Sintesi, funzionalizzazione e caratterizzazione di nanoparticelle di silicio poroso fusogena per la consegna del Oligonucleotide

Questo protocollo descrive la sintesi di un sistema di nanoparticelle in grado di silenziare i geni in vivo fornendo siRNA ad alta efficienza. Semplicemente scambiando il peptide bersaglio e il carico utile di siRNA, le nanoparticelle fusogene possono essere utilizzate come potenziale formulazione terapeutica per malattie che richiedono modulazione genica in vivo. Abbiamo precedentemente pubblicato risultati utilizzando la nanopiastrina fusogena contro le infezioni batteriche gram-positive silenziando un gene che codifica per l'infiammazione nei macrofagi per porre fine all'infiammazione cronica.

Prima di eseguire questa procedura, assemblare una cella di incisione di Teflon contenente un wafer di silicio in una soluzione di acido fluoridrico da tre a uno. Eseguire una corrente alternata di una forma d'onda quadrata con una bassa densità di corrente di 50 milliampere per centimetro squadrato per 0,6 secondi e un'alta densità di corrente di 400 milliampere per centimetro al quadrato per 0,36 secondi ripetuti per 500 cicli. Una volta terminata l'incisione, rimuovere la cella dal circuito e risciacquare con cura la soluzione di acido fluoridrico utilizzando una siringa.