Name: Misurazione dei livelli di stress biofisico e psicologico dopo la visita in tre località con diversi livelli di natura (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-19T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 33 s
Description: Scopri come misurare lo stress biofisico e psicologico dopo la visita a tre località con diversi livelli di natura. Questo metodo combina campioni salivari e questionari per valutare gli effetti degli ambienti naturali sulla salute.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Questo studio è stato finanziato in parte dal Faculty Research Grant Program (FRGP) sponsorizzato attraverso la School of Public Health presso l'Università dell'Università, Bloomington, IN. Gli autori desiderano ringraziare la Dott.ssa Alison Voight e Melissa Page per l'assistenza editoriale e i commenti costruttivi.

Questo studio segue le politiche e le linee guida del Programma di Protezione della Ricerca Umana dell'Indiana University Institutional Review Board.
1. Selezione della posizione
<ol><li>Selezionare il numero di siti (n) in base ai diversi livelli di natura. NOTA: Abbiamo scelto tre siti per il nostro lavoro. Utilizzando un continuum basato su livelli di "naturalità", il sito A è stato considerato il più naturale ed è composto da circa 1.200 acri di creste boscose confinanti con un lago e situato all'interno di una foresta decidua. Le attività più comuni includono passeggiate e osservazione della fauna selvatica. Il sito B era un parco municipale di 33 acri con sentieri, luoghi di ritrovo, parchi giochi e spazi aperti per attività ricreative causali. Il sito C era una struttura urbana di esercizio interno con il più basso livello di naturalezza. Tutti e tre i siti si trovano in una posizione relativamente vicina a una città di medie dimensioni (popolazione stimata di 46.000 persone) nel Midwest degli Stati Uniti.</li>
</ol>2. Screening e preparazione dei partecipanti
<ol><li>Completare il reclutamento dei partecipanti prima che i soggetti si impegnino in esperienze ricreative. NOTA: Per i siti A e B, i soggetti sono stati avvicinati dal ricercatore nel parcheggio dell'ingresso del parco. Per il sito C, i soggetti sono stati avvicinati alla reception della struttura di esercizi al coperto. Per controllare le differenze di tipo di attività, i soggetti reclutati per entrambi i siti A e B erano prevalentemente escursionistici, mentre per il Sito C l'attività principale era correre o camminare sulla pista interna.</li>
	<li>Durante il reclutamento, ricordare ai soggetti di rispettare le linee guida relative alla raccolta di campioni di cortisolo salivare. Non devono mangiare o bere 10 min prima di fornire campioni di saliva. NOTA: Va notato che in questo caso, i campioni di saliva non sono stati normalizzati per volume o diluizione (concentrazione) - cioè se i partecipanti erano adeguatamente idratati e/o hanno cambiato idratazione tra le collezioni campione.</li>
	<li>Dare bracciali rossi (o abbigliamento equivalentemente evidente) a ogni partecipante per consentire una facile identificazione quando emergono alla fine dei loro impegni.</li>
	<li>Assegnare un 30-40 min tempo di assegnazione in modo che tutti i soggetti attraverso i tre siti trascorrere una quantità simile di tempo in ogni sito. Escludere i soggetti che trascorrono sostanzialmente più o meno tempo rispetto al resto del campione.</li>
	<li>Mantenere coerente il tipo di attività impegnata. NOTA: In questo caso, l'attività "media" era a piedi o a piedi. Sono stati esclusi dal campione i soggetti che si sono impegnati in attività sostanzialmente diverse da camminare o fare escursioni. Ad esempio, i soggetti che pescavano, facevano picnic o sollevavano pesi non erano inclusi nei rispettivi campioni.</li>
</ol>3. Condizioni e progettazione sperimentale
<ol><li>Utilizzare una progettazione pre-sperimentale pre-test/post-test.</li>
	<li>Dopo aver identificato le materie e aver accettato di partecipare, chiedi a ciascun soggetto di leggere e firmare un modulo IRB che spieghi la natura volontaria, lo scopo e le procedure dello studio.</li>
	<li>A seguito di questo processo, dare ai soggetti un indumento (ad esempio, bracciale rosso) per l'identificazione futura e ottenere misure fisiologiche e psicologiche dei livelli di stress (ad esempio, PSQ, 1-2 mL di saliva che viene sputata o sbavata in una provetta). Raccogliere campioni dal tardo pomeriggio alla sera presto. NOTA: Questi dati sono stati raccolti dai ricercatori sia 1) appena prima che i soggetti entrassero nel sito e 2) immediatamente dopo aver terminato la visita al sito.</li>
</ol>4. Campioni di saliva
<ol><li>Per evitare la diluizione del campione, chiedere ai soggetti di non mangiare, bere o sciacquare le bocche 10 min prima di fornire campioni di saliva.</li>
	<li>Chiedere ai soggetti di fornire campioni di saliva da 1-2 mL (esclusa la schiuma) appena prima dell'esperienza ricreativa e subito dopo la conclusione dell'esperienza.</li>
	<li>Raccogliere campioni di saliva utilizzando un metodo di sbavatura passiva:<ol>
