Generazione di una piattaforma di Melanoma Uvenoma Uvenoft umano del fegato in topi immunodeficienti

I modelli murini xenoma uvea-hettale del fegato umano ortotopico sono stati creati utilizzando tecniche di impianto ortotopico chirurgico con pezzi tumorali derivati dal paziente e tecniche di iniezione di aghi con linee cellulari di melanoma uveale umano coltivate.

La maggior parte dei modelli animali tumorali derivati dal paziente sono impiantati per via sottocutanea, impedendo la valutazione di importanti caratteristiche dei tumori e dell'efficacia del farmaco. L'alloggiamento dei tumori impiantati all'interno del fegato ha facilitato questa analisi senza il rischio di troppe deviazioni che si verificano all'interno del fegato. Prima di iniziare la procedura, spruzzare tutti i materiali e gli strumenti con alcol etilico al 70%.

Confermare la mancanza di risposta al pizzico nell'animale anestetizzato. Posizionare il mouse in posizione supina su un tappetino riscaldante e bagnare la pelliccia con ulteriore alcol etilico al 70%. Stendere la pelliccia per visualizzare la pelle sotto l'area sottocostale sinistra.

Rimuovere i capelli e applicare lo iodio per essere assorbito nella pelle. Posizionare un drappo chirurgico sterile con un foro di due centimetri sopra il mouse e utilizzare forcep ultra fini curvi per sollevare la pelle addominale. Fai un'incisione sottocostale sinistra trasversale di un centimetro nella pelle tendata e inserisci punte curve della forbice nell'incisione per separare il peritoneo dalla pelle.

Ritrai le forbici senza aprire le lame e individua il fegato sotto il peritoneo con il suo colore rossastro scuro. Usa le forbici curve per fare un'incisione trasversale di un centimetro nel peritoneo. Usando l'altra mano, inserire il bordo di un batuffolo di cotone sotto il lobo epatico sinistro e arrotolare il tampone verso il basso per spingere verso l'alto il fegato.

Sollevare il tampone per trasferire il fegato su un foglio di tessuto assorbente non tessuto. Tenendo una lama di bisturi sterile numero 11 parallela alla superficie, premere la lama orizzontalmente nel fegato per fare un'incisione profonda cinque millimetri per cinque millimetri nel parenchima mentre si preme dolcemente il sito di incisione con un batuffolo di cotone. Arrotolare il batuffolo di cotone verso l'alto per aprire il sito di incisione.

Usa le forcelle ultra fini curve per impiantare un cubo di un millimetro di tessuto tumorale in tasca. Ritrarre le forcep mentre si rotola il batuffolo di cotone nella direzione opposta mentre si preme verso il basso e rimuovere il tampone. Posizionare immediatamente un emostato assorbibile sul sito di incisione e confermare l'emostasi.

Quindi utilizzare forcep smussate per sbucciare il fegato dal foglio di tessuto e riportare il fegato alla cavità addominale. Quindi chiudere il peritoneo con una sutura assorbibile 5-0 e una doppia legatura, e chiudere la pelle con una sutura assorbibile 5-0 e una tripla legatura. Il tumore allo xenoinnesto si innestra nel fegato come un tumore solitario senza noduli figli.

L'iniezione ortotopica chirurgica nel fegato con microneedle può comportare un successo dell'innesto di un gruppo di cellule di melanoma uveale metastatico epatico umano coltivate all'interno del fegato. Utilizzando questo modello di tumore derivato dal paziente ortotopico epatico, l'efficacia dei farmaci iniettati direttamente nel fegato può essere testata con risultati attesi simili a quelli osservati nei pazienti clinici.