Induzione del fallimento ventricolare destro da parte della costrizione dell'arteria polmonare e valutazione della funzione ventricolare destra nei topi

Questo metodo fornisce una tecnica utile per studiare i meccanismi del guasto ventricolare destro. I principali vantaggi di questa tecnica sono il risparmio di tempo e l'aumento del tasso di successo per la chirurgia. Questa tecnica può aiutarci a imitare l'ipertrofia cardiaca destra e il fallimento negli esseri umani con la costrizione dell'arteria polmonare per creare un sovraccarico di pressione polmonare.

Questo metodo può essere applicato alla tecnica di costrizione aortica trasversale e può fornire informazioni sulle complicanze post trapianto di cuore e sugli studi sulle malattie cardiache congenite. La procedura sarà dimostrata da Xiaoxia Huang, un tecnico del mio laboratorio. Prima di iniziare la procedura, passare un pezzo di sutura di seta intrecciata 6-0 attraverso un ago calibro 25 smontato da una siringa da un millilitro.

Utilizzare pini emostatici per piegare l'ago di 90 gradi. Quindi piegare un ago calibro 22 a 120 gradi. Dopo aver confermato la mancanza di risposta al dito del piede, posizionare un mouse anestetizzato in posizione supina su un tappetino riscaldante Di 37 gradi Celsius e fissare gli incisivi con una sutura.

Fissare gli arti con del nastro adesivo e utilizzare la crema depilatoria per rimuovere i capelli dal collo al processo xifoide. Disinfettare la pelle esposta con iodio sequenziale e salviette di etanolo al 75% e utilizzare pinze appuntite per estrarre leggermente la lingua. Eleva la mattiera con una spatola su misura per esporre la glottide e usa una sorgente di luce fredda per dirigere l'attento inserimento di una cannula trachea su misura attraverso la glottide.

Regolare i parametri del mini ventilatore e impostare la frequenza respiratoria su 150 respiri al minuto e un volume di marea di 300 microlitri. Quindi collegare il tubo e il ventilatore per confermare che la cannula è stata inserita correttamente prima di fissare la cannula con nastro adesivo. Per aprire il torace, fare un'incisione cutanea di circa 10 millimetri parallela alla seconda costola.

Usa forbici e pinzette al gomito per separare i muscoli pettorali maggiori e minori sopra il secondo spazio intercostale. Contare le costole dall'angolo sternale per identificare il secondo spazio intercostale e utilizzare le forbici per aprire questo spazio. Quindi separare senza mezzi termini il parenchima e il timo fino a quando il tronco polmonare non è visibile.

Per restringere l'arteria polmonare, utilizzare le pinzette del gomito per separare senza mezzi termini il tronco polmonare e l'aorta ascendente. Utilizzare l'ago di chiusura di 90 gradi per passare la sutura attraverso il tessuto connettivo tra il tronco polmonare e l'aorta ascendente. Posizionare l'ago imbottitura a 120 gradi sul tronco polmonare.

Utilizzare la sutura di seta intrecciata 6-0 per legare l'ago di imbottitura al tronco polmonare, rimuovendo l'ago di imbottitura immediatamente dopo il riempimento del cono polmonare. Tagliare entrambe le estremità delle suture e continuare ad osservare il riempimento del cono polmonare per valutare se è presente una costrizione. Quindi valuta di nuovo il riflesso del pedale dell'animale per garantire il successo della legatura e chiudi il petto e la pelle con una sutura di nylon 5-0.

Almeno tre giorni dopo l'intervento chirurgico, applicare il gel ad ultrasuoni sul petto dell'animale costrittivo dell'arteria polmonare. Posizionare una sonda da 30 megahertz sul petto in una posizione antiorario di 30 gradi rispetto alla linea parasternale sinistra, mentre si orienta la tacca nella direzione caudale. Regolare gli assi Y e X sotto la modalità B fino a quando la valvola mitrale, l'aorta e la camera ventricolare sinistra sono chiaramente visibili.

