Name: Fabbricazione dello stadio del microscopio per losservazione verticale con funzione di controllo della temperatura (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 21 s
Description: Impara a costruire uno stadio per microscopio verticale con controllo termico per osservare la dinamica dei campioni biologici sotto l'influenza della gravità e delle variazioni di temperatura.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Gli autori non hanno riconoscimenti.

<ol><li>Drum, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+Microscope+Observations+of+Diatos%5BTitle%5D)+AND+%22Osterreichische+Botanische+Zeitschrift%22%5BJournal%5D)">Electron Microscope Observations of Diatos.</a> Osterreichische Botanische Zeitschrift. 116, 321(1969).</li>
<li>McBride, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparing+Random+Distributions+of+Datom+Values+on+Microscope+Slides%5BTitle%5D)+AND+%22Limnology+and+Oceangraphy%22%5BJournal%5D)">Preparing Random Distributions of Datom Values on Microscope Slides.</a> Limnology and Oceangraphy. 33, 1627-1629 (1988).</li>
<li>Liu, X. Y., Lu, Z., Sun, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orientation+Control+of+Biological+Cells+Under+Inverted+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE-ASME+Transactions+on+Mechatronics%22%5BJournal%5D)">Orientation Control of Biological Cells Under Inverted Microscopy.</a> IEEE-ASME Transactions on Mechatronics. 16, 918-924 (2011).</li>
<li>Kahle, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+a+Compact%2C+Easy-to-Use+Inverted+Fluorescence+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22American+Laboratory%22%5BJournal%5D)">Applications of a Compact, Easy-to-Use Inverted Fluorescence Microscope.</a> American Laboratory. 43, 11-14 (2011).</li>
<li>Prunet, N., Jack, T. P., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. , 114-120 (2016).</li>
<li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 10(2017).</li>
<li>Hedde, P. N., Malacrida, L., Ahrar, S., Siryaporn, A., Gratton, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((sideSPIM+-+selective+plane+illumination+based+on+a+conventional+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">sideSPIM - selective plane illumination based on a conventional inverted microscope.</a> Biomedical Optics Express. 8, 3918-3937 (2017).</li>
<li>Crowe, W. E., Wills, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+Method+for+Monitoring+Changes+in+Cell+Height+using+Fluorescent+Microbeads+and+an+Ussing-type+Chamber+for+the+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archiv-Europian+journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">A simple Method for Monitoring Changes in Cell Height using Fluorescent Microbeads and an Ussing-type Chamber for the Inverted Microscope.</a> Pflugers Archiv-Europian journal of Physiology. , 349-357 (1991).</li>
<li>Bavister, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Minichamber+Device+for+Maintaining+a+Constant+Carbon-Dioxide+in+Air+Atmosphere+during+Prolonged+Culture+of+Cells+on+the+Stage+of+an+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cellular+%26+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">A Minichamber Device for Maintaining a Constant Carbon-Dioxide in Air Atmosphere during Prolonged Culture of Cells on the Stage of an Inverted Microscope.</a> In Vitro Cellular & Developmental Biology. 24, 759-763 (1988).</li>
<li>Makler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+New+version+of+the+10-MU-M+Chamber+and+its+use+for+Semen+Analysis+with+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Andrology%22%5BJournal%5D)">A New version of the 10-MU-M Chamber and its use for Semen Analysis with Inverted Microscope.</a> Archives of Andrology. 13, 195-197 (1984).</li>
<li>Xu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flexible+microassembly+methods+for+micro%2Fnanofluidic+chips+with+an+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Microelectronic+Engineering%22%5BJournal%5D)">Flexible microassembly methods for micro/nanofluidic chips with an inverted microscope.</a> Microelectronic Engineering. 97, 1-7 (2012).</li>