<li>Fornire ai soggetti un 2 in plastica bevuta per sbavare in un crioviale da 2 mL (vedi Tabella dei materiali).</li>
		<li>Istruire i soggetti a consentire alla saliva di poolarsi in bocca, poi sbavare giù la paglia e nel crioviale. Secondo la Saliva Collection and Handling Advice (2011), 1 mL (esclusa la schiuma) è adeguato per la maggior parte dei test.</li>
		<li>Campioni di etichette con un numero ID a 3 cifre assegnato (ad esempio, 001) e una lettera per indicare la tempistica della raccolta dei dati (cioè, A rappresenta il pre-test, B rappresenta il post-test; dove 001A rappresenta il campione di saliva fornito dal partecipante 001 prima di esperienza ricreativa).</li>
		<li>Dopo che il campione viene raccolto ed etichettato, dovrebbe quindi essere conservato temporaneamente congelato in una scatola di schiuma steroide piena di ghiaccio secco per non più di 2 h.</li>
		<li>Trasportare i campioni contrassegnati in un laboratorio e conservarli a -80 gradi centigradi fino all'analisi.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. Quantificazione di z-amilasi
NOTA: In questo saggio, gli idrolizi di z-amilasi 2-cloro-p-nitrophenyl-z-D-maltotrioside a 2-cloro-nitrophenol e forma glucosio, 2-cloro-p-nitrophenyl-z-D-maltoside, maltotriose e glucosio. La reazione è monitorata con un assorbimento di 405 nm, che corrisponde all'attività di z-amylase nel campione. Questo test dimostra la linearità tra 0 e 2000 U/L.
<ol><li>
Materiali
	<ol>
<li>Usato un reagente liquido di amilasi (vedi Tabella dei materiali) per quantificare la z-amilasi nei campioni di saliva. Tutti i reagenti sono forniti come liquidi pronti all'uso e conservati a 0-4 gradi centigradi.</li>
		<li>Utilizzare un lettore multimodale (vedere Tabella deimateriali) in grado di leggere una densità ottica a 405 nm con una temperatura controllata a 37 gradi centigradi durante l'essenza.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
analisi
	<ol>
<li>Scongelare i campioni sul ghiaccio prima dell'analisi.</li>
		<li>Diluire i campioni 1:10 con 1x PBS (10 - L di saliva - 90 -L di PBS).</li>
		<li>Analizzare ogni campione in duplicato.</li>
		<li>L'amilasi reagente a 20-25 gradi centigradi per almeno 30 min.</li>
		<li>Aggiungere 0,1 mL di reagente di amilasi a una micropiastra ben 96 per ogni campione.</li>
		<li>Pre-incubare la micropiastra a 37 gradi centigradi per un minimo di 5 min.</li>
		<li>Aggiungere 2,5 l del campione al reagente di amilasi.</li>
		<li>Prendere una lettura iniziale dopo 60 s.</li>
		<li>Continua le letture ogni 60 s per un ulteriore 2 min.</li>
		<li>Calcolare la differenza di assorbimento medio al minuto (Abs/min).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
calcolo
	<ol>
<li>Per calcolare l'attività dell'amilasi, utilizzare la seguente formula: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59272/59272eq1.jpg"> Dove abs/min è la differenza di assorbimento al minuto; TV - volume totale del saggio (0,1025 mL); 1000 USD conversione di U/mL in U/L; L'absorptivity millimolare di 2-cloro-p-nitrophenol 12,9; SV - volume del campione (0,0025 mL); e LP - percorso della luce (1 cm). La sungazione dà: <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/59272/59272eq2.jpg"> Pertanto, moltiplicare il valore abs/min per 3178x il fattore di diluizione (10) per ottenere l'amilasi in U/L.</li>
		<li>Per i campioni superiori al 2000 U/L (linearità di analisi) diluire ulteriormente (almeno 2x utilizzando PBS) e ri-analisi, quindi moltiplicare il risultato di z-amilasi per il fattore di diluizione supplementare.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. Quantificazione del cortisolo
NOTA: In questo test, il cortisolo libero viene quantificato nella saliva utilizzando una curva standard di cortisolo. Gli standard e i campioni diluiti vengono aggiunti a una piastra microtitera pre-rivestita con un anticorpo. Un coniugato cortisolo-perossidase viene aggiunto ai pozzi, seguito dall'aggiunta di un anticorpo monoclonale al cortisolo. La quantità di cortisolo/perossidasi coniugato rientra man mano che aumenta la concentrazione di cortisolo nel campione.
<ol><li>
Materiali
	<ol>
<li>Utilizzare un kit di Immunoassay enzimatico del cortisolo (vedi Tabella deimateriali) per quantificare il cortisolo nei campioni di saliva. Tutti i reagenti necessari per eseguire questo test sono inclusi nel kit. Tutti i componenti del kit sono immagazzinati a 0-4 gradi centigradi prima di raggiungere la data di scadenza.</li>
		<li>Utilizzare uno spettrofotometro in grado di leggere una densità ottica (OD) a 450 nm (vedere Tabella dei materiali), nonché un software in grado di utilizzare le registrazioni OD dal lettore di piastre per eseguire il raccordo a curva logistica a quattro parametri (4 PLC).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparazione del reagente
	<ol>
<li>Lasciare che tutti i reagenti eclichino a 20-25 gradi centigradi per un minimo di 30 min.</li>
		<li>Diluire il buffer di analisi del cortisolo 1:5 usando l'acqua deionizzata.</li>
