by pulmonary trunk banding.</a> Journal of Experimental Animal Science. 43 (4), 237(2007).</li>
<li>Andersen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+bisoprolol+and+losartan+treatment+in+the+hypertrophic+and+failing+right+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">Effects of bisoprolol and losartan treatment in the hypertrophic and failing right heart.</a> Journal of Cardiac Failure. 20 (11), 864-873 (2014).</li>
<li>Holmboe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inotropic+Effects+of+Prostacyclins+on+the+Right+Ventricle+Are+Abolished+in+Isolated+Rat+Hearts+With+Right-Ventricular+Hypertrophy+and+Failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Inotropic Effects of Prostacyclins on the Right Ventricle Are Abolished in Isolated Rat Hearts With Right-Ventricular Hypertrophy and Failure.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (1), 1-12 (2017).</li>
<li>Jessen, L., Christensen, S., Bjerrum, O. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antinociceptive+efficacy+of+buprenorphine+administered+through+the+drinking+water+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">The antinociceptive efficacy of buprenorphine administered through the drinking water of rats.</a> Lab Anim. 41 (2), 185-196 (2007).</li>
<li>Andersen, A., Povlsen, J. A., Botker, H. E., Nielsen-Kudsk, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+hypertrophy+and+failure+abolish+cardioprotection+by+ischaemic+pre-conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Right ventricular hypertrophy and failure abolish cardioprotection by ischaemic pre-conditioning.</a> European Journal of Heart Failure. 15 (11), 1208-1214 (2013).</li>
<li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+Cardiac+Output+Leads+Hepatic+Fibrosis+in+Right+Heart+Failure+Model+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Low Cardiac Output Leads Hepatic Fibrosis in Right Heart Failure Model Rats.</a> PloS one. 11 (2), e0148666(2016).</li>
<li>Marques, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fat+diet-induced+obesity+Rat+model%3A+a+comparison+between+Wistar+and+Sprague-Dawley+Rat%5BTitle%5D)+AND+%22Adipocyte%22%5BJournal%5D)">High-fat diet-induced obesity Rat model: a comparison between Wistar and Sprague-Dawley Rat.</a> Adipocyte. 5 (1), 11-21 (2016).</li>
<li>Osadchii, O., Norton, G., Deftereos, D., Woodiwiss, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+strain-related+differences+in+myocardial+adrenergic+tone+and+the+impact+on+cardiac+fibrosis%2C+adrenergic+responsiveness+and+myocardial+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Research%22%5BJournal%5D)">Rat strain-related differences in myocardial adrenergic tone and the impact on cardiac fibrosis, adrenergic responsiveness and myocardial structure and function.</a> Pharmacological Research. 55 (4), 287-294 (2007).</li>
<li>Brower, M., Grace, M., Kotz, C. M., Koya, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+growth+characteristics+of+Sprague+Dawley+rats+obtained+from+different+sources%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Research%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of growth characteristics of Sprague Dawley rats obtained from different sources.</a> Laboratory Animal Research. 31 (4), 166-173 (2015).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+neonatal+rat+model+of+increased+right+ventricular+afterload+by+pulmonary+artery+banding%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">A neonatal rat model of increased right ventricular afterload by pulmonary artery banding.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1734-1739 (2017).</li>
<li>Borgdorff, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+loading+conditions+reveal+various+patterns+of+right+ventricular+adaptation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Distinct loading conditions reveal various patterns of right ventricular adaptation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 305 (3), H354-H364 (2013).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare

Descriviamo un metodo accessibile e altamente riproducibile del tronco polmonare bendaggio utilizzando un applicatore ligating modificate per comprimere una clip di titanio intorno al tronco polmonare. Regolando l'applicatore per comprimere il clip per diametri interni differenti, possono essere indotta fenotipi distinti di RV ipertrofia e scompenso tra cui insufficienza grave di RV con manifestazione extra cardiaco di scompenso.
Anche se semplice, il protocollo contiene alcuni passaggi critic...

