Name: Chirurgia del nervo facciale nel modello di ratto per studiare linibizione assonale e la rigenerazione (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-05T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 s
Description: Scopri la chirurgia del nervo facciale nel modello di ratto per studiare l'inibizione assonale e la rigenerazione. Questo metodo consente di valutare terapie per la paralisi facciale e analizzare i processi di recupero neuronale.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

S.A.A. è finanziato dall'American Academy of Facial Plastic and Reconstructive Surgery Leslie Bernstein Grants Program.

Tutti gli interventi sono stati eseguiti in stretta conformità con le linee guida dei National Institutes of Health (NIH). Il protocollo sperimentale è stato approvato dal Institutional Animal Care & Use Committee (IACUC) dell'Università del Michigan prima dell'implementazione. Sono stati utilizzati ratti Sprague-Dawley di dieci settimane.
1. Prima del giorno operativo
<ol><li>Garantire uno stock adeguato di strumenti chirurgici sterilizzati, farmaci analgesici, farmaci anestetici e ossigeno prima della giornata operativa. Vedere La Tabella dei Materiali per un elenco completo.</li>
</ol>2. Configurazione preoperatoria
<ol><li>Garantire uno spazio di lavoro adeguato, compreso lo spazio per almeno due individui (il chirurgo e un assistente). NOTA: è necessario un tavolo operatorio dedicato, spazio per la configurazione della macchina per anestesia e spazio di archiviazione adeguato per le forniture sterilizzate e di backup.</li>
	<li>Calibrare un microscopio operativo per l'uso durante le procedure. Assicurarsi che il chirurgo abbia la capacità di regolare le maniglie del microscopio e i pulsanti zoom/focus posizionando una copertura sterilizzata sopra le maniglie /pulsanti NOTA: Abbiamo utilizzato un foglio di alluminio sterilizzato sopra le maniglie/pulsanti.</li>
</ol>3. Anestesia e preparazione
<ol><li>Posizionare l'animale nella camera di anestesia e indurre l'anestesia generale attraverso l'1,8% di isoflurane e 0,9 l/min di ossigeno.<ol>
<li>Confermare un adeguato piano di anestesia attraverso una valutazione della respirazione spontanea e una valutazione della coscienza valutando la risposta di smorfia dell'animale a un pizzico.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Applicare il lubrificante per gli occhi bilateralmente per proteggersi dall'irritazione corneale o secchezza.</li>
	<li>Rasare i siti operativi con un rasoio o un clipper automatico.<ol>
<li>Stabilire un metodo per l'identificazione del ratto in questo momento, sia tramite un'etichetta dell'orecchio o un'etichetta/marcatura della coda.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Somministrare un'iniezione sottocutanea di 0,05 mg/kg di buprenorphina lungo la schiena dell'animale per la profilassi contro il dolore postoperatorio.</li>
</ol>4. Approccio chirurgico e modelli di lesioni
<ol><li>Trasferire l'animale al tavolo operatorio e continuare il flusso di gas tramite un naso cono. Assicurarsi che una piastra di riscaldamento sia posizionata sotto l'animale e il campo sterile per mantenere la temperatura corporea.</li>
	<li>Mettere la garza sterilizzata (arrotolata e fissata con nastro adesivo) da utilizzare come rotolo di collo per il ratto; questo fornirà una maggiore esposizione del campo chirurgico. Si noti che il posizionamento appropriato dell'animale è fondamentale per un'efficiente identificazione del nervo e la dissezione.</li>
	<li>Preparare la pelle del viso dell'animale per la procedura. Utilizzare clorèxidine o una soluzione a base di iodio per pulire il sito chirurgico 3x, alternandolo al 70% di etanolo, per garantire la disinfezione.</li>
	<li>Pianificare e contrassegnare l'incisione chirurgica, se lo si desidera. Manipolare l'orecchio ipsilaterale in una direzione anteriore-posteriore per determinare il ripiegamento naturale della pelle postauricolare.</li>
	<li>Modellare un'incisione di 4-5 mm nella piega postauricolare con forbici iris taglienti o una lama numero 15. Questo può essere espanso più avanti nella procedura in base alle esigenze.</li>
	<li>Sezionata in modo schiacciante attraverso l'immediata fascia sottocutanea e posiziona un retrattore micro-Weitlaner per migliorare l'esposizione. Si noti che ci possono essere vasi sanguigni di piccolo calibro in questa zona; questi sono meglio evitati ritraendo in modo superiore o inferiore tramite il retrattore Weitlaner.</li>
	<li>Identificare il muscolo digastrico anteriore mentre viaggia in una direzione inferiore a superiore verso il suo inserimento lungo la base del cranio.<ol>
<li>Diffondere delicatamente attraverso il ventre muscolare lungo il suo punto di inserimento per rivelare il tendine del ventre digastrico anteriore. Si noti che il tendine appare come un processo bianco filmy emanato dal muscolo con un inserimento solido sulla base del cranio.</li>
	</ol></li>
	<li>Dopo l'identificazione del muscolo digastrico anteriore e del suo tendine, regolare il retrattore Weitlaner per ritrarre ulteriormente la pancia muscolare. Si noti che la regione successivamente esposta è lo spazio tridimensionale in cui si trova il tronco principale del nervo facciale. NOTA: Questa regione è delimitata in modo superiore e mediale dalla base del cranio, lateralmente dal muscolo digastrico anteriore, posteromediale dal canale uditivo e in modo inferiore dalle strutture del collo, compresa l'arteria temporale superficiale.</li>