<li>Datyner, N. B., Gintant, G. A., Cohen, I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Versatile+Temperature+Controlled+Tissue+Bath+for+Studies+of+Isolated+Cells+using+an+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archive-+Europian+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Versatile Temperature Controlled Tissue Bath for Studies of Isolated Cells using an Inverted Microscope.</a> Pflugers Archive- Europian Journal of Physiology. 403, 318-323 (1985).</li>
<li>Claudet, C., Bednar, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magneto-optical+tweezers+built+around+an+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Optics%22%5BJournal%5D)">Magneto-optical tweezers built around an inverted microscope.</a> Applied Optics. 44, 3454-3457 (2005).</li>
<li>Yamaoka, N., Suetomo, Y., Yoshihisa, T., Sonobe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motion+analysis+and+ultrastructural+study+of+a+colonial+diatom%2C+Bacillaria+paxillifer%5BTitle%5D)+AND+%22Microscopy%22%5BJournal%5D)">Motion analysis and ultrastructural study of a colonial diatom, Bacillaria paxillifer.</a> Microscopy. 65, 211-221 (2016).</li>
<li>Apoya-Horton, M. D., Yin, L., Underwood, G. J. C., Gretz, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Movement+modalities+and+responses+to+environmental+changes+of+the+mudflat+diatom+Cylindrotheca+closterium+%28Bacillariophyceae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Phycology%22%5BJournal%5D)">Movement modalities and responses to environmental changes of the mudflat diatom Cylindrotheca closterium (Bacillariophyceae).</a> Journal of Phycology. 42, 379-390 (2006).</li>
<li>Bannon, C. C., Campbell, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sinking+towards+destiny%3A+High+throughput+measurement+of+phytoplankton+sinking+rates+through+time-resolved+fluorescence+plate+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Sinking towards destiny: High throughput measurement of phytoplankton sinking rates through time-resolved fluorescence plate spectroscopy.</a> PLoS One. 12, 16(2017).</li>
<li>Clarkson, N., Davies, M. S., Dixey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+motility+and+low+frequency+electromagnetic+fields+-+A+new+technique+in+the+search+for+independent+replication+of+results%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectromagnetics%22%5BJournal%5D)">Diatom motility and low frequency electromagnetic fields - A new technique in the search for independent replication of results.</a> Bioelectromagnetics. 20, 94-100 (1999).</li>
<li>Iwasa, K., Shimizu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motility+of+Diatom%2C+Phaeodactylum-Tricornutum%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Motility of Diatom, Phaeodactylum-Tricornutum.</a> Experimental Cell Research. 74, (1972).</li>
<li>Edgar, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucilage+Secretions+of+Moving+Diatoms%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Mucilage Secretions of Moving Diatoms.</a> Protoplasma. 118, 44-48 (1983).</li>
<li>Edgar, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+Locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Computer-Assisted+Analysis+of+Cine+Film+British+Phycological+Journal%22%5BJournal%5D)">Diatom Locomotion.</a> Computer-Assisted Analysis of Cine Film British Phycological Journal. 14, 83-101 (1979).</li>
<li>Iversen, M. H., Ploug, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+effects+on+carbon-specific+respiration+rate+and+sinking+velocity+of+diatom+aggregates+-+potential+implications+for+deep+ocean+export+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Biogeosciences%22%5BJournal%5D)">Temperature effects on carbon-specific respiration rate and sinking velocity of diatom aggregates - potential implications for deep ocean export processes.</a> Biogeosciences. 10, 4073-4085 (2013).</li>
<li>Riebesell, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Sinking+and+Sedimentation-Rate+Measurements+in+a+Diatom+Winter+Spring+Bloom%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Ecology+Progress+Series%22%5BJournal%5D)">Comparison of Sinking and Sedimentation-Rate Measurements in a Diatom Winter Spring Bloom.</a> Marine Ecology Progress Series. 54, 109-119 (1989).</li>
<li>Drum, R. W., Hopkins, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+Locomotion+-+An+Explanation%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Diatom Locomotion - An Explanation.</a> Protoplasma. 62, (1966).</li>
</ol>