Il ventricolo di destra (RV) può adattarsi ad un sovraccarico di pressione persistente. Nel tempo, tuttavia, meccanismi adattativi non riescono a sostenere la gittata cardiaca, dilata la RV e la RV non riesce alla fine. Funzione di RV è il fattore prognostico principale di parecchi disordini cardiopolmonari compreso ipertensione arteriosa polmonare (PAH), ipertensione polmonare tromboembolica (CTEPH) e varie forme di malattia di cuore congenita con un sovraccarico di pressione (o volume) di RV. Malgrado il trattamento intenso, RV fallimento rimane una causa predominante di morte in queste condizioni.
Come conseguenza la proprietà uniche1,2 e sviluppo embriologico3 del RV, conoscenza derivata da infarto di sinistra semplicemente non può essere estrapolato per insufficienza cardiaca destra. Modelli animali di insufficienza cardiaca destra sono pertanto necessari al fine di indagare i meccanismi di guasto di RV e potenziali strategie di trattamento farmacologico.
Ci sono sperimentale modelli di ipertensione polmonare indotta da SU5416 combinato con ipossia (SuHx)4 o monocrotaline (MCT)5, che indurre indebolimento RV secondario alla malattia nel vasculature polmonare. Questi modelli vengono utilizzati per valutare gli effetti terapeutici di farmaci che hanno come destinazione il sistema vascolare polmonare. Sia il SuHx che il modello MCT sono modelli non fissa postcarico del fallimento di RV. Di conseguenza, non è possibile concludere se un miglioramento nella funzione RV dopo un intervento è secondario al postcarico riducendo gli effetti vascolari polmonari o se è causato da effetti diretti sul camper. Inoltre, il modello MCT ha parecchi effetti extra cardiaci.
Nei modelli Bordatrici tronco polmonare sperimentale, il postcarico del camper è stato risolto a causa di una riduzione meccanica del tronco polmonare. Questo consente per l'indagine degli effetti cardiaci diretti di un intervento sulla RV indipendente da eventuali effetti vascolari polmonare6,7,8,9. Di solito, il bendaggio viene eseguito inserendo un ago lungo il tronco polmonare. Poi una legatura è collocata intorno l'ago e il tronco polmonare e legata con un nodo, e l'ago viene rimosso lasciando la sutura intorno al tronco polmonare. A seconda del calibro dell'ago, possono essere applicati diversi gradi di costrizioni, ma nonostante questo approccio viene ampiamente utilizzato, ha anche alcuni svantaggi. In primo luogo, il diametro del bendaggio non è esattamente lo stesso come il diametro esterno dell'ago come la legatura è legata intorno sia l'ago e il tronco polmonare. In secondo luogo, ci possono essere variazioni significative come strettamente il nodo è legato che lo rende difficile da riprodurre un certo grado di bendaggio. Questo porterà ad una variazione di diametro Bordatrici e quindi una maggiore dispersione. Infine, il nodo potrebbe allentarsi nel tempo.
Uno studio si applica una clip di tantalio chiusa a metà intorno al tronco polmonare10. Hanno compresso la clip intorno al tronco polmonare ad un'area interna di 1,10 mm2 e rispetto a ratti sottoposti a banding con una sutura utilizzando un ago da 18 G. Nel complesso, banding con il clip è stato associato con meno complicanze peri-chirurgiche e la varianza dei dati.
Sulla base dei principi descritti da Schou et al.11, abbiamo ulteriormente sviluppato e caratterizzato il tronco polmonare banding modello (PTB) di RV ipertrofia e scompenso. Qui, presentiamo la nostra esperienza nell'utilizzo di questo modello basato sui risultati di precedenti studi12,13. Per questo modello, una clip di titanio viene compressa intorno al tronco polmonare per un esatto diametro interno preimpostato, che può essere regolato al fine di indurre i fenotipi distinti di fallimento RV.

