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DOI: 10.3791/58759-v
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Zona marginale B cellule (MZBs) rispondono alla forza di taglio flusso di ri-orientare il loro percorso di migrazione il flusso. Questo protocollo viene illustrato come registrare e analizzare la migrazione utilizzando un'unità fluidica, pompa, sistema di formazione immagine del microscopio e software libero.
Questo metodo può aiutare a comprendere le domande chiave nel campo della migrazione delle cellule immunitarie, come come il citoscheletro invia forze di taglio e come i ligandi integrini e le chemiochine influenzano la migrazione indotta dal flusso dei leucociti. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è un nuovo tipo di test di migrazione che è facile da eseguire per i principianti. Utilizza solo attrezzature e reagenti disponibili in commercio, nonché software libero.
Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulle cellule di zona marginale B, può anche essere applicato ad altre cellule immunitarie, come le cellule T attivate. Il giorno prima dell'esperimento, scongelare un'aliquota di ICAM-1 e diluirla in PBS ad una concentrazione finale di cinque microgrammi per millilitro. Quindi, aggiungere 30 microlitri di ICAM-1 alle camere desiderate di uno scivolo di flusso.
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