Droplet Digital TRAP (ddTRAP): adattamento del protocollo di amplificazione di ripetizione telomere a droplet reazione a catena della polimerasi digitale

Il saggio ddTRAP fornisce la capacità di ottenere una misurazione sensibile, robusta e altamente quantitativa dell'attività enzimatica della telomeasi nelle cellule. La possibilità di eseguire fino a 96 campioni per corsa in modo medio-throughput ci offre un grande vantaggio. Possiamo eseguire i controlli e le repliche per una corretta analisi statistica sui dati raccolti.

Immediatamente prima della lysing cellulare, scongelare un'aliquota congelata di tampone di lysis NP-40. Una volta scongelato, posizionare il tampone di lysis sul ghiaccio. Aggiungere l'inibitore della proteasi PMSF al tampone di lysis NP-40 per raggiungere una concentrazione finale di 0,2 millimolare.