		<li>Diluire il buffer di lavaggio 1:20 utilizzando acqua deionizzata. NOTA: I tamponi di analisi e lavaggio sono stabili per 3 mesi se conservati a 0-4 gradi centigradi.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparazione del campione
	<ol>
<li>Scongelare i campioni sul ghiaccio prima dell'analisi.</li>
		<li>Diluire i campioni 1:10 con cuscinetto di assaggio di cortisolo (20 - L di saliva - 180 l di tampone) e utilizzare entro 2 h dalla preparazione.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Preparazione delle norme
	<ol>
<li>Etichettare le provette di vetro #1-#7.</li>
		<li>Pipet 225 l di cuscinetto di assay in tubo #1 e 125 - L di buffer in tubi #2-#7.</li>
		<li>Aggiungere 25 -L della soluzione di brodo di cortisolo al tubo #1 e vortice.</li>
		<li>Togliere 125 l di tampone dal tubo #1 e aggiungerlo al tubo #2, quindi vortice.</li>
		<li>Ripetere le diluizioni seriali per i tubi #3 #7. NOTA: le concentrazioni finali di cortisolo di ogni norma sono indicate nella Tabella 1.</li>
		<li>Le norme devono essere utilizzate entro 2 h dalla preparazione.</li>
	</ol>
</li>
</ol><table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>scala di valori</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
			<td>#7</td>
		</tr>
<tr>
<td>Volume buffer di analisi (L)</td>
			<td>225 (di sistema)</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
		</tr>
<tr>
<td>oltre a qualcosa</td>
			<td>Stock Std</td>
			<td>#1</td>
			<td>#2</td>
			<td>#3</td>
			<td>#4</td>
			<td>#5</td>
			<td>#6</td>
		</tr>
<tr>
<td>Volume di addizione</td>
			<td>25 mi lato</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
			<td>125 del sistema</td>
		</tr>
<tr>
<td>Concentrazione finale (pg/mL)</td>
			<td>3200</td>
			<td>1600</td>
			<td>800</td>
			<td>400</td>
			<td>200 anni</td>
			<td>100 del sistema</td>
			<td>50 anni</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabella 1: tabella di preparazione della curva standard.
<ol start="5"><li>
analisi
	<ol>
<li>Utilizzare il layout della piastra riportato di seguito nella Figura 1 come guida per impostare la micropiastra.</li>
		<li>Si consiglia di utilizzare una pipetta multicanale per l'aggiunta di reagenti.</li>
		<li>Aggiungere 50 - L di campioni o standard nel numero appropriato di pozze nella piastra. I campioni e gli standard devono essere eseguiti in duplicato.</li>
		<li>Aggiungere il buffer di aste (75 ) nei pozzi di rilegatura non specifici (NSB).</li>
		<li>Aggiungete il buffer di prova (50 ) nei pozzi di rilegatura massima (B0) e i pozzi standard zero (vuoti).</li>
		<li>Aggiungete 25 l del cortisolo ajugate ad ogni pozzo.</li>
		<li>Aggiungere 25 l dell'anticorpo cortisolo ad ogni pozzo, ad eccezione dei pozzi NSB.</li>
		<li>Toccare delicatamente il lato della piastra per mescolare i reagenti.</li>
		<li>Coprire con il sigillante della piastra e agitare a temperatura ambiente (RT) a 20-25 gradi centigradi per 1 ora.</li>
		<li>Rimuovere il contenuto del pozzo e sciacquare ogni pozzo 4x con tampone di lavaggio (300 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Toccare la piastra per asciugare su asciugamani assorbenti tra i fuormi.</li>
		<li>Aggiungete il substrato TMB a ciascun pozzo (100 l).</li>
		<li>Incubare la piastra a 20-25 gradi centigradi per 30 min senza agitare.</li>
		<li>Aggiungete la soluzione di arresto in ogni pozzetto (50 o l).</li>
		<li>Leggere la densità ottica in ogni pozzo della micropiastra a 450 nm.</li>
		<li>Calcolare la media delle densità ottiche per ogni standard, quindi campionare e sottrarre la densità ottica media per i pozzi NSB.</li>
		<li>Calcolare la percentuale associata (B/B0) per tutti i campioni utilizzando i controlli di rilegatura massima (B0).</li>
		<li>Creare una curva standard utilizzando un software in grado di adattarsi a quattro parametri della curva di regressione logistica, calcolato dalla curva %B/B0.</li>
		<li>Moltiplicare il risultato per il fattore di diluizione (10) per ottenere i valori di cortisolo in pg/mL.</li>
		<li>I campioni con densità ottiche che salgono al di sopra dello standard più elevato dovrebbero essere ulteriormente diluiti con il tampone di analisi e ri-analisi, quindi il risultato dovrebbe essere moltiplicato per il fattore di diluizione aggiuntivo.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59272/59272fig1.jpg"> Figura 1 : Esempio di layout piastra. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59272/59272fig1large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
7. Misurazione psicologica (modulo di stress percepito)
<ol><li>Misurare i livelli psicologici dei soggetti utilizzando il PSQ pubblicato da Fliege et al.13, che comprende quattro fattori (preoccupazione, tensione, tensione, gioia) e utilizza 20 elementi.</li>
	<li>Chiedi all'interessato di compilare il PSQ poco prima della loro esperienza ricreativa e subito dopo la conclusione dell'esperienza.</li>
	<li>Contrassegnare i questionari con un numero ID a 3 cifre identico al livello di stress biofisiologico di ciascun soggetto.</li>
</ol>