	<li>Dopo un'adeguata esposizione, identificare il tronco principale del nervo facciale mentre viaggia in modo inferiore da sotto il tendine del muscolo digastrico, dove esce dal forame stilomastoide dalla base del cranio. Si noti che il nervo appare come una corda bianca perla, racchiusa nella fascia marina parotide dell'animale. Prestare attenzione quando espone ulteriormente il nervo, per i seguenti motivi.<ol>
<li>Evitare la dissezione aggressiva, o si diffonde perpendicolarmente, per proteggersi da lesioni neuroprassia mediata allungata.</li>
		<li>Evitare la dissezione aggressiva posteriormente e medialmente diretta per evitare di violare i tessuti sottili che sovrasserverono il condotto uditivo in quanto ciò potrebbe introdurre la flora dell'orecchio medio nel campo chirurgico.</li>
		<li>Evitare di danneggiare l'arteria temporale superficiale attraverso un'ampia dissezione mediale e inferiore. Si noti che una lesione sarà identificata da sangue vivace e pulsatile.<ol>
<li>Se l'arteria è ferita, applicare una pressione rapida con un applicatore con punta di cotone o una garza sterile tramite pinze. Gli agenti emostatici o sigillanti di fibrina liquida possono essere collocati in prossimità. Tenete a mente che l'animale può richiedere un'iniezione sottocutanea di 0.9% sterile salina per la stabilizzazione dei fluidi.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Tracciare il tronco principale distay dissipando lungo il nervo in una direzione inferiore, distay dall'uscita del forame stylomastoid.<ol>
<li>Estendere l'incisione originale per consentire una piena esposizione del nervo e dei suoi rami. Fare attenzione a evitare una rottura della ghiandola parotide come questo potrebbe provocare sialocele postoperatorio.</li>
	</ol></li>
	<li>Indurre i modelli di lesioni desiderati come segue.<ol>
<li>Per una ferita da schiacciamento, utilizzare le pinze del gioielliere dalla superficie liscia per afferrare saldamente il nervo e comprimerlo9. Applicare una pressione costante e riproducibile sul nervo per un periodo di 30 s per garantire un'adeguata lesione da schiacciamento.</li>
		<li>Per una semplice transezione, afferrare la fascia sovrastante il nervo, o l'epineurium immediato, con pinze dai denti fini, e utilizzare microscissors taglienti per transetto pulito il nervo nel punto desiderato con un solo taglio. Fare attenzione a evitare l'eccesso di trazione sul nervo con le pinze.</li>
		<li>Per un modello di gap nervoso, creare il divario nervoso desiderato utilizzando un metodo simile alla semplice lesione di transezione. Utilizzare l'albero sterilizzato di un applicatore con punta di cotone tagliato al gap nervoso desiderato lunghezza-intraoperatorio per garantire la somiglianza del modello di lesione tra gli animali.</li>
	</ol></li>
</ol>5. Chiusura delle ferite
<ol><li>Irrigare la ferita con sterile salina e asciugarla con garza sterile.</li>
	<li>Approssimare i bordi della pelle in modo semplice e subcuticolare con suture assorbibili, o utilizzare colla della pelle o clip della ferita, che sono accettabili anche per la chiusura della ferita. Posizionare un punto sepolto prendendo un morso profondo-superficiale di un bordo della pelle e poi un successivo morso superficiale-profondo del bordo opposto della pelle.</li>
</ol>6. Recupero postoperatorio
<ol><li>Somministrare un'iniezione sottocutanea di analgesico antinfiammatorio non steroideo (ad esempio 0,05 mg/kg di buprenorfina e 0,5 mg /kg di Carprofen) per il controllo del dolore postoperatorio. Posizionare l'iniezione lungo la schiena dell'animale.</li>
	<li>Cessare la somministrazione dell'agente anestetico e consentire all'animale di inalare ossigeno per un ulteriore 1 min.</li>
	<li>Mettere l'animale in una scaldatto (tramite una lampada termica), gabbia asettica priva di materiale da letto per evitare l'ingestione accidentale. Si noti che l'animale in genere dimostra segni di recupero entro 1-2 min e può apparire disorientato, con un recupero ritardato della funzione della gamba posteriore.</li>
	<li>Riportare gli animali nelle loro gabbie nell'unità abitativa appropriata e somministrare analgesici postoperatori nei giorni #1 per garantire una continua profilassi contro il dolore.</li>
	<li>Monitorare gli animali 2 volte al giorno per valutare i segni di malnutrizione, irritazione corneale o infezione del sito chirurgico, e mantenere i registri chirurgici appropriati.<ol>
<li>Amministrare 0.9% sterile salina in modo sottocutaneo se c'è una significativa perdita di peso.</li>
		<li>Applicare l'unguento oculare lubrificante ogni giorno fino a quando il riflesso del battito di ciglia dell'animale è ristabilito.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Il modello di lesione del nervo facciale del ratto è emerso come il sistema più versatile per la valutazione di fattori neurotrofici grazie alla sua accessibilità chirurgica, al modello di ramificazione e al significato fisiologico27,29,33,34,35,36. La combinazione di dimostrazione video e applicazione di dati sugli animali t...