Gli autori non hanno conflitti da divulgare.

L'analisi della traiettoria delle cellule diatomea mobili è un approccio utile per valutare la motilità delle diatomee. Tuttavia, mentre un normale microscopio invertito osserva i campioni orizzontalmente, non è adatto per osservazioni dell'influenza della gravità o del movimento fluttuante nella direzione verticale. Sviluppato e descritto qui è uno stadio di microscopio verticale con controllo della temperatura e collegato a un microscopio invertito, che è stato ruotato di 90 gradi. Questa fase del microscopio con contr...

La microscopia ottica è una tecnica utilizzata per aumentare i dettagli osservabili attraverso l'ingrandimento di un campione con lenti e luce visibile. Nella microscopia ottica, la luce viene diretta su un campione, quindi la luce trasmessa, riflessa o fluorescente viene catturata dalle lenti di ingrandimento per l'osservazione. Sono disponibili vari tipi di microscopio che differiscono nella progettazione per ospitare diversi usi e metodi di osservazione. I diversi disegni includono un microscopio verticale, che è strutturato per illuminare un campione dal basso per l'osservazione dall'alto, e un microscopio invertito, che illumina il campione dall'alto per l'osservazione dal basso. I microscopi in posizione verticale sono il design più comune e ampiamente utilizzato. I microscopi invertiti sono spesso usati per osservare campioni che non possono consentire a una lente vicina in lontananza dall'alto, come le cellule coltivate aderenti al fondo di un contenitore. Molti gruppi di ricerca hanno riportato osservazioni in una vasta gamma di campi utilizzando microscopi invertiti1,2,3,4,5,6,7. Sono stati sviluppati anche molti dispositivi aggiuntivi che sfruttano le caratteristiche dei microscopi invertiti8,9,10,11,12,13 .
Attualmente, in tutti i progetti di microscopio convenzionali, lo stadio del microscopio è orizzontale ed è quindi inadatto per l'osservazione di campioni che producono movimento nel piano verticale, (a causa della gravità, della galleggiabilità, del movimento, ecc.). Per rendere possibili queste osservazioni, lo stadio del microscopio e il percorso della luce devono essere ruotati in verticale. Lo stadio verticale è necessario per montare verticalmente vetrini di vetro o contenitori campione come un piatto Petri sul palco. Per risolvere questo problema, è già stato ideato un microscopio invertito laterale inclinato di 90 gradi. Tuttavia, l'attaccamento di campioni con nastro adesivo o altri adesivi non produce la necessaria immobilità a lungo termine. Descritto qui è un dispositivo che può raggiungere la stabilità necessaria. Questo dispositivo consente l'osservazione nel tempo di movimento del campione nel piano verticale. Il montaggio di un riscaldatore in gomma in silicio ha anche permesso di osservare l'influenza della variazione di temperatura sul comportamento del campione. I dati di temperatura vengono trasferiti a un server Internet tramite Wi-Fi e le impostazioni di temperatura e il monitoraggio dei log possono essere controllati in remoto da un PC o uno smartphone. A nostra conoscenza, lo stadio collegato a un microscopio inclinato lateralmente inclinato di 90 gradi non è ancora stato riportato in studi precedenti.
Lo stadio del microscopio è composto da tre piastre di alluminio. La piastra di alluminio centrale è montata sulla piastra di alluminio inferiore che si attacca allo stage. La gomma in silicone contenente il sensore di temperatura è attaccata tra le piastre di alluminio medio e superiore. I elastici vengono utilizzati per apporre il campione. Gli artigli sono attaccati nei quattro punti sinistro e destro della piastra di alluminio superiore per fissare gli elastici. Il circuito di controllo del regolatore di temperatura riceve un segnale dal sensore di temperatura incorporato in gomma siliconica e modula la potenza elettrica con il metodo di modulazione della larghezza dell'impulso (PWM). La temperatura può essere gradualmente aumentata a 50 gradi centigradi in incrementi di 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Questo dispositivo è utile per le applicazioni in cui i movimenti del campione verticale possono essere dipendenti dalla temperatura.
La presente relazione fornisce esempi di effetti di temperatura sul fenomeno fluttuante delle diatomee. Come esempi di studi di osservazione delle diatomee, sono state riportate misurazioni della velocità di sedimentazione degli ammassi cellulari, delle analisi del movimento, degli studi di struttura ultrafine, ecc. , 18 mi lato , 19 del 12 , 20 anni , 21 Mieto , 22 Milia , 23.La gravità specifica delle diatomee che galleggiano nell'acqua con organismi fotosintetici è leggermente superiore a quella dell'acqua, quindi tendono ad affondare; tuttavia, si alzeranno se si verifica anche una leggera convezione. Per studiare questo fenomeno, un vetrino viene apposto verticalmente a uno stadio al microscopio e si osservano gli effetti dell'aumento della temperatura sul movimento verticale della diatoma.