<ol><li>Hansmann, R., Hug, S., Seeland, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+and+stress+relief+through+physical+activities+in+forests+and+parks%5BTitle%5D)+AND+%22Urban+Forestry+and+Urban+Greening%22%5BJournal%5D)">Restoration and stress relief through physical activities in forests and parks.</a> Urban Forestry and Urban Greening. 6, 213-225 (2007).</li>
<li>Krantz, D. S., McCeney, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+psychological+and+social+factors+on+organic+disease%3A+A+critical+assessment+of+research+on+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of psychological and social factors on organic disease: A critical assessment of research on coronary heart disease.</a> Annual Review of Psychology. 53, 341-369 (2002).</li>
<li>Ward Thompson, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+green+space+is+linked+to+less+stress+in+deprived+communities%3A+Evidence+from+salivary+cortisol+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Landscape+and+Urban+Planning%22%5BJournal%5D)">More green space is linked to less stress in deprived communities: Evidence from salivary cortisol patterns.</a> Landscape and Urban Planning. 105, 221-229 (2012).</li>
<li>Haluza, D., Schonbauer, R., Cervinka, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Green+perspectives+for+public+health%3A+A+narrative+on+the+physiological+effects+of+experiencing+outdoor+nature%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Green perspectives for public health: A narrative on the physiological effects of experiencing outdoor nature.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 11, 5445-5461 (2014).</li>
<li>Korpela, K. M., Ylen, M., Tyrväinen, L., Silvennomen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determinants+of+restorative+experiences+in+everyday+favorite+places%5BTitle%5D)+AND+%22Health+and+Place%22%5BJournal%5D)">Determinants of restorative experiences in everyday favorite places.</a> Health and Place. 14, 636-652 (2008).</li>
<li>Mantler, A., Logan, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+environments+and+mental+health%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Natural environments and mental health.</a> Advances in Integrative Medicine. 2, 5-12 (2015).</li>
<li>Mayer, F. S., McPherson-Frantz, C., Bruehlman-Senecal, E., Dolliver, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+is+nature+beneficial%3F+the+role+of+connectedness+to+nature%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Why is nature beneficial? the role of connectedness to nature.</a> Environment and Behavior. 41, 307-643 (2009).</li>
<li>Pretty, J., Peacock, J., Sellens, M., Griffin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mental+and+physical+health+outcomes+of+green+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environal+Health+Research%22%5BJournal%5D)">The mental and physical health outcomes of green exercise.</a> International Journal of Environal Health Research. 15, 319-337 (2005).</li>
<li>Ulrich, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+recovery+during+exposure+to+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Stress recovery during exposure to natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 11, 201-230 (1991).</li>
<li>Kaplan, S., Talbot, J. F. Psychological Benefits of a Wilderness Experience. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKaplan%2C+S+%22Behavior+and+the+Natural+Environment%22">Behavior and the Natural Environment</a>. Altman, I., Wohlwill, J. F. , Springer. Boston, MA. 163-203 (1983).</li>
<li>Salmon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+physical+exercise+on+anxiety%2C+depression%2C+and+sensitivity+to+stress%3A+A+unifying+theory%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Psychology+Review%22%5BJournal%5D)">Effects of physical exercise on anxiety, depression, and sensitivity to stress: A unifying theory.</a> Clinical Psychology Review. 21, 33-61 (2001).</li>
<li>Focht, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brief+walks+in+outdoor+and+laboratory+environments%3A+Effects+on+affective+responses%2C+enjoyment%2C+and+intentions+to+walk+for+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Research+Quarterly+for+Exercise+and+Sport%22%5BJournal%5D)">Brief walks in outdoor and laboratory environments: Effects on affective responses, enjoyment, and intentions to walk for exercise.</a> Research Quarterly for Exercise and Sport. 80, 611-620 (2009).</li>
<li>Fliege, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Perceived+Stress+Questionnaire+%28PSQ%29+reconsidered%3A+Validation+and+reference+values+from+different+clinical+and+healthy+adult+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosomatic+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Perceived Stress Questionnaire (PSQ) reconsidered: Validation and reference values from different clinical and healthy adult samples.</a> Psychosomatic Medicine. 67, 78-88 (2005).</li>