Lesione del nervo cranico nella regione della testa e del collo possono essere secondarie a eziologia congenita, infettiva, idiopatica, iatrogena, traumatica, neurologica, oncologica o sistemica1. Nervo cranico VII, o il nervo facciale, è comunemente influenzato. L'incidenza della disfunzione del nervo facciale può essere significativa, in quanto colpisce 20 a 30 per 100.000 persone ogni anno2. I principali rami motori del nervo facciale sono i rami temporali, zigomatici, buccali, marginali e cervicali; a seconda del ramo coinvolto, le conseguenze possono includere incompetenza orale o sbavamento, secchezza corneale, ostruzione del campo visivo secondario alla ptosi, disartria, o asimmetria facciale2,3. La morbilità a lungo termine comprende il fenomeno della sicinesi, o movimento involontario di un gruppo muscolare facciale, con tentata contrazione volontaria di un gruppo muscolare facciale distinto. La sicinesi oculare-orale è la più comune della rigenerazione aberrante come sequela di lesioni facciali e provoca compromissione funzionale, imbarazzo, diminuzione dell'autostima e scarsa qualità della vita3. La lesione ai singoli rami determina le funzioni che vengono compromesse in modo selettivo.
Il trattamento clinico della lesione del nervo facciale non è ben standardizzato e ha bisogno di ulteriori ricerche per migliorare i risultati. Gli steroidi possono alleviare il gonfiore nervoso facciale acuto, mentre Botox è utile per temporizzare i movimenti sinanici; ma, le principali opzioni ricostruttive nell'armamentario del terapeuta comportano l'intervento chirurgico attraverso la riparazione del nervo, la sostituzione o la rianimazione3,4,5,6.6 A seconda del tipo di lesione del nervo facciale sostenuta, il chirurgo nervoso facciale può utilizzare una serie di opzioni. Per la transezione semplice, la reanastomosi nervosa è utile mentre la riparazione dell'innesto via cavo è più adatta per un difetto del nervo; per un ripristino della funzione, il chirurgo può scegliere procedure di rianimazione facciale statiche o dinamiche. In molti casi di lesioni nervose facciali e successiva riparazione, anche nelle mani di esperti chirurghi nervosi facciali, il miglior risultato si traduce ancora in asimmetria facciale persistente e compromesso funzionale7.
Questi risultati non ottimali hanno stimolato un'ampia ricerca sulla rigenerazione dei nervi facciali. Ampi argomenti di interesse includono il perfezionamento e l'innovazione delle tecniche di riparazione dei nervi, la determinazione dell'effetto di vari fattori di rigenerazione dei nervi e la valutazione del potenziale di specifici inibitori neurali per aiutare a combattere l'esito a lungo termine della sinocinesi8,9,10,11. Mentre i modelli in vitro possono essere utilizzati per valutare alcune caratteristiche dei fattori pro-crescita o inibitori, la vera ricerca traslazionale su questo argomento è meglio realizzata tramite modelli animali traducibili.
La decisione di quale modello animale utilizzare può essere difficile, in quanto i ricercatori hanno utilizzato sia animali di grandi dimensioni, come pecore e piccoli modelli animali, cometopi 12,13. Mentre i modelli animali di grandi dimensioni offrono una visualizzazione anatomica ideale, il loro uso richiede attrezzature e personale specializzati non facilmente o facilmente disponibili. Inoltre, potenziare uno studio per dimostrare l'effetto potrebbe essere altamente proibitivo e potenzialmente non nell'ambito fattibile di molti centri scientifici. Così, il modello animale di piccole dimensioni è più frequentemente utilizzato. Il modello di topo può essere utilizzato per valutare una serie di risultati relativi alla chirurgia del nervo facciale; tuttavia, la lunghezza limitata del nervo può limitare la capacità dello scienziato di modellare determinati modelli, come lesioni a grande spazio14.
Così, il prototipo di ratto murine è emerso come il modello di cavallo di battaglia attraverso il quale lo scienziato può eseguire procedure chirurgiche innovative o utilizzare fattori inibitori o pro-crescita e valutare l'effetto su una vasta gamma di parametri di risultato. L'anatomia del nervo facciale del ratto è prevedibile e facilmente avvicinata in modo riproducibile. La sua scala più grande, rispetto al modello del mouse, consente la modellazione di una vasta gamma di difetti chirurgici, che vanno da semplice transection a 5 mm lacune15,16. Questo permette ulteriormente l'applicazione di interventi complessi nel sito difettoso, tra cui il posizionamento topico del fattore, iniezioni intraneurali di fattore, e il posizionamento di isoini o ponti17,18,19,20,21,22,23.
La natura docile del ratto, la sua anatomia affidabile e la sua propensione per una rigenerazione efficace del nervo consentono la raccolta di molte misure esiti in risposta ai suddetti schemi chirurgici di lesioni24. Attraverso il modello di ratto, lo scienziato nervoso facciale è in grado di valutare le risposte elettrofisiologiche a lesioni, esiti istologici nervosi e muscolari tramite immunostochimica, esiti funzionali attraverso il monitoraggio del movimento del pad vibrissale e la valutazione della chiusura degli occhi, e micro- cambiamenti macro-scopici attraverso microorescente o microscopia confocale, tra gli altri11, 22,29,,23,23,25,26,28.28 Così, il seguente protocollo illustrerà un approccio chirurgico al nervo facciale del ratto e agli schemi di lesione che possono essere indotti.

