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DOI: 10.3791/59966-v
Kyla A. Britson1,2, Aaron D. Black2,3, Kathryn R. Wagner1,2,3,4, Thomas E. Lloyd1,2,4
1Graduate Program in Cellular and Molecular Medicine,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Neurology,Johns Hopkins University School of Medicine, 3Kennedy Krieger Institute, 4Department of Neuroscience,Johns Hopkins University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Le malattie umane complesse possono essere difficili da modellare nei sistemi di modelli di laboratorio tradizionali. Qui, descriviamo un approccio chirurgico per modellare la malattia muscolare umana attraverso il trapianto di biopsie muscolari scheletriche umane in topi immunodeficienti.
Questo protocollo è significativo perché può essere utilizzato per creare xenografti muscolari scheletrici umani, che possono essere utilizzati per modellare le malattie muscolari e per effettuare test terapeutici preclinici. Questo modello di xenoinnesto consente ai ricercatori di studiare il muscolo umano in vivo per comprendere meglio la biologia delle cellule muscolari umane e sviluppare nuovi modelli per malattie muscolari rare o acquisite. Dopo aver ottenuto una biopsia muscolare umana, posizionare il campione in una piastra di Petri di 100 x 15 millimetri contenente mezzo muscolare e utilizzare un microscopio stereo e forbici chirurgiche per rimuovere qualsiasi fascia o tessuto adiposo rimanente.
Sezionare la biopsia muscolare in pezzi di circa sette per tre per tre millimetri, facendo attenzione che le fibre siano disposte longitudinalmente all'interno del campione. Successivamente, trasferire la piastra di Petri contenente il muscolo sezionato sul ghiaccio e posizionare suture sintetiche non assorbibili in una piastra di Petri da 100 per 15 millimetri del 70% di etanolo. Dopo aver confermato una mancanza di risposta al dito del piedino in un topo NOD-Rag-gamma anestetizzato di otto-12 settimane, applicare un unguento agli occhi dell'animale immunodifeso e usare un trimmer per rimuovere i capelli sovrascritti dalla caviglia al ginocchio.
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