<table><tbody><tr><td>17 G IV Cannula Venflon</td><td>Becton Dickinson, US</td><td>393228</td><td>Distale 2 mm dell'ago sono stati tagliati 1</td></tr><tr><td>mL siringa + 26 G ago</td><td>Becton Dickinson, US</td><td>303172 & 303800</td><td></td></tr><tr><td>4-0 sutura multifilamento assorbibile</td><td>Covidien, US</td><td>GL-46-MG</td><td>Polysorb, viola, 5x18"</td></tr><tr><td>4-0 legatura multifilamento</td><td>Covidien, US</td><td>LL-221</td><td>Polysorb, viola, 98"</td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Indivior UK Limited</td><td></td><td>Approvvigionamento locale, Temgesic 0,3 mg/mL</td></tr><tr><td>Carprofene</td><td>ScanVet, DK</td><td>27693</td><td>Norodyl 50 mg/mL</td></tr><tr><td>Clorexidina</td><td>Faaborg Pharma, DK</td><td></td><td>Appaltatore locale</td></tr><tr><td></td><td>Aesculap, Germania</td><td>BV010R</td><td>Blunt, autotrattenente, 70 mm</td></tr><tr><td>Ear Hooklet</td><td>Lawton, Germania</td><td>66-0261</td><td>Piccolo, 14 cm, punta modificata a un angolo di 85&deg;</td></tr><tr><td>Gel per gli occhi</td><td>Decra, Regno Unito</td><td></td><td>Lubrithal, Approvvigionamento locale</td></tr><tr><td>Pinze, Tessuto delicato</td><td>Lawton, Germania</td><td>09-0020</td><td></td></tr><tr><td>Pinze, Dissezione</td><td>Lawton, Germania</td><td>09-0013</td><td>1 regolare, 1 con punta modificata ad un angolo di 100&deg;</td></tr><tr><td>Sistema di anestesia a gas</td><td>Penlon Limited, Regno Unito</td><td>SD0217SL</td><td>Sigma Delta</td></tr><tr><td>Vaporizzatore Tagliacapelli</td><td>Oster</td><td>76998-320-051</td><td></td></tr><tr><td>Applicatore di clip per legatura aperta Horizon</td><td>Teleflex, US</td><td>137085</td><td>Modificato con meccanismo di arresto regolabile</td></tr><tr><td>Clip in titanio Horizon</td><td>Teleflex, US</td><td>001200</td><td>Piccola</td></tr><tr><td>camera di induzione</td><td>N/A</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forbice dell'iride</td><td>Lawton, Germania</td><td>05-1450</td><td></td></tr><tr><td>Forbice dell'iride</td><td>Aesculap, Germania</td><td>BC060R</td><td></td></tr><tr><td>Ventilatore meccanico</td><td>Ugo Basile, Italia</td><td>7025</td><td></td></tr><tr><td>Microforbice</td><td>Lawton, Germania</td><td>63-1406</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio</td><td>Carl Zeiss, Germania</td><td>303294-9903</td><td></td></tr><tr><td>Porta aghi</td><td>Lawton, Germania</td><td>08-0011</td><td>TITEGRIP</td></tr><tr><td>Pean</td><td>Lawton, Germania</td><td>06-0100</td><td>Halsted-Mosquito, dritto</td></tr><tr><td>Pro-Optha</td><td>Lohmann & Rauscher, Germania</td><td>16515</td><td>Soluzione salina per tampone</td></tr><tr><td>9 mg/mL</td><td>Fresenius Kabi, DK</td><td>209319</td><td></td></tr><tr><td>Sevoflurane</td><td>AbbVie, US</td><td></td><td>Sevorane, Approvvigionamento locale</td></tr><tr><td>Uncino chirurgico</td><td>Lawton, Germania</td><td>51-0665</td><td>Cushing, 19 cm, punta modificata a un angolo di 90 gradi;</td></tr><tr><td>Nastro chirurgico</td><td>3M, US</td><td>1530-0</td> Regolatore <td>di temperatura per micropori</td></tr><tr><td></td><td>CMA Microdialisi; Svezia</td><td>8003760</td><td>CMA 450</td></tr><tr><td>Pesatrice</td><td>VWR, Stati Uniti</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wistar svezzati per ratti Janvier</td><td>Labs, Francia</td><td></td><td>RjHan:WI, 100-120 g</td></tr></tbody></table>

un tronco polmonare banding modello di sovraccarico pressorio indotto da fallimento e ipertrofia ventricolare destra

A Pulmonary Trunk Banding Model of Pressure Overload Induced Right Ventricular Hypertrophy and Failure