<table><tbody><tr><td>Adattatore CA 12V2A</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>AD-D120P200</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>ADS1015 Substrato</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>adafruit ID PRODOTTO: 1083</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Piastra in alluminio (piastra laterale posteriore)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&volte; L 200?&volte; T 1,5 mm</td><td>Gifu, Giappone</td></tr><tr><td>Piastra in alluminio (piastra Fronte)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&volte; L 200?&volte; T 2mm</td><td>Gifu, Giappone</td></tr><tr><td>Piastra in Alminio (Piastra Inferiore Centrale)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&volte; L 200?&volte; T 4mm</td><td>Gifu, Giappone</td></tr><tr><td>Piastra in Alminio (Piastra Superiore Centrale)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>W 150mm&volte; L 200?&volte; T 5mm</td><td>Gifu, Giappone</td></tr><tr><td>Piedistallo in alluminio (piastra inferiore)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>D 100mm&volte; T 3 mm (30&Phi;)</td><td>Gifu, Giappone</td></tr><tr><td>Piedistallo in alluminio (piastra superiore)</td><td>Inoval Co., Ltd.</td><td>D 100mm&volte; T 3 mm (30&Phi;)</td><td>Gifu, Giappone</td></tr><tr><td>Soluzione nutritiva basale d'acqua dolce modificata in grassetto</td><td>Sigma-Aldrich Co. LLC</td><td>B5282-500ML</td><td>St. Louis, USA</td></tr><tr><td>Caso di controllo</td><td>Marutsu Elec Co., Ltd.</td><td>pff-13-3-9</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>CPU</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>ESP-WROOM-02D</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Microscopio invertito</td><td>Olympus Corporation</td><td>CKX 53</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Adesivo in resina epossidica indurente a bassa temperatura</td><td>ThreeBond Co., Ltd.</td><td>TB2086M</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr> Volume <tr><td>semifisso multigiro Verticale tipo 500 &Omega;</td>Fornitore verificato - <td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>3296W-1-501LF</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Modulo OLED</td><td>Akihabara Inc.</td><td>M096P4W</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Sughero pressato (per elettrodo di supporto)</td> <td>Tera Co., Ltd.</td><td>W 42mm&volte; L 30?</td><td>Ishikawa, Giappone</td></tr><tr><td>Sughero pressato (disco inferiore)</td><td>Tera Co., Ltd.</td><td>D 100mm&volte; T 0,5 mm (20&phi;)</td><td>Ishikawa, Giappone</td></tr><tr><td>Sughero pressato (disco superiore)</td><td>Tera Co., Ltd.</td><td>D 100mm&volte; T 2,5 mm (20&Phi;)</td><td>Ishikawa, Giappone</td></tr><tr><td>Encoder rotativo con interruttore a 2 colori LED</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>P-05772</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Riscaldatore in gomma siliconica</td><td>Three High Co., Ltd.</td><td>D 100mm&volte; T 2,5 mm (20&Phi;)</td><td>Kanagawa, Giappone</td></tr><tr><td>Substrato</td><td>Seeed Technology Co., Ltd.</td><td>mh5.0</td><td>Shenzhen, Cina</td></tr><tr><td>Sensore di temperatura</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>NXFT15XH103FA2B050</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Regolatore CC/CC a tre terminali 3,3 V</td><td>Marutsu Elec Co., Ltd.</td><td>BR301</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Braccio flessibile universale</td><td>Banggood Technology Co., Ltd.</td><td>YP-003-2</td><td>Hong Kong, Cina</td></tr><tr><td>Cavo USB USB-A - MicroUSB</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>CAVO USB A-MICROB</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr><tr><td>Video Canera</td><td>Sony Corporation</td><td>HDR-CX590</td><td>Tokyo, Giappone</td></tr></tbody></table>

fabbricazione dello stadio del microscopio per l'osservazione verticale con funzione di controllo della temperatura

