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Determinazione dei sottoinsiemi di regolamentazione delle cellule T nel timo murino, pancreatico ...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Determination of Regulatory T Cell Subsets in Murine Thymus, Pancreatic Draining Lymph Node and Spleen Using Flow Cytometry

Determinazione dei sottoinsiemi di regolamentazione delle cellule T nel timo murino, pancreatico drenante linfonodi e milza mediante citometria a flusso

Full Text
12,372 Views
08:06 min
February 27, 2019

DOI: 10.3791/58848-v

Zhengkang Luo1, Lina Thorvaldson1, Martin Blixt1, Kailash Singh1

1Department of Medical Cell Biology,Uppsala University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Qui, presentiamo un protocollo per preparare singole cellule da timo murino, pancreatico drenante linfonodi e milza per studiare ulteriormente queste cellule mediante citometria a flusso. Inoltre, questo protocollo è stato utilizzato per determinare le sottopopolazioni di cellule T regolatorie mediante citometria a flusso.

Questo protocollo aiuta a indagare il ruolo delle cellule immunitarie in particolari organi in salute e patologia. Il vantaggio principale di questa tecnica è che questa è una tecnica economica poiché è una tecnica manuale. A dimostrare la procedura sarà Zhengkang Luo, dottorando del mio laboratorio.

Per iniziare, posizionare le ghiandole timiche e le milza di topi precedentemente eutanasiati in fiale a scintillazione da 20 ml, o tubi conici da 15 ml, riempiti con 5 ml della soluzione salina bilanciata di Hank. Posizionare i linfonodi drenante pancreatico in micro-tubi da 1,5 ml riempiti con 1 ml di RPMI-1640. Assicurarsi di utilizzare l'intero timo e milza e tutti i PDLN.

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