Insufficienza ventricolare destra (RV) indotta dal sovraccarico di pressione costante è un contributore importante alla morbosità ed alla mortalità in parecchi disordini cardiopolmonari. Affidabili e riproducibili modelli animali di insufficienza di RV sono pertanto autorizzati al fine di indagare i meccanismi della malattia e gli effetti di potenziali strategie terapeutiche. Fascia del tronco polmonare è un metodo comune per indurre l'ipertrofia RV isolato ma in generale, modelli precedentemente descritti non sono riusciti a creare un modello stabile di RV ipertrofia e scompenso.
Vi presentiamo un modello del ratto dell'ipertrofia RV indotto sovraccarico di pressione causata da tronco polmonare banding (PTB) che consente diversi fenotipi dell'ipertrofia RV con e senza insufficienza di RV. Usiamo un applicatore ligating modificate per comprimere una clip di titanio intorno al tronco polmonare di un diametro interno pre-impostato. Usiamo i diametri diversi clip per indurre le diverse fasi della progressione di malattia da lieve ipertrofia RV per insufficienza di RV scompensata.
L'ipertrofia RV si sviluppa costantemente in ratti sottoposti alla procedura di PTB e a seconda del diametro della clip bendaggio applicato, siamo in grado di riprodurre con precisione severities differenti di malattia che vanno da ipertrofia compensata a grave scompensata RV guasto con manifestazioni extra-cardiache.
Il modello presentato PTB è che un modello valido e robusto di sovraccarico pressorio indotto RV ipertrofia e scompenso che presenta parecchi vantaggi ad altri modelli banding tra cui elevata riproducibilità e la possibilità di indurre guasto RV grave e scompensata.

Utilizzando la procedura descritta di PTB negli studi precedenti dal nostro gruppo12,13, abbiamo indotto ipertrofia RV (PTB mite) dalla fascia con un clip di 1,0 mm, un moderato grado di insufficienza di RV (PTB moderato) di banding con una clip di 0,6 mm e un grado severo di guasto di RV (PTB grave) dalla fascia con un clip di 0,5 mm. I ratti sottoposti alle manifestazioni extra cardiache sviluppate Bordatrici severe di guasto di...

Presentiamo un metodo chirurgico per indurre l'ipertrofia ventricolare destra e insufficienza in ratti.

Un tronco polmonare Banding modello di sovraccarico pressorio indotto da fallimento e ipertrofia ventricolare destra

Right ventricular (RV) failure induced by sustained pressure overload is a major contributor to morbidity and mortality in several cardiopulmonary ...

Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave sui meccanismi sottostanti e sul trattamento del giusto fallimento ventricolare. Il vantaggio principale di questa tecnica è che consente un aumento del post-carico preciso e riproducibile che induce ipertrofia ventricolare destra e fallimento. Le implicazioni di questa tecnica si estendono verso la terapia del cedimento ventricolare destro, perché elimina gli effetti secondari alla vasodilatazione polmonare.Prima di iniziare la procedura di isolamento del tronco, selezionare un diametro appropriato per la bande e regolare l'applier di clip legante fino a quando la distanza tra le ganasce è di un millimetro quando la clip è completamente compressa lasciando un lume di 6 millimetri. Successivamente, confermare una mancanza di risposta nel dito del piedi in uno svezzamento del ratto Wistar anestetizzato da 100 a 120 grammi e fare un'incisione cutanea di due centimetri lungo la linea mediana dello sterno. Al microscopio sezionato tagliare il muscolo pettorale maggiore al suo attacco sternale e identificare il secondo, il terzo e il quarto costae.Utilizzare un paio di forbici per tagliare il quarto, il terzo e il secondo costae vicino allo sterno e sezionare attentamente i muscoli intercostali fino a quando non è stata eseguita una toracotomia sinistra completa. Quando si esegue la toracotomia laterale sinistra si dovrebbe stare molto attenti in quanto l'arteria mammoriale interna sinistra è solo soffiare la gabbia toracica, quindi fai molta attenzione. Inserire un retrattore tra lo sterno e le costae e aprire le mascelle fino a quando il timo non è visibile nella parte superiore del campo visivo.Utilizzare i fermagli di piselli per capovolgere con cura il timo per esporre l'aorta e il tronco polmonare e guidare la punta di una piccola uninettia chirurgica, piegata ad un angolo di 85 gradi, attraverso il seno paracardico inverso dietro l'appendice atriale sinistra. Tirare la gancia a metà strada attraverso il seno e guidare la punta del gancio dell'orecchio verso l'alto fino a quando non appare tra l'aorta ascendente e il tronco polmonare. Quando si posiziona il gancio auricolare assicurarsi di avere l'angolo retto.non dovresti usare alcuna forza potrebbe essere un po 'difficile inizialmente, ma puoi padroneggiarla con la pratica. Usa le forbici dell'iride per rimuovere qualsiasi tessuto connettivo che copre la punta per separare il tronco polmonare dall'aorta ascendente. Usa gli encefali angolati per guidare un pezzo di 10 centimetri di legatura multifilimante 4/0 intorno al tronco polmonare attraverso il passaggio fatto dal gancio.Afferra la fine della legatura con un'altra forza. Il tronco polmonare dovrebbe ora essere separato dall'aorta ascendente e può essere controllato dalla legatura che lo circonda. Quando il tronco polmonare è stato fissato, utilizzare una clip per caricare l'applier per clip legante di regolazione.Guidare con cura una mascella e una gamba della clip attraverso il passaggio intorno al tronco polmonare usando la legatura per tirare delicatamente il tronco polmonare su e nella forchetta della clip. Quando il tronco polmonare si trova nella forcella e le due punte della clip sono libere da qualsiasi tessuto connettivo, comprimere la clip per applicare la fascia rimuovendo la legatura non appena il ventricolo destro si dilata in risposta alla fasciatura. Quando il tronco è stato fasciato rimuovere i farsa dal timo e riportare il tessuto nella sua posizione naturale.Rimuovere il riavvolgitore e utilizzare suture multifiliment 4/0 assorbibili per chiudere il torace in tre strati. Quindi iniettare per via sottocutanea 2 millilitri di soluzione salina per sostituire qualsiasi fluido perso durante l'intervento chirurgico e monitorare l'animale fino alla piena rimortiquenza. Selezionando diversi diametri della clip è possibile indurre diversi stadi di gravità della malattia, come evidente qui da un crescente grado di ipertrofia ventricolare destra.Solo una forte fasciatura causa manifestazioni cardiache extra tra cui insufficienza epatica. Le differenze nella banda del tronco pulminare moderata o grave sono evidenti aumentando la pressione ventricolare destra e causano un guasto ventricolare destro moderato o grave, come rivelato da una diminuzione graduale della produzione cardiaca e escursione sistolica del piano anulare tricuspide all'aumentare della gravità della fasciatura. La procedura di fasciatura polmonare del tronco ha indotto la dilatazione ventricolare destra è evidente da un aumento sia del volume diastolico finale ventricolare destro che del volume sistolico nei ratti fasciati del tronco polmonare moderato rispetto agli animali a farsa, e nei ratti fasciati del tronco polmonare grave rispetto agli animali moderati e sciamanici.Si osserva anche una diminuzione graduale della frazione di espulsione ventricolare destra. L'ipertrofia ventricolare destra è ulteriormente indicata da un aumento dell'area della sezione trasversale cardiomiocitaria nei ratti fasciati tronco polmonare, rispetto agli animali a farsa e da altri cambiamenti morfologici al ventricolo destro associati alla cedimento del ventricolo destro, inclusa la fibrosi ventricolare destra. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in 30 minuti se viene eseguita correttamente.Durante il tentativo di questa procedura è importante ottenere risultati coerenti con il modello prima di avviare la ricerca sperimentale. Dopo il suo sviluppo questa tecnica ha spianato la strada ai ricercatori nel campo dell'insufficienza cardiaca destra per esplorare interventi farmacologici e meccanismi di base. Dopo aver visto questo video dovresti avere una buona comprensione su come eseguire la banda polmonare del tronco.

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Descriviamo la creazione di un modello di ratto di sovraccarico di pressione indotto moderato rimodellamento e disfunzione sistolica precoce in cui vengono attivati i percorsi di trasduzione del segnale coinvolti nell'avvio del processo di rimodellamento. Questo modello animale aiuterà a identificare gli obiettivi molecolari per l'applicazione di strategie terapeutiche anti-rimodellamento precoce per l'insufficienza cardiaca.

Un modello di pressione indotto moderate rimodellamenti e disfunzione stolica rispetto al sovraccarico di insufficienza cardiaca systolica

Questo manoscritto descrive la tecnica chirurgica e l'approccio sperimentale per sviluppare un grave sovraccarico di pressione ventricolare destra per modellare i loro fenotipi adattivi e disadattivi.

Un grande modello animale per l'ipertensione polmonare e l'insufficienza ventricolare destra: legatura dell'arteria polmonare sinistra e bendaggio progressivo dell'arteria polmonare principale nelle pecore

Il presente protocollo descrive una nuova tecnica di bendaggio aortico nei topi per indurre l'ipertrofia cardiaca da sovraccarico di pressione. Per le fascette, viene utilizzato un anello di gomma con un diametro interno fisso. Questa nuova tecnica promette meno varianza e dati più riproducibili per esperimenti futuri.

