Un metodo di laboratorio per misurare lo sbadiglio contagioso nei ratti

Il nostro protocollo è significativo perché fornisce un modo semplice per indagare quali sensi possono essere coinvolti nello sbadiglio contagioso nei ratti. L'utilizzo di una procedura non invasiva e la disponibilità del software applicativo, che accelera il calcolo per misurare lo sbadiglio contagioso, sono i principali vantaggi di questa tecnica. Gli individui che non hanno mai eseguito questa tecnica non dovrebbero affrontare grandi difficoltà nell'implementazione, a condizione che seguano metodicamente ogni fase e cerchino una consulenza professionale durante la costruzione del caso di osservazione.

La dimostrazione visiva di questo metodo aiuta a comprendere la disposizione spaziale delle gabbie di osservazione durante l'esperimento. Aiutare ad evitare errori nella designazione dei trattamenti. A dimostrare questa procedura sarà Evelyn Beristain-Castillo, un postdoc del mio laboratorio.

Per impostare una sessione di prova, trasferire quattro ratti nella sala di osservazione in gabbie individuali. Mentre gli animali si acclimatano, posiziona un tavolo a forma di T rovesciato su un tavolo rettangolare più grande sotto una lampada da soffitto che illumina sufficientemente la stanza. Posizionare la carta da filtro sul fondo di ogni gabbia di osservazione e posizionare le gabbie in coppia su ciascun lato del tavolo a forma di T rovesciato.

Posizionare un divisore tra ogni coppia di gabbie e posizionare strategicamente due videocamere digitali, in modo che ognuna registri il comportamento di sbadiglio di ogni coppia di ratti. Dopo aver confermato che le videocamere sono fissate in modo sicuro ai treodi e correttamente orientate alle gabbie di osservazione, collegare le videocamere a un computer desktop per monitorare contemporaneamente il comportamento dei ratti. Quando gli animali si sono acclimatati per 15 minuti, posizionarli nelle gabbie di osservazione in base all'allocazione precedentemente determinata e impostare la messa a fuoco automatica su ogni videocamera.

Avvia la registrazione video e un cronometro contemporaneamente, fermando la registrazione video alla fine del periodo di osservazione di 60 minuti. Quando l'osservazione è finita, riportare i ratti nelle loro gabbie di casa nella struttura animale con accesso al cibo e all'acqua. Quindi pulire accuratamente le gabbie di osservazione con un detergente non tossico prima di preparare l'installazione sperimentale per eseguire le sessioni di prova successive per la giornata.

Dopo l'ultima sessione, riprodurre ogni video sullo schermo di un computer utilizzando qualsiasi sistema di riproduzione standard per un osservatore. Fare in modo che l'osservatore visualizza prima ogni video per osservare e registrare il comportamento di sbadiglio sulle schede tecniche una volta alla velocità normale, seguito da una visualizzazione aggiuntiva a velocità più lente per facilitare l'osservazione e la misura dello sbadiglio. Per segnare lo sbadiglio, usate linee verticali per rappresentare l'occorrenza di uno sbadiglio con il minuto scritto come apice.

Quando tutti gli sbadigli sono stati segnati, trascrivi la sequenza temporale di sbadigli in ogni topo in un foglio di calcolo. Se lo sbadiglio è stato registrato al minuto più vicino, immettere il numero di sbadigli ad ogni minuto pertinente e utilizzare zero per riempire le celle quando non si è verificato alcun sbadiglio in un determinato minuto. Salvare quindi il foglio di lavoro come file di testo.

Se lo sbadiglio è stato registrato al decimale più vicino di un minuto, digitare la sequenza dall'alto verso il basso. Utilizzare NA per riempire gli spazi vuoti delle colonne del ratto in cui il numero di sbadigli nelle righe è inferiore a quello della colonna. Con il numero massimo di file di sbadigli registrati per un topo.

Salvare quindi il foglio di lavoro come file di testo. Una volta immessi tutti i dati, importare il file di testo in R.Salvare i codici di programma con il codice di estensione R e scaricare il codice di programma specifico a seconda che gli sbadigli siano stati registrati come numeri interi o frazionari. Quindi eseguire il programma per ogni coppia di ratti e il numero desiderato di tempi.

Alla fine dell'esecuzione, eseguire di nuovo il programma utilizzando una distribuzione casuale del numero di sbadigli di ogni topo. Per creare curve di contagio sbadiglianti, utilizzare i dati precedentemente salvati nel foglio di calcolo per sottrarre i tassi di non contagio dai tassi di contagio per ogni coppia di ratti, dalla finestra di tempo e dalla situazione di test, separando le analisi dei dati osservati e dei dati artificiali. In questo esperimento rappresentativo, il contagio dello sbadiglio tra ratti maschi sconosciuti è stato misurato in una serie di finestre di tempo che variavano da uno a 10 minuti.

Queste curve di contagio sbadigliato indicano che solo la comunicazione olfattiva tra ratti in gabbie con un divisore opaco perforato mostrava un contagio da sbadiglio. Il che è evidente dalla finestra temporale quattro e oltre, poiché l'intervallo di confidenza delle medie non si sovrappone all'intervallo di confidenza del numero di sbadigli allocato casualmente nel periodo di 60 minuti. La banda indicava, come previsto, che un'allocazione casuale del numero di sbadigli in ogni ratto nel periodo di osservazione, produceva tassi di sbadiglio che oscillavano approssimativamente a zero senza dimostrare alcun modello apparente.

In questo esperimento rappresentativo con ratti maschi familiari, nessuna delle quattro situazioni di prova ha stimolato il contagio da sbadiglio perché i loro intervalli di confidenza si sovrapponevano alla banda dell'intervallo di confidenza generata casualmente. Inoltre, non ci sono state differenze tra le quattro situazioni di test anche se l'aumento complessivo del contagio da sbadiglio nelle finestre di 10 volte diverso da una pendenza zero. Ricordati di tenere traccia delle identità familiari e sconosciute dei ratti per una corretta interpretazione dei risultati e di pulire le gabbie di osservazione tra gli esperimenti.

Una procedura farmacologica può essere utilizzata per bloccare la comunicazione uditivo e per separare completamente gli effetti uditivi sullo sbadiglio contagioso dagli effetti dagli altri sensi. Questa tecnica ha spianato la strada al confronto dello sbadiglio contagioso tra le specie sia in termini di sensi coinvolti, sia in termini di forza della risposta confrontando le curve contagiose dello sbadiglio. Ricorda di maneggiare attentamente le gabbie di osservazione perché possono rompersi accidentalmente e causare lesioni.