<li>Kirschbaum, C., Hellhammer, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+cortisol+in+psychoneuronendocrine+research%3A+Recent+developments+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Salivary cortisol in psychoneuronendocrine research: Recent developments and applications.</a> Psychoneuroendocrinology. 19, 313-333 (1994).</li>
<li>Gallacher, D. V., Petersen, O. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulus-secretion+coupling+in+mammalian+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22International+Reviews+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Stimulus-secretion coupling in mammalian salivary glands.</a> International Reviews in Physiology. 28, 1-52 (1983).</li>
<li>Slosnik, R. T., Chatterton, R. T., Swisher, T., Par, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+attentional+inhibition+by+norepinephrine+and+cortisol+after+psychological+stress%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Psychophysiology%22%5BJournal%5D)">Modulation of attentional inhibition by norepinephrine and cortisol after psychological stress.</a> International Journal of Psychophysiology. 36, 59-68 (2000).</li>
<li>Nater, U. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-induced+changes+in+human+salivary+alpha-amylase+activity-associations+with+adrenergic+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Stress-induced changes in human salivary alpha-amylase activity-associations with adrenergic activity.</a> Psychoneuroendocrinology. 31 (1), 49-58 (2006).</li>
<li>Takai, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+psychological+stress+on+the+salivary+cortisol+and+amylase+levels+in+healthy+young+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Effect of psychological stress on the salivary cortisol and amylase levels in healthy young adults.</a> Archives of Oral Biology. 49 (12), 963-968 (2004).</li>
<li>Shirtcliff, E. A., Granger, D. A., Schwatz, E., Curran, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+salivary+biomarkers+in+biobehavioral+research%3A+Cotton+based+sample+collection+methods+can+interfere+with+salivary+immunoassay+results%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Use of salivary biomarkers in biobehavioral research: Cotton based sample collection methods can interfere with salivary immunoassay results.</a> Psychoneuroendocrinology. 26, 165-173 (2001).</li>
<li>Nater, U. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+salivary+alpha-amylase+reactivity+in+a+psychosocial+stress+paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Psychophysiology%22%5BJournal%5D)">Human salivary alpha-amylase reactivity in a psychosocial stress paradigm.</a> Journal of Psychophysiology. 55 (3), 333-342 (2005).</li>
<li>Granger, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+salivary+biomarkers+into+developmental+and+behaviorally-oriented+research%3A+Problems+and+solutions+for+collecting+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Integration of salivary biomarkers into developmental and behaviorally-oriented research: Problems and solutions for collecting specimens.</a> Physiology and Behavior. 92, 583-590 (2007).</li>
<li>Frumkin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+toxicity%3A+Human+health+and+the+natural+environment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Preventive+Medicine%22%5BJournal%5D)">Beyond toxicity: Human health and the natural environment.</a> American Journal of Preventive Medicine. 20, 234-240 (2001).</li>
<li>Hartig, T., Mitchell, R., de Vries, S., Frumkin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nature+and+health%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Nature and health.</a> Annual Review of Public Health. 35, 207-228 (2014).</li>
<li>Gidlow, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Where+to+put+your+best+foot+forward%3A+Psycho-physiological+responses+to+walking+in+natural+and+urban+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Psychology%22%5BJournal%5D)">Where to put your best foot forward: Psycho-physiological responses to walking in natural and urban environments.</a> Journal of Environmental Psychology. 45, 22-29 (2016).</li>
<li>Ewert, A., Chang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Levels+of+nature+and+stress+response%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Sciences%22%5BJournal%5D)">Levels of nature and stress response.</a> Behavioral Sciences. 8 (5), 49(2018).</li>
<li>Wyles, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+some+natural+environments+more+psychologically+beneficial+than+others%3F+The+importance+of+type+and+quality+on+connectedness+to+nature+and+psychological+restoration%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Are some natural environments more psychologically beneficial than others? The importance of type and quality on connectedness to nature and psychological restoration.</a> Environment and Behavior. 51 (2), 111-143 (2019).</li>
</ol>