Bendaggio aortico O-ring rispetto alla costrizione aortica trasversale tradizionale per modellare l'ipertrofia cardiaca indotta da sovraccarico pressorio

L'insufficienza ventricolare destra e il rigurgito tricuspide funzionale sono associati a cardiopatia del lato sinistro e ipertensione polmonare, che contribuiscono in modo significativo alla morbilità e alla mortalità nei pazienti. Stabilire un modello ovino cronico per studiare l'insufficienza ventricolare destra e il rigurgito funzionale della tricuspide aiuterà a comprenderne i meccanismi, la progressione e i possibili trattamenti.

Modello ovino cronico di insufficienza ventricolare destra e rigurgito funzionale tricuspide

Descriviamo un modello murino di sovraccarico di pressione ventricolare destra indotto dal banding polmonare del tronco. Nel documento sono inclusi protocolli dettagliati per l'intubazione, la chirurgia e la fenotipizzazione mediante ecocardiografia. Per l'intubazione e la chirurgia vengono utilizzati strumenti su misura, che consentono una riproduzione rapida ed economica del modello.

Un modello murino di ipertrofia ventricolare destra indotta da sovraccarico di pressione e insufficienza mediante bande del tronco polmonare

L'insufficienza cardiaca destra (RHF) è caratterizzata da dilatazione cardiaca destra e ipertrofia, che porta a disfunzione ventricolare e atriale. Le condizioni cardiopolmonari associate all'RHF sono accompagnate da un aumento del rischio di aritmie cardiache. Questo articolo descrive un modello standardizzato di RHF indotta da bande arteriose polmonari associata a un aumento dell'aritmogenesi ventricolare e atriale.

Modello di ratto di rimodellamento cardiaco destro e aritmia mediante bande arteriose polmonari

La presentazione di metodi dettagliati per la valutazione della funzione del ventricolo destro migliorerà la qualità e l'affidabilità della ricerca sull'ipertensione polmonare, offrendo un solido quadro per studi futuri e migliorando la riproducibilità tra diversi laboratori.

Valutazione della funzione ventricolare destra in modelli sperimentali di ipertensione arteriosa polmonare

Descriviamo una procedura graduale per la creazione di sovraccarico di pressione e ipertrofia ventricolare sinistra in ratti Wistar dalla costrizione dell'aorta ascendente con una piccola clip metallica. Questo modello è ampiamente utilizzato per studiare i cambiamenti di rimodellamento durante l'ipertrofia cardiaca e per identificare e valutare le strategie per la regressione di tali cambiamenti.

Crescente aortica Costrizione in ratti per la creazione di sovraccarico di pressione cardiaca Ipertrofia Modello

Ventricolo destro (RV) La disfunzione è fondamentale per la patogenesi della malattia cardiovascolare, ma le metodologie non sono disponibili per la sua valutazione. I recenti progressi nella ecografica forniscono un'opzione non invadente e preciso per lo studio RV longitudinale. Qui, abbiamo dettaglio un metodo step-by-step ecocardiografico utilizzando un modello murino di sovraccarico di pressione RV.

Valutazione del ventricolo destro Struttura e funzione in modello murino di polmonare Arteria Costrizione da ecocardiografia transtoracica

L'ipertensione polmonare tromboembolica cronica (CTEPH) e la disfunzione ventricolare destra (RV) sono state indotte nei suinetti dall'ostruzione progressiva delle arterie polmonari. Le conseguenze sono state notevolmente simili a quelle osservate nei pazienti con CTEPH. Questo modello animale sarebbe uno strumento molto utile per la fisiopatologia e gli esperimenti terapeutici su CTEPH e RV failure.

Tromboembolica cronica Ipertensione polmonare e valutazione dei ventricolare destra Funzione nel Maialino

Impara la tecnica chirurgica di banding del tronco polmonare per indurre ipertrofia e insufficienza ventricolare destra nel ratto. Questo metodo consente un aumento preciso e riproducibile del postcarico per studiare i meccanismi patologici.

Un tronco polmonare Banding modello di sovraccarico pressorio indotto da fallimento e ipertrofia ventricolare destra

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