Ruotare la sonda da 30 a 40 gradi sul suo asse Y verso il petto. Regolare gli assi Y e X fino a quando il cono polmonare è chiaramente visibile e posizionare il cursore sulla punta dei volantini della valvola polmonare per misurare la velocità del flusso di picco. Selezionare il colore e pw e posizionare la linea tratteggiata dell'onda pulsata parallela alla direzione del flusso sanguigno.

Regolare il lato sinistro del pad in modo che sia più alto del lato destro, mantenendo la sonda orientata di 30 gradi verso l'orizzonte lungo la linea ascellare interna destra, con la tacca appuntita nella direzione caudale. Regolare gli assi X e Y fino a quando il ventricolo destro non è chiaramente visibile. Quindi fare clic due volte sulla modalità M per visualizzare la linea dell'indicatore.

Otto settimane dopo l'intervento, intubare il topo come dimostrato e fare un'incisione bilaterale di 1,5 centimetri sotto il processo xifoide attraverso il diaframma per aprire la cavità toracica. Tagliare le costole per esporre il cuore e utilizzare un ago calibro 23 per penetrare nella parete libera del ventricolo destro. Premere delicatamente il punto di puntura con un batuffolo di cotone per interrompere qualsiasi sanguinamento e utilizzare la punta del catetere per forare il ventricolo attraverso la ferita.

Quando la curva è stabile, regolare la punta del catetere verso il tratto di deflusso del ventricolo destro. Fare clic su seleziona e analizza per registrare la pressione sanguigna sistolica e la pressione diastolica del ventricolo destro, il tasso massimo di aumento, la costante esponenziale del tempo di rilassamento e la frequenza cardiaca per 10 minuti. Quindi trasferire il catetere dal cuore in un contenitore di soluzione salina.

Rispetto al gruppo di Sham, una maggiore velocità di picco, un maggiore gradiente di pressione e un maggiore spessore della parete ventricolare destra sono ottenuti dalla vista parasternale dell'asse lungo a otto settimane dall'intervento chirurgico nel gruppo di costrizione dell'arteria polmonare. Inoltre, la funzione sistolica del ventricolo destro è significativamente ridotta nel gruppo di costrizione dell'arteria polmonare, rispetto al gruppo Sham, otto settimane dopo l'intervento chirurgico. Il gruppo di costrizione arteria polmonare ha una pressione ventricolare destra più alta nel sistole e nel diastole, e l'indice di contrattilità è ridotto rispetto a quello del gruppo di Sham.

Il ventricolo destro Tau e il tasso massimo di aumento sono anche maggiori nel gruppo di Costrizione arteria polmonare di quello del gruppo di Sham. Dimostrando che la disfunzione ventricolare destra è indotta nei topi dopo otto settimane di fasciatura dell'arteria polmonare. Test emodinamici invasivi nel ventricolo destro, rivelano che la frequenza cardiaca rimane stabile prima e dopo il monitoraggio del catetere.

Rispetto al gruppo sham, le giuste dimensioni del ventricolo sono significativamente ingrandite e il peso del ventricolo destro è più alto. Inoltre, l'esame istologico mostra che la fibrosi cardiaca nell'area coperta da cardiomiociti è maggiore nel gruppo di costrizione dell'arteria polmonare che nel gruppo Sham. La parte per lo più importante della procedura è garantire che l'arteria polmonare sia separata correttamente e completamente.

Per evitare una separazione errata, il punto di separazione dovrebbe essere vicino al ramo dell'arteria polmonare, dove il tessuto connettivo tra le arterie sarà più sciolto. Con questo metodo, abbiamo fornito un approccio più conveniente ed efficiente per indurre l'ipertrofia ventricolare destra. Generalmente, la procedura chirurgica e gli approcci di valutazione sono molto sicuri.