<table><tbody><tr><td>1,8% isoflurano</td><td>VetOne</td><td>13985-030-40</td><td></td></tr><tr><td>11-0 microsuture di nylon</td><td>AROSuture</td><td>TK-117038</td><td></td></tr><tr><td>4-0 sutura monocril</td><td>VWR</td><td>75982-084</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina SR</td><td>ZooPharm</td><td>MIF 900-006</td><td></td></tr><tr><td>Carprofene</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MFCD00079028</td><td></td></tr><tr><td>Clorexidina</td><td>VWR</td><td></td><td></td>IC19135805</tr><tr><td>Pinze per gioiellieri</td><td>VWR</td><td>21909-458</td><td></td></tr><tr><td>Micro divaricatore Weitlaner</td><td>VWR</td><td>82030-146</td><td></td></tr><tr><td>Microforbici</td><td>VWR</td><td>100492-348</td><td></td></tr><tr><td>Mini forbici per tenotomia</td><td>VWR</td><td>89023-522</td><td></td></tr><tr><td>Lama per bisturi numero 15</td><td>VWR</td><td>102097-834</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio operatorio</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gel per gli occhi al petrolato</td><td>Pharmaderm</td><td>B002LUWBEK</td><td></td></tr><tr><td>Acqua sterile</td><td>VWR</td><td>89125-834</td><td></td></tr><tr><td>Adesivo per tessuti</td><td>Vetbond, 3M</td><td>NC9259532</td><td></td></tr><tr><td>Cuscinetto conduttore d'acqua</td><td>Aqua Relief System</td><td>ARS2000B</td><td></td></tr><tr><td>Bupivacaina</td><td></td><td></td><td>Utilizzare come analgesico locale</td></tr></tbody></table>

chirurgia del nervo facciale nel modello di ratto per studiare l'inibizione assonale e la rigenerazione

