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DOI: 10.3791/59411-v
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L'obiettivo di questo protocollo è quello di dettagliare un approccio collaudato per la preparazione di campioni di nanoparticelle plasmoniche e per l'esecuzione di spettroscopia a singola particella su di essi con microscopia a contrasto di interferenza differenziale (DIC).
La microscopia DIC è superiore al campo scuro nelle nanoparticelle plasmoniche di imaging in ambienti complessi. Tuttavia, il DIC richiede anche maggiori conoscenze e abilità per ottenere risultati riproducibili. La microscopia DIC fornisce sia un'alta risoluzione laterale che una profondità di campo superficiale.
Entrambi questi tratti sono estremamente importanti quando si monitorano le nanoparticelle all'interno delle cellule o in ambienti complessi. Per iniziare, utilizzare una penna scribing per posizionare un gratta e vinci poco profondo e corto al centro di ogni coverlip di vetro, quindi pulire il vetro come descritto nel protocollo di testo di accompagnamento. Successivamente, utilizzare una micropipetta per rimuovere 100 microlitri di una soluzione di nanoparticelle d'oro da 05 milligrammi per millilitro dal suo contenitore di stoccaggio originale ed espellere la soluzione in un tubo di centrifuga da 1,5 millilitri.
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