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DOI: 10.3791/59015-v
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Un approccio è descritto per la rilevazione in tempo reale della risposta immunitaria innata di ferite cutanee e Staphylococcus aureus infezione dei topi. Di confronto LysM-EGFP topi (che possiedono i neutrofili fluorescenti) con un LysM-EGFP incrociate topo immunodeficiente, abbiamo anticipato la nostra comprensione dell'infezione e lo sviluppo di approcci per combattere l'infezione.
Le tecniche che monitorano il carico batterico e un neutrofilo rispondono contemporaneamente possono fornire informazioni sui meccanismi di persistenza dello Staph aureus e sull'efficacia delle strategie di trattamento. Il vantaggio principale di questa tecnica è che più parametri possono essere misurati longitudinalmente in un ospite vivo per tutta la durata dell'infezione. È fondamentale mostrare dove posizionare la ferita su un dorsum di topo, come asportare la pelle e come inoculare la ferita con Staph aureus.
Inizia scongelando il ceppo di aureo Staph di bioluminescenza di interesse dallo stoccaggio negativo di 80 gradi Celsius sul ghiaccio. Prima di strisciare la coltura su una piastra di agar di sangue bovino al 5%. Per un'incubazione notturna a 37 gradi Celsius.
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