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

Questo protocollo descrive metodi coerenti e riproducibili per studiare la rigenerazione assonale e l'inibizione in un modello di lesione del nervo facciale del ratto. Il nervo facciale può essere manipolato lungo tutta la sua lunghezza, dal suo segmento intracranico al suo corso extratemporale. Ci sono tre tipi principali di lesioni nervose utilizzati per lo studio sperimentale delle proprietà rigenerative: schiacciamento del nervo, transezione e divario nervoso. La gamma di possibili interventi è vasta, compresa la manipolazione chirurgica del nervo, la consegna di reagenti neuroattivi o cellule, e manipolazioni centrali o dell'organo finale. I vantaggi di questo modello per lo studio della rigenerazione dei nervi includono semplicità, riproducibilità, coerenza interspecie, tassi di sopravvivenza affidabili del ratto e un aumento delle dimensioni anatomiche rispetto ai modelli murini. I suoi limiti riguardano una manipolazione genetica più limitata rispetto al modello murino e la capacità rigenerativa superlativa del ratto, in modo che lo scienziato del nervo facciale debba valutare attentamente i punti di tempo per il recupero e se tradurre i risultati in animali e studi umani superiori. Il modello di ratto per la lesione del nervo facciale consente parametri funzionali, elettrofisiologici e itomorfometrici per l'interpretazione e il confronto della rigenerazione del nervo. Vanta quindi un enorme potenziale per promuovere la comprensione e il trattamento delle conseguenze devastanti delle lesioni nervose facciali nei pazienti umani.

Dopo la procedura chirurgica iniziale, ci sono due tipi principali di misure di esito: misurazioni seriali nell'animale vivo e misurazioni che richiedono il sacrificio dell'animale. Esempi di misurazioni seriali includono saggi elettrofisiologici, come una misura potenziale di azione muscolare composta30, valutazioni del movimento del muscolo facciale tramite laser-assistito o videografia significa9, o anche ripetitivo imaging dal vivo di ri...

Questo protocollo descrive un approccio riproducibile alla chirurgia del nervo facciale nel modello del ratto, comprese le descrizioni di vari modelli inducibili di lesioni.

Chirurgia del nervo facciale nel modello di ratto per studiare l'inibizione assonale e la rigenerazione

This protocol describes consistent and reproducible methods to study axonal regeneration and inhibition in a rat facial nerve injury model. The facial ...

