Utilizzando Flight Mills per misurare la propensione di volo e le prestazioni di Western Corn Rootworm, Diabrotica virgifera virgifera (LeConte)

Insetti di diverse età, stato di accoppiamento, condizioni di allevamento, eccetera, spesso differiscono nella propensione al volo o nelle prestazioni. Gli esperimenti di mulino a volo possono rivelare gli effetti relativi di tali fattori sul comportamento di volo. Sebbene sia difficile da studiare sul campo, i mulini a volo consentono un ampio sondaggio del volo in condizioni controllate.

La gestione di una resistenza dei parassiti agli insetticidi, comprese le colture transgeniche, richiede la comprensione del suo comportamento di volo. Lo sbursal del verme radicolare di mais occidentale è complesso e gli studi sul mulino a volo stanno aiutando a chiarirlo. Con l'adattamento, questo metodo può essere applicato a quasi tutte le specie di insetti, piccole o grandi, parassiti o non parassiti.

Il tethering di qualsiasi insetto è la tecnica più difficile da padroneggiare. I coleotteri con un piccolo pronoto come i rootworms sono particolarmente impegnativi. Esercitati a tethering di individui non importanti per i tuoi esperimenti reali perché molti verranno scartati.

Ci si aspetta una curva di apprendimento lungo, quindi sii paziente con te stesso. Ci sono molte sfumature per il tethering. Guardare vale più di mille parole.

Per iniziare, piegare un filo d'acciaio di 40 millimetri lungo 28 gauge a 90 gradi al centro. Lavarsi le mani per rimuovere detriti, sporcizia o olio. Prendi una piccola quantità di cera dentale leggermente più grande di una testa a spillo e arrotolala tra le dita fino a formare una palla.

Posizionare uno scarafaggio adulto su una superficie piana e posizionare il suo lato dorsale verso l'alto. Riposizionare le gambe se necessario in modo che lo scarafaggio giace completamente piatto sulla superficie. Utilizzare un accendino butano per riscaldare brevemente la cera dentale sul filo per meno di un secondo.

Non riutilizzare la cera se è stata riscaldata troppo a lungo e caduta dal filo in quanto non aderira efficacemente alla cuticola dell'insetto. Dopo l'anestesia dello scarafaggio, posizionare con cura l'estremità del filo d'acciaio con la cera dentale fusa sulla superficie dorsale del pronoto mentre si punta l'altra estremità del filo senza cera dentale lungo la linea mediana dell'addome. Per evitare di ostacolare il volo, assicurarsi che la cera fusa non si inglga sulle elitra o sulle sue suture.

C'è solo una breve finestra di tempo disponibile tra il riscaldamento della cera sul tether e l'apposizione allo scarabeo anestetizzato. Ma con abbastanza pratica, il tethering diventerà una seconda natura. Posizionare l'estremità libera del filo nell'apertura del tubo metallico cavo del braccio del mulino di volo.

Assicurarsi che il filo si adatti abbastanza strettamente da essere tenuto in posizione dall'attrito. Immediatamente dopo aver montato uno scarafaggio, strappare un piccolo pezzo di carta velina da un tessuto più grande. Offri il pezzo di tessuto allo scarabeo tethered appeso al mulino di volo per il contatto tarsale.

Ciò ridurrà notevolmente il comportamento iniziale di fuga o atterraggio del volo. Tether coleotteri aggiuntivi per i test di volo. Eliminare la presenza umana nella sala di volo almeno 30 minuti prima dell'inizio del test.

Prima dei test di volo, avviare il programma software del mulino di volo. Immettere le informazioni nella scheda inizializzazione. Impostare l'ora di inizio e l'ora di fine per la durata desiderata del test di volo.

Impostare la soglia minima su zero minuti. Ciò garantisce che qualsiasi rilevamento del braccio di volo che passa il sensore venga registrato. Impostare la soglia massima su un minuto che garantisca che tra i rilevamenti del sensore del braccio di volo debba trascorrere un minuto prima di dichiarare la fine di un volo.

Immettere un nome per il file. Impostare l'intervallo di log dati non elaborati su un minuto per controllare l'output dei giri registrati ogni minuto. Nella scheda informazioni sull'oggetto compilare le colonne etichettate ID, specie, età, sesso, dieta e commento come desiderato.

Successivamente, tornare alla scheda di inizializzazione e far scorrere automaticamente il pulsante in alto a sinistra dello schermo. Quindi clicca sul pulsante start. Una volta che l'ora corrente corrisponde all'ora di inizio, il programma inizia a raccogliere dati grezzi per eventuali coleotteri volanti come visto nella scheda stato e debug.

Se il programma è impostato su auto, il programma interrompe la raccolta di dati non elaborati una volta che l'ora corrente corrisponde all'ora di fine. In alternativa, fare clic sul pulsante di arresto per interrompere il programma prima dell'ora di fine pianificata. Fare clic sull'uscita al termine del periodo di test del volo.

Assicurarsi che un file TDMS sia salvato sotto il nome file immesso durante l'inizializzazione del programma. Fare clic sul file TDMS e salvare il documento come foglio di calcolo. Dopo il completamento di un test del mulino di volo, rimuovere tutti i coleotteri testati in volo.

Rimuovere il tallone di cera che collega il filo al pronoto e sbucciare delicatamente il filo dal pronoto. L'insetto è disponibile per ulteriori sperimentazioni, se lo si desidera. La femmina di sei giorni accoppiata femmina di radica di mais occidentale è stata lasciata sui mulini di volo per 22 ore consecutive a partire da 30 minuti prima dell'inizio dell'alba simulata e la loro attività di volo è stata registrata.

La prima scheda del foglio di calcolo risultante riassume i singoli adulti testati. Per lo scarabeo femmina collegato al mulino di volo numero due, il foglio di calcolo mostra il numero di voli, le rivoluzioni totali per volo, l'ora di inizio e di fine di ogni volo e la durata di ogni volo. Questa femmina si impegnò in diversi voli indipendenti, la maggior parte dei quali erano molto brevi.

Tuttavia, nel volo numero cinque, la femmina ha viaggiato per 1.258 metri in un periodo di 38 minuti di volo ininterrotto. Lo scarabeo femmina collegato al mulino di volo numero uno non si è fatto prendere in volo durante il periodo di prova, quindi viene visualizzato un foglio di calcolo vuoto. Un riepilogo dei parametri di volo dai dati grezzi è stato recuperato dal software del mulino di volo.

I parametri totali del volo si riferiscono alla somma di tutti i voli di un individuo durante il periodo di prova di 22 ore, mentre i parametri di volo più lunghi si riferiscono al volo ininterrotto più lungo durante il test. È molto importante gestire lo scarafaggio con cura durante il tethering. Durante questo processo, lo scarafaggio è facilmente danneggiato o tethered in modo improprio, il che si tradurrà in dati di volo errati.

La facile rimozione della cera di tether dalla cuticola consente di testare gli effetti dei gruppi di volo e di trattamento dei tratti successivi di interesse come la fecondità e la longevità.