Fabrication of Microscope Stage for Vertical Observation with Temperature Control Function

I campioni sono di solito collocati su uno stadio al microscopio orizzontale per l'osservazione microscopica. Tuttavia, per osservare l'influenza della gravità su un campione o sul comportamento a galla, è necessario rendere verticale lo stadio del microscopio. Per raggiungere questo obiettivo, è stato ideato un microscopio invertito laterale inclinato di 90 gradi. Per osservare i campioni con questo microscopio, i contenitori campione come piatti Petri o vetrini di vetro devono essere fissati allo stadio verticalmente. È stato sviluppato ed è descritto qui un dispositivo in grado di proteggere i contenitori campione in posizione in uno stadio di microscopio verticale. L'attacco di questo dispositivo allo stadio consente l'osservazione della dinamica del campione nel piano verticale. La capacità di regolare la temperatura utilizzando un riscaldatore in gomma siliconica permette anche l'osservazione di comportamenti campione dipendenti dalla temperatura. Inoltre, i dati sulla temperatura vengono trasferiti a un server Internet. Le impostazioni di temperatura e il monitoraggio dei log possono essere controllati in remoto da un PC o uno smartphone.

La figura 2 mostra la distribuzione della temperatura del riscaldatore di gomma. La temperatura superficiale del riscaldatore di gomma era uniforme ad ogni temperatura. La figura 3 mostra la reattività della temperatura misurata per impostare le variazioni di temperatura. La linea arancione indica la temperatura impostata e la linea blu indica il cambiamento della temperatura del campione. Il superamento del valore misurato per l...

Presentato qui è un protocollo che utilizza uno stadio di microscopio a temperatura controllata che consente di montare un contenitore campione su un microscopio verticale.

Fabbricazione dello stadio del microscopio per l'osservazione verticale con funzione di controllo della temperatura

Samples are usually placed onto a horizontal microscope stage for microscopic observation. However, to observe the influence of gravity on a sample or ...