Questo protocollo può aiutare gli scienziati a studiare i risultati dopo la lesione del nervo facciale e i metodi per migliorare la rigenerazione in molti parametri diversi. Il vantaggio principale di questa tecnica è che l'anatomia del ratto consente un facile accesso al nervo facciale e la sua larga scala ci consente di studiare tutti i modelli di lesioni pertinenti. Le applicazioni di questa tecnica si estendono verso la riabilitazione dei pazienti dopo la lesione del nervo facciale.Come potenziale rigenerativo il ratto fornisce un modello sperimentale riproducibile e conciso. E questo metodo può fornire informazioni sulle terapie chirurgiche e mediche per la paresi o la paralisi del nervo facciale. Ed è traducibile ad altri modelli di testa e collo o ad altri nervi periferici.Operare al microscopio usando entrambe le mani può essere impegnativo. Consiglio di esercitarmi usando la versione binoculare al microscopio prima di tentare una dissezione del nervo facciale. Dopo aver confermato una mancanza di risposta al dito del dito, applicare un unguento agli occhi del topo e radere l'area chirurgica.Stabilire un metodo per l'identificazione del ratto e posizionare un rotolo di garza sotto il collo. Disinfettare la pelle esposta con tre clorexidina alternata e scrub al 70% di etanolo e posizionare il topo al microscopio stereo. Manipolare l'orecchio ipsilaterale in direzione anteriore-posteriore per determinare la piegatura naturale della pelle postauricolare.Utilizzare una lama numero 15 per fare un'incisione da due a tre millimetri nella piega postauricolare. La pianificazione e il posizionamento dell'incisione sono i passaggi più critici per garantire un'identificazione affidabile del nervo facciale riducendo al minimo le dimensioni della ferita. Sezionare senza mezzi termini attraverso l'immediata fascia sottocutanea e posizionare un retrattore micro-Weitlaner per migliorare l'esposizione dei tessuti.Identificare il muscolo digastrico anteriore mentre viaggia in una direzione inferiore a superiore verso il suo inserimento lungo la base del cranio. Stendere delicatamente attraverso la pancia muscolare lungo il punto di inserimento muscolare per rivelare il tendine della pancia digastrica anteriore. Il tendine apparirà come un processo bianco filmoso che emana dal muscolo con un solido inserimento sulla base del cranio.Dopo l'identificazione del muscolo digastrico anteriore e del tendine, regolare il riavvolgitore Weitlaner per ritrarre ulteriormente la pancia muscolare. La regione esposta è lo spazio tridimensionale in cui si trova il tronco principale del nervo facciale. Sezionare lungo il nervo in una direzione inferiore distally dall'uscita del forame stilomastoide.Per indurre un modello di lesione da schiacciamento, utilizzare le forcep del gioielliere a superficie liscia per afferrare e comprimere saldamente il nervo applicando una pressione costante e riproducibile per 30 secondi per garantire un'adeguata lesione da schiacciamento. Per una semplice trasezione, afferrare l'epineurium immediato sovrascrivere il nervo con forcep a denti fini e utilizzare microscissori affilati per traslizionare cleanmente il nervo nel punto desiderato con un singolo taglio. Per un modello di gap nervoso, utilizzare pinze regolabili per impostare la lunghezza dello spazio nervoso desiderata per garantire modelli di lesioni simili tra gli animali e trasenare il nervo come appena dimostrato.Dopo che la lesione sperimentale è stata consegnata, irrigare la ferita con soluzione salina sterile e asciugare il tessuto con garza sterile. prima di chiudere l'incisione cutanea secondo le linee guida istituzionali. Qui, viene mostrata l'imaging dal vivo del tronco principale del nervo facciale con una lesione da schiacciamento di circa due o tre millimetri distale al punto di ramo del primo PES in un ratto Transgenico 1-GFP adulto.La valutazione del ritorno graduale della fluorescenza a una, due, tre e quattro settimane dopo la lesione può essere utilizzata come marcatore per monitorare la rigenerazione nervosa in questi animali transgenici. L'analisi istomorfometrica può essere usata per ottenere immagini della sezione trasversale della divisione mandibolare marginale permettendo la quantificazione del diametro assonale, della quantità di detriti, della fibra nervosa, della percentuale di nervo e delle misurazioni della densità. È importante regolare frequentemente il posizionamento del riavvolgitore in base alle esigenze per garantire che i nervi anatomici pertinenti siano visibili quando si identifica il nervo facciale.Seguendo questa procedura i nervi e i muscoli rilevanti possono essere raccolti per l'analisi immunoistochimica per valutare il grado di rigenerazione rispetto ad altri gruppi sperimentali. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha spianato la strada ai ricercatori nello studio dei risultati funzionali dopo la lesione del nervo facciale. Nello specifico, come effettuare il fenomeno della sintasi.

facial-nerve-surgery-rat-model-to-study-axonal-inhibition

Research

Ricerca

JoVE Journal

Neuroscience

Neuroscienze

Questo video mostra un protocollo chirurgico su un modello di ratto, descrivendo in dettaglio i passaggi dalla preparazione dell'anestesia all'induzione della lesione del nervo facciale. Questo protocollo è utile per studiare la rigenerazione nervosa e le tecniche chirurgiche nella ricerca medica.

Induzione di una lesione del nervo facciale in un modello di ratto

Questo video dimostra l'induzione del dolore neuropatico orofacciale in un modello di ratto mediante legatura del nervo infraorbitale. Ciò si traduce in danni ai nervi e infiammazione, causando una segnalazione anomala del dolore e imitando le condizioni di dolore cronico, che possono essere utilizzate per studiare il test del dolore orofacciale.