Gli autori non dichiarano conflitti di interesse.

Lo scopo di questo studio è identificare potenziali cambiamenti nello stress utilizzando strumenti biofisici e psicologici dopo la visita ricreativa in tre diverse impostazioni con diversi livelli di natura. Sia il cortisolo che la z-amilasi hanno dimostrato di essere indicatori affidabili dei livelli di stress psicologico. La procedura di saggio amilasi descritta in questo studio è stata adattata a un formato di 96 pozzi. Quando i livelli di amilasi nella saliva sono alti, i cambiamenti di assorbimento si verificano rap...

Livelli elevati di stress sono stati a lungo collegati a molte gravi condizioni di salute come malattie cardiache, obesità, e disturbi psicologici1,2,3. Un crescente corpo di ricerca suggerisce che la stretta vicinanza o la visita ad ambienti naturali come parchi e paesaggi non sviluppati può avere un effetto notevole sul benessere psicologico e sulla diminuzione dei livelli di stress1,4, 5,6,7,8,9,10. Le spiegazioni per gli effetti degli ambienti naturali e dei livelli di stress hanno incluso quanto segue: (1) le impostazioni naturali forniscono sedi per l'attività fisica8,11 e (2) i visitatori di ambienti naturali hanno la capacità di concentrarsi su processi di pensiero più non-task, portando così ad una riduzione dell'affaticamento dell'attenzione12. Per determinare gli effetti della natura sulla riduzione dello stress, questo studio utilizza un auto-report di stress psicologico (PSQ) e due biomarcatori salivari, cortisolo e amilasi, dopo la visita a tre diversi siti ricreativi. Queste località variano tra i loro livelli di "naturalità" e includono un ambiente selvaggio, parco comunale, e struttura fitness e ricreativo locale.
Questo studio mira ad affrontare le seguenti domande di ricerca: (RQ1) Ci sono differenze nei livelli di stress biofisico misurati dal cortisolo salivare e dalla z-amilasi se confrontati in tutti e tre i siti (cioè naturale, semi-naturale, costruito)? (RQ2) Ci sono differenze nei livelli di stress psicologico misurati dal PSQ (manifestato da quattro costrutti: richieste, preoccupazioni, tensione e gioia) se confrontati in tutti e tre i siti (cioè naturale, semi-naturale, costruito)?

<table><tbody><tr><td>Kit per il dosaggio immunoenzimatico del cortisolo</td><td>DetectX</td><td>K003-H1</td><td>Il kit per il dosaggio immunoenzimatico del cortisolo è progettato per misurare quantitativamente il cortisolo presente negli estratti fecali essiccati, nella saliva, nelle urine, nel siero, nel plasma e nei campioni di terreni di coltura.</td></tr><tr><td>Etichette criogeniche per la conservazione criogenica</td><td>Fisherbrand</td><td>5-910-A L'adesivo</td><td>unico resiste alle temperature estreme</td></tr><tr><td>Set di reagenti per amilasi liquida (CNPG3) Pointe</td><td>Scientific</td><td>A7564</td><td>Per la determinazione cinetica quantitativa dell'attività della &alfa;-amilasi nel siero umano.</td></tr>Provette in <tr><td>polipropilene da 2 ml a fondo tondo con tappo filettato esterno</td><td>Greiner Bio-One</td><td>07-000-257</td><td>2,0 ml U-BTM Cryo.s lettore</td></tr><tr><td>di micropiastre multimodale Synergy</td> sterilizzato in polipropilene autoportante <td>BioTek</td><td></td><td>È un lettore di micropiastre ad assorbanza, fluorescenza e luminescenza a canale singolo che utilizza un design a doppia ottica per eseguire misurazioni di campioni in formato micropiastra.</td></tr></tbody></table>

misurazione dei livelli di stress biofisico e psicologico dopo la visita in tre località con diversi livelli di natura

Measuring Biophysical and Psychological Stress Levels Following Visitation to Three Locations with Differing Levels of Nature

La visita in ambienti naturali è stata legata alla riduzione psicologica dello stress. Anche se la maggior parte della ricerca legata allo stress si è basata su formati di auto-segnalazione, un numero crescente di studi ora incorporano ormoni e catalizzatori biologici legati allo stress, come il cortisolo e la z-amilasi, per misurare i livelli di stress. Presentato qui è un protocollo per esaminare gli effetti sui livelli di stress biofisico e psicologico dopo la visita in tre luoghi diversi con diversi livelli di natura. I livelli di stress psicologico biofisico e auto-riferito vengono misurati immediatamente entrando nei luoghi selezionati e appena prima che i visitatori lascino il sito. Utilizzando un metodo "drool", la misura biofisica consiste di 1-2 mL di campioni di saliva forniti da soggetti dello studio al momento dell'ingresso in una delle tre posizioni di studio. Come prescritto dalla letteratura esistente, la saliva viene raccolta entro un lasso di tempo di 45 minuti dopo la fine dell'impegno del visitatore nel luogo. Dopo la raccolta della saliva, i campioni vengono etichettati e trasportati in un laboratorio biologico. Il cortisolo è la variabile biofisica di interesse in questo studio e misurato utilizzando un processo ELISA con un lettore di lastre TECAN. Per misurare lo stress auto-riferito, il Questionario sullo stress percepito (PSQ), che riporta livelli di preoccupazione, tensione, gioia e richieste percepite. I dati vengono raccolti in tutti e tre i siti nel tardo pomeriggio fino a prima serata. Se confrontati in tutte e tre le impostazioni, i livelli di stress, misurati sia dai marcatori biologici che dagli auto-report, sono significativamente più bassi dopo la visita all'ambiente più naturale.

Esempio Descrizione Utilizzando una tecnica di campionamento delle quote, questo studio ha reclutato 35 visitatori da ciascuno dei tre siti. In totale, 105 soggetti sono stati reclutati in questo studio, tra cui 63 maschi e 42 femmine. Età medie dei visitatori reclutati da tre diversi siti sono stati 25,9 anni (sito A), 37,2 anni (sito B) e 28,8 anni (sito C). Sono state registrate anche le frequenze delle visite dei soggetti nei tre siti selezionati. Per il sito A e il sito C, la maggior parte degli ...