Questo dispositivo può essere utilizzato per fissare un campione a uno stadio di microscopio verticale per consentire l'osservazione dell'influenza della gravità e lavorare sul campione di interesse. L'attacco di questo dispositivo allo stadio consente l'osservazione della dinamica del campione nel telaio verticale e consente l'osservazione di comportamenti del campione dipendenti dalla temperatura. Per fabbricare le piastre in alluminio, utilizzare una macchina di lavorazione laser per tagliare un foro di 101 millimetri al centro di una piastra di alluminio da 150 per 200 per due millimetri da utilizzare come piastra di prima linea.Fare artigli in otto punti intorno all'esterno della piastra per consentire l'apposizione di due elastici sulla lunghezza o sulla larghezza della piastra. Quindi tagliare un foro di 130 millimetri al centro di una piastra di alluminio da 150 per 200 per cinque millimetri da utilizzare come piastra medio-superiore e fare otto tacche per consentire il posizionamento di due elastici attraverso la lunghezza o la larghezza della piastra. Quindi tagliare un foro di 130 millimetri al centro di una piastra di alluminio da 150 per 200 per quattro millimetri da utilizzare come piastra medio-inferiore e tagliare un foro di 30 millimetri al centro di una piastra di alluminio da 1,5 millimetri al centro di una piastra di alluminio da 1,5 millimetri da utilizzare come piastra di base.Per fabbricare i piedistalli, tagliare un foro di 30 millimetri al centro di una piastra di alluminio di 100 millimetri di diametro, spessa tre millimetri, e fare una tacca larga 42 millimetri per una tacca profonda 30 millimetri su un lato della piastra. Quindi tagliare un foro di 30 millimetri al centro di una piastra di alluminio di 100 millimetri di diametro, spessa quattro millimetri, e praticare tre fori di tre millimetri a 25 millimetri dal centro della piastra e distanziati di 120 gradi l'uno dall'altro. Per la fabbricazione dei dischi di sughero pressati, utilizzare una macchina per il taglio del getto d'acqua per tagliare un foro di 20 millimetri al centro di un disco di sughero pressato di 100 millimetri di diametro, dello spessore di due millimetri, e fare un disco di sughero pressato largo 42 millimetri per 30 millimetri e largo quattro millimetri per tacca profonda cinque millimetri su ciascun lato del disco.Quindi tagliare un foro di 20 millimetri al centro di un disco di sughero pressato di 100 millimetri di diametro, spesso un millimetro, e fare un disco di sughero pressato largo 42 millimetri per 30 millimetri di profondità e uno largo quattro millimetri per tacca profonda 40 millimetri su ciascun lato del disco. Quindi tagliare una piastra di sughero pressata profonda 42 millimetri per una piastra di sughero pressata profonda 30 millimetri da un disco di 100 millimetri di diametro. Per fabbricare un riscaldatore in gomma siliconica, tagliare un foro di 20 millimetri al centro di un disco di gomma siliconica di 100 millimetri di diametro, spesso 2,5 millimetri con un filo nicromo incorporato.Quindi impilare le parti fabbricate come dimostrato, fissando i pezzi appropriati con viti o adesivo a richiesta. Utilizzare un cavo dedicato per incorporare il riscaldatore in gomma e il riscaldatore della custodia del controller per collegare lo stadio del microscopio al sistema e utilizzare il controller per equipaggiare un segnale Wi-Fi e controllare la corrente del riscaldatore in gomma. Dopo aver costruito il sistema, collegare il filo termistore al terminale del sensore sulla custodia del controller e ricevere il segnale di temperatura misurato dal termistore.Utilizzare la manopola sul controller per modificare la temperatura impostata. Quindi trasferire le informazioni sulla temperatura misurata, sulla temperatura impostata e sul tempo durante la misurazione dal controller al server tramite Internet. Per analizzare il campione, posizionare il campione sullo stadio del microscopio perpendicolarmente alla superficie del suolo e utilizzare i quattro artigli longitudinali per fissare il campione con due elastici.Utilizzare il controller per impostare la temperatura su 40 gradi Celsius e controllare la temperatura sul display. Quindi premere la manopola per avviare il controllo della temperatura. Il LED blu si accenderà, indicando l'inizio dell'alimentazione di calore.In queste cifre vengono mostrate le distribuzioni rappresentative della temperatura del riscaldatore di gomma. La temperatura superficiale del riscaldatore di gomma era uniforme ad ogni temperatura. Qui viene mostrato un esempio della reattività della temperatura misurata per impostare le variazioni di temperatura.La linea arancione indica la temperatura impostata e la linea blu mostra il cambiamento della temperatura del campione. Se l'apparecchiatura è assemblata correttamente, il superamento del valore misurato alla modifica dell'impostazione è in genere piccolo e il tracciamento è rapido. In questo esperimento, il moto verticale dipendente dalla temperatura delle diatomee è stato registrato con successo, permettendo di rilevare il luogo del moto verticale delle diatomee.Gli effetti della convezione termica sul fenomeno galleggiante verticale delle cellule diatomee potrebbero quindi essere visualizzati mediante osservazione diretta. Quando il sensore è scollegato dal campione o se il microcontrollore non funziona correttamente, verificare se la corrente al riscaldatore è stata tagliata fuori dal microcontrollore. Utilizzando questo metodo, si può osservare l'effetto delle variazioni di temperatura sul movimento verticale di un organismo nell'acqua.Poiché la struttura della parte dello stadio che si attacca al microscopio è complicata, gli studi futuri affronteranno la semplificazione di tale struttura. Per raffreddare i campioni a temperatura inferiore a quella ambiente è necessario un complicato dispositivo di raffreddamento che è anche in considerazione per i lavori futuri.

fabrication-microscope-stage-for-vertical-observation-with

Research

Ricerca

JoVE Journal

Engineering

Ingegneria

Dimostriamo la realizzazione di un basso costo stadio criogenico progettato per adattarsi microscopi a luce riflessa più. Questo laboratorio costruito fase criogenica consente efficiente e affidabile di imaging correlativa tra crio-crio-luce e microscopia elettronica.