Induzione di dolore neuropatico orofacciale in un modello di ratto tramite legature nervose infraorbitali

Fonte: Deseure, K., et al. Lesione da costrizione cronica del nervo infraorbitale del ratto (IoN-CCI) per studiare il dolore neuropatico del trigemino. J. Vis. Exp. (2015). Questo video mostra un metodo per indurre dolore neuropatico in un modello di ratto restringendo il nervo infraorbitale. Dopo aver esposto il nervo infraorbitale e aver legato le legature per restringerlo, la risposta immunitaria nel sito della lesione aumenta l'eccitabilità dei neuroni vicini, che trasmettono segnali di...

Induzione del dolore neuropatico in un modello di ratto mediante costrizione del nervo infraorbitale

Fonte: Olmstead, D. N., et al.,  Assotomia del nervo facciale nei topi: un modello per studiare la risposta dei motoneuroni alle lesioni. J. Vis. Exp. (2015). Questo video mostra la procedura di schiacciamento del nervo facciale in un topo, in cui la dissezione smussata attraverso punti di riferimento chiave espone il tronco del nervo facciale al forame stilomastoideo. Le pinze vengono quindi utilizzate per comprimere il tronco nervoso, inducendo danni assonali e interrompendo la trasmissione...

Esecuzione dell'assotomia Crush sul nervo facciale in un modello murino

Fonte: Cheah, M., et al. Iniezione del ganglio della radice dorsale e lesione da schiacciamento della radice dorsale come modello per la rigenerazione sensoriale degli assoni. J. Vis. Exp. (2017). Questo video mostra una procedura passo-passo per iniettare una sospensione virale nei gangli della radice dorsale (DRG) e indurre una lesione assonale controllata attraverso uno schiacciamento della radice dorsale in un ratto anestetizzato. Il protocollo prevede l'esposizione dei DRG, la...

Modellazione della rigenerazione sensoriale degli assoni in un ratto utilizzando l'iniezione del ganglio della radice dorsale e la lesione da schiacciamento della radice dorsale

Cellule ensheathing olfattive (OECs) sono cellule della cresta neurale che permettono la crescita dei neuroni olfattivi primari. Questa proprietà specifica può essere utilizzato per il trapianto cellulare. Presentiamo qui un modello di trapianto cellulare basata sull'uso di OECs in un modello di lesione del nervo laringeo.

Il trapianto di cellule olfattive ensheathing per valutare il recupero funzionale dopo Peripheral Nerve Injury

Presentiamo un protocollo chirurgico che descrive in dettaglio come eseguire un'assotomia di taglio o schiacciamento sul nervo facciale nel topo. L'assotomia del nervo facciale può essere impiegata per studiare la risposta fisiologica alla lesione nervosa e testare le tecniche terapeutiche.

Facial assotomia Nerve in topi: un modello per studiare motoneuroni risposta al danno

Questo protocollo presenta l'uso di un'iniezione di ganglio della radice dorsale (DRG) con un vettore virale e una concomitante lesione da schiacciamento della radice dorsale in un ratto adulto come modello per studiare la rigenerazione sensoriale degli assoni. Questo modello è adatto per studiare l'uso della terapia genica per promuovere la rigenerazione sensoriale degli assoni.

Radice dorsale Ganglion iniezione e dorsale radice Lesioni Crush come un modello per sensoriale Axon Regeneration

Qui, presentiamo un protocollo che combina l'elettroporazione e la denervazione in vivo del muscolo elevatore cranico auris longus (LAL). Questa procedura consente lo studio del potenziale ruolo delle proteine di derivazione muscolare nella rigenerazione della sinapsi neuromuscolare.

Elettroporazione combinata in vivo e reinnervazione a breve termine del muscolo scheletrico elevatore cranico Auris Longus

Questo protocollo mostra come etichetta retrogrado cellule gangliari della retina, e come fare successivamente un lesione da schiacciamento del nervo ottico al fine di analizzare la sopravvivenza delle cellule gangliari della retina e l'apoptosi. Si tratta di un modello di malattia sperimentale per diversi tipi di neuropatia ottica, compreso il glaucoma.

Una lesione del nervo ottico Modello Crush murini per studiare la sopravvivenza delle cellule gangliari della retina

Scopri la chirurgia del nervo facciale nel modello di ratto per studiare l'inibizione assonale e la rigenerazione. Questo metodo consente di valutare terapie per la paralisi facciale e analizzare i processi di recupero neuronale.

Chirurgia del nervo facciale nel modello di ratto per studiare l'inibizione assonale e la rigenerazione

Esplora altri video