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November 09, 2018
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Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo muscoloscheletricho, come l’effetto di un intervento sulla gamma di movimento dell’articolazione del ginocchio utilizzando un modello di ratto. Il principale vantaggio di questa tecnica è che fornisce un metodo preciso, riproducibile e indipendente dall’utente per misurare l’estensione dell’articolazione del ginocchio del ratto. Inizia usando forbici e forcep per deglovare gli arti inferiori del ratto eutanasiato e rimuovere la pelle dalla facia sottostante.
Quindi, posizionare il corpo su un lato con la gamba sperimentale rivolta verso l’alto. Posizionare il femore nel morsetto metallico scanalato integrato nella fase di montaggio dell’artrometro. Fissare il femore punzonando i fori attraverso il muscolo con il cacciavite di precisione per posizionare il morsetto distale al trochanter maggiore.
Quindi, regolare il condilo femorale laterale sopra il centro di rotazione dell’artrometro. Posizionare il braccio mobile con due montanti dietro la gamba, appena prossimale al calcaneo per spingere il ginocchio in estensione passiva una volta attivato il motore elettrico. Utilizzare una chiave esagonale per stringere il morsetto del femore alla sua base fino a quando non è fissato.
Assicurarsi che la fotocamera sia montata correttamente sull’arthometer utilizzando un cacciavite. Verificare che la fotocamera sia a fuoco manuale e mettere a fuoco la fotocamera sul condilo femora. Impostare la direzione dell’artrometro in senso orario o antiorario a seconda della direzione della gamma di movimento del ginocchio in fase di test e della posizione del ratto.
Attivare il motore dell’artrometro premendo contemporaneamente i pulsanti di accensione e avvio. Il motore dell’artrometro si muoverà a una velocità di 6,6 giri/min e poi si fermerà per 2,1 secondi dopo aver raggiunto la prima coppia preimpostata. Quando viene raggiunta la prima coppia, il LED corrispondente si accenderà e la fotocamera digitale scatta automaticamente una foto del ginocchio.
Una volta scattata l’immagine, l’artrometro continuerà alla coppia preimpostata successiva più alta. Una volta applicate le quattro coppie, l’artrometro si fermerà. Una volta posizionato il ratto sull’artrometro e avviato il test, il tempo totale per testare un ginocchio è di circa 18,8 secondi.
Per isolare la componente artrogena o non muscolare di una contrattura, ripristinare la sequenza di coppia per rilasciare la forza applicata alla gamba, quindi eseguire una miotomia dei muscoli transarticolari posteriori. Sezionare il muscolo abbastanza prossimale all’articolazione del ginocchio per assicurarsi che la capsula non sia tagliata. Dopo aver testato entrambe le gambe prima e dopo la miotomia e aver sezionato tutti i tessuti richiesti, smaltire la carcassa animale e tutti i materiali rischiosi a seguito del protocollo istituzionale e pulire l’artrometro.
Aprire il file contenente l’immagine digitale scattata dalla fotocamera montata sull’artrometro nell’immagine J.La persona che esegue l’analisi deve essere accecata al raggruppamento sperimentale dell’animale. Selezionare lo strumento angolo dalla barra degli strumenti principale e tracciare l’angolo femorale-tibiale disegnando una linea femorale dal centro del morsetto del femore al condilo laterale e la linea tibiale dal condilo femorale laterale al malleolo laterale. Utilizzate lo strumento di misura facendo clic su Analizza (Analyze), quindi misura (Measure) per visualizzare l’angolo calcolato prodotto dalle due linee disegnate sopra.
Utilizzare la convenzione di zero gradi per in media estensione completa. Questa cifra mostra l’estensione massima del ginocchio dopo 16 settimane di immobilizzazione per sette ratti rispetto all’arto contralaterale non immobilizzato. Per il ginocchio immobilizzato, la capacità di massima estensione è stata ridotta rispetto al contralaterale.
Dopo la miotomia, la massima capacità di estensione per il ginocchio sperimentale e contralaterale è aumentata, tuttavia, il ginocchio sperimentale continua a dimostrare una contrazione della flessione. Durante il tentativo di questa procedura, è importante assicurarsi che il morsetto femorale sia ben fissato al fine di evitare il movimento del ginocchio durante i test. Seguendo questa procedura, altri metodi come l’analisi istologica del ginocchio, la struttura articolare può essere eseguita per rispondere a domande aggiuntive relative al tessuto e ai cambiamenti cellulari che si verificano nell’articolazione del ginocchio per influenzare il suo intervallo in movimento.
L'obiettivo del protocollo è quello di misurare la gamma di estensione di movimento del ginocchio del ratto. Gli effetti di varie malattie che aumentano la rigidità dell'articolazione del ginocchio e l'efficacia dei trattamenti possono essere quantificati.
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Campbell, T. M., Reilly, K., Goudreau, L., Laneuville, O., Uhthoff, H., Trudel, G. Using a Knee Arthrometer to Evaluate Tissue-specific Contributions to Knee Flexion Contracture in the Rat. J. Vis. Exp. (141), e58084, doi:10.3791/58084 (2018).
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