Low-Cost Cryo-Stage Light fabbricazione microscopia per Luce correlate / Microscopia Elettronica

Vi presentiamo una riflessione compatto sistema olografico digitale (CDHM) per l'ispezione e la caratterizzazione di dispositivi MEMS. Lo dimostra una lente-less con un'onda d'ingresso divergente fornendo naturale ingrandimento geometrico. Entrambi gli studi statici e dinamici sono presentati.

Lens-meno compatta digitale olografico microscopio per MEMS di ispezione e caratterizzazione

Descriviamo il processo di fabbricazione e collaudo di termometri fotonici.

Fabbricazione e collaudo di termometri fotonici

Un'istruzione dettagliata è descritta su come costruire un altamente propenso spazzato tile (HIST) microscopio e suo utilizzo per l'imaging di singola molecola.

Una guida per costruire un altamente propenso spazzato Tile microscopio per l'esteso campo di vista singola molecola Imaging

In questo manoscritto, viene descritta l'implementazione di un microscopio stimolato Raman scattering (SRS), ottenuto dall'integrazione di un set-up sperimentale SRS con un microscopio a scansione laser. Il microscopio SRS si basa su due sorgenti laser femtosecondo (fs), un Ti-Sapphire (Ti:Sa) e un oscillatore parametrico ottico sincronizzato (OPO).

Implementazione di un microscopio non lineare basato sullo scattering Raman stimolato

In questo lavoro descriviamo una tecnica che viene utilizzata per creare nuovi cristalli (eterostrutture di Van der Waals) impilando materiali 2D ultrasottili stratificati con un controllo preciso sulla posizione e sull'orientamento relativo.

Fabbricazione di eterostrutture van der Waals con allineamento rotazionale preciso

L'obiettivo di questo protocollo è quello di utilizzare la temperatura per controllare le velocità di flusso dei fluidi attivi tridimensionali. Il vantaggio di questo metodo non solo consente di regolare le velocità di flusso in situ, ma consente anche il controllo dinamico, ad esempio l'ottimizzazione periodica delle velocità di flusso verso l'alto e verso il basso.

Controllo delle velocità di flusso dei fluidi attivi 3D basati su microtubuli utilizzando la temperatura

Riportiamo una camera ambientale flessibile per l'imaging time-lapse di cellule vive utilizzando la microscopia a diffusione Raman stimolata verticalmente con rilevamento del segnale trasmesso. Le goccioline lipidiche sono state visualizzate in cellule SKOV3 trattate con acido oleico per un massimo di 24 ore con un intervallo di tempo di 3 minuti.

Una camera flessibile per l'imaging di cellule vive time-lapse con microscopia a diffusione Raman stimolata

Questo protocollo descrive la costruzione di un etalon Fabry-Perot a basso costo, discreto, accoppiato a fibre e spaziato in aria con varie applicazioni, come nella spettroscopia di gas in traccia. La fabbricazione è possibile in qualsiasi struttura con apparecchiature di laboratorio ottico standard disponibili.

Fabbricazione di un Etalon Fabry-Pérot a basso costo, accoppiato in fibra e spaziato in aria

Questo documento descrive i protocolli per la costruzione e il funzionamento di una fase di raffreddamento per immobilizzare in massa C. elegans sulle loro piastre di coltivazione originali.

Assemblaggio e funzionamento di uno stadio di raffreddamento per immobilizzare C. elegans sulle loro piastre di coltura

Questo protocollo descrive in dettaglio come costruire un microscopio a fluorescenza a singolo obiettivo e il suo utilizzo per la visualizzazione di reti di citoscheletro.

Progettazione e costruzione di un microscopio a fluorescenza personalizzabile, monoobiettivo, a foglio luminoso per la visualizzazione di reti di citoscheletri

Impara a costruire uno stadio per microscopio verticale con controllo termico per osservare la dinamica dei campioni biologici sotto l'influenza della gravità e delle variazioni di temperatura.

Fabbricazione dello stadio del microscopio per l'osservazione verticale con funzione di controllo della temperatura

Esplora altri video