Lo scopo di questo documento è quello di identificare i cambiamenti nei livelli di stress dopo la visita in tre diverse impostazioni e di descrivere i metodi utilizzati per identificare i livelli di stress in base alle misure del cortisolo salivare, della z-amilasi e di un auto-report psicologico strumento musicale.

Misurazione dei livelli di stress biofisico e psicologico dopo la visita in tre località con diversi livelli di natura

Visitation to natural environments has been linked to psychological stress reduction. Although most stress-related research has relied on self-report ...

Qui presentiamo un protocollo, utilizzato per esaminare gli effetti sui livelli di stress biofisico e psicologico a seguito di una visita in tre luoghi con diversi livelli di natura. Siamo interessati a sapere se un sito con livelli più elevati di naturalezza sarà più efficace nell'aiutare i partecipanti a ridurre i loro livelli di stress. Oltre a utilizzare il questionario di auto-report, il vantaggio principale dell'utilizzo di questa tecnica è che l'analisi dei livelli di cortisolo e amilasi raccolti dai partecipanti campioni di saliva può darci una lettura più accurata e una migliore comprensione di come il nostro corpo risponde effettivamente dopo la visita ai siti ricreativi.A dimostrare la procedura sarà il Dr.Hocevar, professore dell'Università dell'Indiana. Inizia presentandoti all'argomento. Fornire loro un modulo di consenso per firmare spiegando la natura volontaria, lo scopo e le procedure dello studio.Dare al soggetto una fascia rossa per un'identificazione futura. Ottenere misure fisiologiche e psicologiche dei livelli di stress tramite campioni di saliva, appena prima dell'esperienza ricreativa e immediatamente dopo la conclusione dell'esperienza. Raccogliere un campione di saliva da uno a due millilitri utilizzando un metodo di sbavatore passivo.Istruisci i soggetti a consentire alla saliva di mettere in comune in bocca, quindi sbava lungo la cannuccia da due pollici e nella fiala crio fino a quando non è stato raccolto un millilitro. Esempi di etichette con un numero ID a tre cifre assegnato e una lettera per indicare la tempistica della raccolta dei dati. Quindi, congelare temporaneamente il campione in una scatola di schiuma steroidea piena di ghiaccio secco per non più di due ore.Trasportare i campioni contrassegnati in un laboratorio e conservare a meno 80 gradi Celsius fino a quando non vengono analizzati. Infine, utilizzare un reagente liquido di amilasi impostato per quantificare l'amilasi alfa nei campioni di saliva. Quindi, utilizzare un lettore multimobile in grado di leggere una densità ottica a 405 nanometri con la temperatura controllata a 37 gradi Celsius durante il saggio.In primo luogo, acquisire un kit amminoacido enzimatico cortisolo per quantificare il cortisolo nei campioni di saliva, uno spettrofotometro per leggere una densità ottica, o OD, a 450 nanometri e un software in grado di utilizzare registrazioni OD dal lettore di lastre per eseguire il montaggio della curva logistica a quattro parametri. Lasciare che tutti i reagenti equilibrano a 20-25 gradi Celsius per un minimo di 30 minuti. Diluire il tampone di dosaggio del cortisolo da uno a cinque utilizzando acqua deionizzata, quindi diluire il tampone di lavaggio da uno a 20 utilizzando acqua deionizzata.Quindi, scongelare i campioni sul ghiaccio prima dell'analisi. Quindi, diluire i campioni da uno a 10 con tampone di dosaggio di cortisolo e utilizzare entro due ore dalla preparazione. Per preparare gli standard, etichettare le provette in vetro da una a sette.Quindi, pipettare 225 microlitri di tampone di dosaggio nel tubo numero uno e 125 microlitri di tampone in tubi da due a sette. Successivamente, aggiungere 25 microlitri della soluzione di cortisolo al tubo numero uno e al vortice. Infine, rimuovere 125 microlitri di tampone dal tubo numero uno e aggiungerlo al tubo numero due, quindi di nuovo vortice.I risultati hanno indicato una diminuzione dei livelli significativi di cortisolo salivare dopo aver visitato il sito A, l'ambiente naturale. Non sono stati osservati cambiamenti significativi nei livelli di cortisolo nel sito B e C.Inoltre, i livelli di alfa amilasi sono aumentati dopo che i soggetti hanno visitato il sito C.Dopo la visita nelle tre località e l'utilizzo dei questionari di auto-segnalazione, sono state osservate diminuzioni significative dei fattori di domanda e preoccupazione. Non sono stati osservati cambiamenti significativi nella tensione del fattore per nessuna delle tre località e sono stati segnalati aumenti significativi nei siti A e nel sito B per la gioia del fattore.In genere, gran parte della ricerca sulla riduzione dello stress si è basata su questionari di auto-segnalazione. In questo studio, abbiamo raccolto i campioni di saliva dei partecipanti per analizzare come il nostro corpo risponde effettivamente dopo la visita a tre siti con diversi livelli di naturalezza. In questa visualizzazione, abbiamo presentato sia una tecniche di laboratorio che un esempio della raccolta di dati riempiti.Questa tecnica consente al ricercatore di catturare la reazione del nostro corpo a diversi ambienti. Conferma la nostra ipotesi che l'ambiente naturale possa avere effetti positivi sulla salute umana. Si suggerisce una ricerca futura per applicare misurazioni biofisiche del livello di stress in diversi ambienti naturali o diverse attività all'aperto con un vero design sperimentale.

measuring-biophysical-psychological-stress-levels-following

Research

Ricerca

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

In questo video si descrive un metodo per valutare la reazione psicofisiologica allo stress della persona utilizzando il biofeedback. Saremo anche presenti linee guida generali per la pianificazione del trattamento.

