Un protocollo di Conditioned Place Preference per l'incubazione di Craving nei ratti di misura
6 novembre 2018
Qui, un protocollo di preferenza (CPP) di morfina condizionata posto è descritto per misurare l'incubazione di desiderio in ratti.
Questo metodo può aiutare ad affrontare alcune domande chiave nel campo della tossicodipendenza sulle voglie di consumo di droga e sull'incubazione della risposta al desiderio. Con soli sei giorni di condizionamento della morfina, la risposta della memoria di preferenza del luogo condizionata può essere estesa a 18 giorni per l'osservazione dei fenomeni di brama nel modello del ratto. Le implicazioni di questo modello di condizionamento della morfina del ratto si estendono verso il promuovere la nostra comprensione dei meccanismi sottostanti dell'incubazione delle voglie.
Prima di iniziare la procedura, costruire un apparato di preferenza del luogo condizionato a tre camere composto da due grandi camere laterali nere da 30 per 25 per 30 centimetri. E una camera centrale bianca da 11 a 25 per 30 centimetri, con un pavimento liscio in PVC bianco. Quindi aggiungere diversi segnali tattili alle camere laterali per testare le preferenze iniziali del topo.
Per il precondizione degli animali, rimuovere le porte della ghigliottina per consentire il libero accesso all'intero apparato. E metti un topo nella camera centrale. Registrare l'attività dell'animale per 15 minuti, calcolando il tempo trascorso nelle due camere laterali il terzo giorno come linea di base.
Per il condizionamento degli animali, iniettare il gruppo di ratti condizionati alla morfina con un millilitro per chilogrammo di 10 milligrammi per millilitro morfina cloridrato IP al mattino. E con un millilitro per chilogrammo salina 10 ore dopo, ogni giorno per sei giorni. Mettendo ogni topo nel suo farmaco appropriato accoppiato, non preferito o soluzione salina accoppiato, camera preferita per 45 minuti immediatamente dopo ogni iniezione.
Per il test degli animali condizionati alla morfina, nei giorni due, 10 e 18 dopo l'ultima sessione di condizionamento, rimuovere le porte della ghigliottina per consentire il libero accesso all'intero apparato. E registrare l'attività di ogni animale per 15 minuti dopo il posizionamento nella camera centrale per l'esplorazione gratuita dell'intero apparato in uno stato libero di morfina. La conservazione della memoria della preferenza del luogo condizionato nei gruppi morfina e salina viene valutata misurando il punteggio delle preferenze del luogo condizionato in più punti di tempo dopo l'ultima sessione di condizionamento.
Il numero di voci alle camere laterali è analogo al numero di risposte attive nel paradigma di auto-amministrazione, riflettendo la proprietà rinforzante della morfina e con un numero maggiore di voci che indicano l'incubazione del desiderio. Come illustrato, è possibile stabilire correttamente una preferenza di posizione condizionata dalla morfina utilizzando questo protocollo. Indurre una memoria di ricompensa della morfina a lungo termine per un massimo di 18 giorni dopo l'ultima sessione di condizionamento.
Quando si tenta questa procedura, è importante ricordare di scegliere di bilanciare i segnali tattili. Seguendo questa procedura, è possibile eseguire altre misure come il ripristino dopo ogni condizionamento. Per rispondere ad ulteriori domande sul fatto che il reintegro sotto l'incubazione del desiderio abbia meccanismi sottostanti simili.
Dopo il reintegro, questa tecnica ha spianato la strada ai ricercatori nel campo dell'aggiunta di farmaci per esplorare l'incubazione del desiderio nei paradigmi di preferenza del luogo condizionato dei ratti.
Panoramica
In questo articolo viene descritto un protocollo di preferenza condizionata per un determinato posto (CPP) con morfina per misurare l'incubazione del desiderio nei ratti. Il metodo consente ai ricercatori di esplorare i meccanismi alla base delle voglie da farmaco e della dipendenza.
Componenti Chiave dello Studio
Area della Scienza
- Neuroscienze
- Psicologia comportamentale
- Farmacologia
Sfondo
- Comprendere le voglie da farmaco è fondamentale nella ricerca sulle dipendenze.
- La preferenza per il luogo condizionato è un metodo comune per valutare i ricordi legati al farmaco.
- Il fenomeno dell'incubazione della voglia può essere studiato attraverso questo modello.
- Studi precedenti hanno dimostrato gli effetti a lungo termine del condizionamento farmacologico.
Scopo dello studio
- Stabilire un modello affidabile di condizionamento della preferenza per la morfina nei ratti.
- Indagare l'incubazione del desiderio nel tempo.
- Valutare le proprietà rinforzanti della morfina attraverso risposte comportamentali.
Metodi Utilizzati
- Costruito un apparato CPP a tre camere per i test.
- Precondizionamento dei ratti per stabilire preferenze di base.
- Somministrazione di iniezioni di morfina e soluzione salina per sei giorni.
- Misurazione dell'attività e delle preferenze in diversi momenti successivi al condizionamento.