Lo stress di valutazione psicofisiologica Utilizzando Biofeedback

Questo articolo descrive un protocollo per indurre stress psicologico nei partecipanti, che consente ai ricercatori di misurare psicologico, le risposte fisiologiche e neuroendocrina allo stress all'interno di singoli partecipanti o tra i gruppi.

The Social Trier Protocollo di prova dello stress per indurre stress psicologico

Viene presentato un protocollo di studio su come valutare le associazioni tra l'ascolto della musica e lo stress psicobiologico (misurato dai livelli di stress soggettivo, dal cortisolo salivare e dall'alfa-amilasi salivare) nella vita quotidiana. Vengono forniti consigli sulla progettazione dello studio, sui materiali, sui metodi, sulla selezione dei partecipanti e sulla gestione statistica. I risultati rappresentativi sono presentati e discussi.

Valutare gli effetti della musica Ascolto sullo stress psicobiologico nella vita quotidiana

Qui presentiamo un protocollo che ha provocato la reattività della cortisolo in un campione messicano adolescente vulnerabile americano usando una versione modificata del Trier Social Stress Test (TSST). Campioni di saliva sono stati raccolti a basale, 15, 30 e 45 minuti post-TSST. La ricerca futura potrebbe utilizzare questo TSST modificato con giovani vulnerabili.

Un test di stress sociale modificato di Trier per adolescenti americani messicani vulnerabili

Lo stress è una componente inevitabile e persistente della vita e vengono presi in considerazione approcci olistici per la sua gestione. Una metodologia standardizzata è stata creata per dimostrare la fattibilità di un protocollo di gestione basati su respiro lo stress che può essere utilizzato con tecnologia portatile disponibile in commercio.

Un programma di gestione di Community-based Stress: Utilizzando dispositivi indossabili per valutare l'intero corpo risposte fisiologiche nelle impostazioni Non-laboratorio

Viene proposto un protocollo per valutare soluzioni basate su wearables polso di commercial-off-the-shelf (COTS) per stimare lo stress negli studenti. Il protocollo viene effettuato in due fasi, una prova di induzione di stress iniziale basata su laboratorio e una fase di monitoraggio che si svolgono in aula mentre l'allievo sta eseguendo attività accademiche.

Valutazione del polso Commercial-Off-The-Shelf indossabili per stimare lo Stress sugli studenti

Esperimenti di realtà virtuale (VR) possono essere difficili da implementare e richiede una pianificazione meticolosa. Questo protocollo descrive un metodo per la progettazione e la realizzazione di esperimenti VR che raccolgono dati fisiologici da partecipanti umani. Gli esperimenti in quadro di ambienti virtuali (EVE) è impiegato per accelerare questo processo.

Esperimenti di realtà virtuale con misure fisiologiche

Qui, presentiamo un metodo misto originale che unisce un quantitativo e un approccio qualitativo per esaminare accuratamente le esperienze dei partecipanti durante la prova di sforzo sociale di Treviri e la prova di sforzo sociale di Treviri per gruppi.

Approccio fenomenologico enattive per la prova di sforzo sociale di Treviri: un punto di vista metodi misti

Il presente protocollo introduce un'applicazione auto-sviluppata non commerciale per la raccolta di dati in tempo reale in loco, tra cui bilance psicologiche, posizione GPS, frequenza cardiaca e livello di saturazione di ossigeno nel sangue, nonché le procedure operative dell'applicazione. Uno studio empirico condotto a Taiwan nel 2020 è stato utilizzato come esempio di applicazione.

Un'applicazione per l'abbinamento con dispositivi indossabili per monitorare lo stato di salute personale

Qui presentiamo un protocollo per indagare gli effetti delle esposizioni immersive in realtà virtuale a 360 gradi sulla natura sull'umore e sull'incarnazione. I partecipanti sperimentano ambienti forestali e marini in posizioni sedute e in piedi, con valutazioni che utilizzano scale standardizzate per valutare gli esiti terapeutici degli interventi di salute mentale.

Terapia della Natura in VR: Incarnazione e Regolazione Emotiva attraverso Ambienti Virtuali Immersivi

Scopri come misurare lo stress biofisico e psicologico dopo la visita a tre località con diversi livelli di natura. Questo metodo combina campioni salivari e questionari per valutare gli effetti degli ambienti naturali sulla salute.

Misurazione dei livelli di stress biofisico e psicologico dopo la visita in tre località con diversi livelli di natura

Esplora altri video