Risultati principali
- Stabilimento con successo della CPP alla morfina con mantenimento della memoria a lungo termine.
- L'aumento degli ingressi nelle camere associate al farmaco ha indicato l'incubazione del desiderio.
- Le risposte comportamentali riflettevano le proprietà rinforzanti della morfina.
- I risultati supportano ulteriori indagini sui meccanismi del desiderio nell'addiction.
Conclusioni
- Il modello di condizionamento preferenziale alla morfina è efficace per lo studio della voglia di droga.
- È possibile osservare gli effetti a lungo termine del condizionamento alla morfina.
- Questo protocollo può contribuire alla comprensione della dinamica della dipendenza.
Domande frequenti
Rilevanza Industriale del Progetto
Questo protocollo consente ai ricercatori del settore biofarmaceutico di modellare l'aumento dipendente dal tempo della voglia di droga durante l'astinenza, una sfida fondamentale nelle terapie per le dipendenze. Catturando l'incubazione della voglia nei ratti, il metodo supporta la validazione degli obiettivi terapeutici e la riduzione del rischio meccanicistico per nuovi interventi volti a prevenire le ricadute. Il metodo fornisce un ponte traslazionale tra lo screening preclinico e la valutazione di candidati clinici nei percorsi per i disturbi da uso di sostanze.
Applicazioni Strategiche nella Ricerca e Sviluppo in Biopharma
Scoperta Precoce e Validazione del Target
- Valore scientifico: Esamina ipotesi terapeutiche riguardo alla memoria della ricompensa a lungo termine e alla neurobiologia del desiderio.
- Valore operativo: Permette la validazione funzionale di bersagli attraverso letture comportamentali dei fenomeni di incubazione.
- Valore predittivo: Supporta la selezione del portafoglio identificando bersagli che modulano l'intensificazione del desiderio dipendente dal tempo.
Sviluppo di Screening e Saggi
- Prontezza del saggio: Prepara sistemi biologici validati per lo screening di composti in base a parametri legati al desiderio.
- Output quantitativo: Misura gli ingressi nelle camere come indicatore di risposta attiva, consentendo l'analisi dose-risposta.
- Riproducibilità: Stimoli tattili standardizzati e progettazione delle camere favoriscono la coerenza tra laboratori nella valutazione del desiderio.
Ricerca Translazionale e Preclinica
- Rilevanza per la malattia: Modella l'incubazione del desiderio, un fenomeno clinicamente osservato nella dipendenza umana.
- Continuità preclinica: Permette il passaggio dalla scoperta all'osservazione post-condizionamento per un periodo di 18 giorni.
- Decisioni basate sul rischio: Fornisce criteri di avanzamento/cessazione basati sull'attenuazione dell'incubazione del desiderio da parte di composti in esame.
Integrazione di Pipeline e Flusso di Lavoro
Il metodo si inserisce nel percorso di scoperta che va dalla verifica dell'ipotesi sul bersaglio fino all'ottimizzazione del capostazione, consentendo in particolare la valutazione di composti che interrompono l'incubazione del desiderio durante periodi prolungati di astinenza.
- Biologia della Scoperta: Supporta l'analisi meccanicistica della persistenza della memoria associata alla morfina e delle neuroadattazioni legate al desiderio.
- Screening: Fornisce letture comportamentali quantitative (ingressi nella camera) per valutare gli effetti dei composti sull'incubazione del desiderio.
- Analisi: Genera dati temporali sulle preferenze e sugli ingressi per confrontare le condizioni attraverso diversi intervalli di astinenza.
- Ricerca Translazionale: Si allinea ai tempi clinici dell'incubazione, sostenendo la validità predittiva delle strategie di prevenzione delle ricadute.
- Riutilizzo Aziendale: Stabilisce una piattaforma riutilizzabile per valutare diverse interazioni farmacologiche mirate alla persistenza del desiderio.
Impatto Operativo ed Aziendale
- Valore scientifico: Fornisce una previsione affidabile dell'interazione con il bersaglio attraverso la modellizzazione di traiettorie di desiderio clinicamente rilevanti.
- Valore operativo: Offre una valutazione standardizzata e scalabile dell'incubazione del desiderio con minima complessità procedurale.
- Valore strategico: Migliora l'efficienza del capitale consentendo l'identificazione precoce di composti che attenuano i processi mnemonici maladattivi.
- Impatto sul portafoglio: Facilita la priorizzazione dei candidati aggiustata per il rischio, in base agli effetti sull'espressione a lungo termine del desiderio.
Considerazioni sull'implementazione
- Richiede competenze specifiche in farmacologia comportamentale dei roditori e condizionamento della preferenza del posto.
- Dipende da una costruzione precisa delle camere con segnali tattili distinti sul pavimento.
- Necessita di procedure di manipolazione e somministrazione costanti durante il periodo di condizionamento di sei giorni.
- Si basa su una valutazione in cieco degli ingressi nelle camere per ridurre al minimo il bias dell'osservatore.
- Limitato alla misurazione del comportamento di avvicinamento; non coglie le dimensioni affettive o motivazionali del desiderio.
