Studiare il rimodellamento inverso ventricolare sinistro mediante lo scioglimento aortico nei roditori

Lo sbandamento aortico è un utile modello sperimentale per lo studio del rimodellamento inverso miocardico nei roditori e per una nuove intuizioni rivelatori sui meccanismi della regressione cardiomiocitica e del recupero funzionale isolico. Questi metalli facilitano l'evoluzione della modellazione inversa critica in VIVO e la raccolta di campioni biologici per studi in vitro e molecolari in diversi momenti durante la progressione della malattia. Questa tecnica imita la progressione del rimodellamento del miocardio e del rimodellamento inverso e consente di esplorare i meccanismi di recupero miocardico incompleto.

Questo protocollo fornisce approfondimenti sui meccanismi e sul rimodellamento inverso miocardico completo e incompleto della linea in patologie correlate al sovraccarico di pressione cronico come la pretesa oculare o la stenosi aortica. Collegare il tubo orotracheale al ventilatore per avviare la ventilazione meccanica e regolare il ventilatore a una frequenza di 160 respiri al minuto e un volume di marea di 10 millilitri per chilogrammo. Prima di iniziare la procedura della banda, confermare la mancanza di risposta al riflesso del dolore in un topo C57 nero da sei a otto settimane, radersi e applicare la crema depilatoria dalla linea del collo al livello medio del torace del mouse e applicare unguento agli occhi dell'animale.

Posizionare una sonda rettale e l'ossimetro per monitorare la temperatura di ossigenazione del sangue e la frequenza cardiaca. Posizionare il mouse nel decubito laterale destro su un riscaldatore e rastremi gli arti al sistema di retrazione del fissatore magnetico per mantenere l'animale nella posizione corretta durante la procedura. Quindi, disinfettare il torace con soluzione consecutiva al 70% di alcol e povidone-iodio e aprire il muscolo e le costole della pelle per eseguire la fascia all'aorta.

Al termine della procedura applicare la soluzione di povidone-iodio sul sito di sutura cutanea e somministrare analgesia due volte al giorno per due o tre giorni, quindi iniettare lea intraperitoneale salina sterile per prevenire la disidratazione in caso di sanguinamento significativo durante l'intervento chirurgico e posizionare l'animale in un'incubatrice con monitoraggio fino al pieno recupero. Sette settimane dopo l'intervento chirurgico di fasciatura, sezionare delicatamente i tessuti, l'adesione e la fibrosi intorno all'aorta nella metà degli animali fasciati fino a quando la costrizione diventa visibile. Sezionare attentamente l'aorta e separare la sutura dal vaso, quindi utilizzare le forbici per tagliare la sutura.

Si noti che si tratta di un'occlusione prolungata dell'acqua indaco dell'ascia durante il legame o demoniaca può portare a edema polmonare, un'eccessiva attivazione di vie infiammatorie. Chiudere la parete toracica con una semplice o continua sutura in polipropilene interrotta o continua utilizzando il numero minimo di punti possibili e chiudere la pelle con una sutura in polipropilene di seta sei O in un modello di sutura continua, quindi eseguire la cura postoperatoria come dimostrato. Ogni due o tre settimane dopo l'intervento chirurgico rimuovere la pelliccia dalla linea del collo al livello medio del torace come dimostrato e posizionare l'animale su una pastiglia riscaldante in posizione supina Posizionare gli elettrodi ECG sulla pelle esposta e confermare la presenza di una buona traccia ECG e una frequenza cardiaca compresa tra 300 e 350 battiti al minuto.

Monitorare la temperatura e applicare il gel eco sulla regione toracica. Posizionare i topi in recumbency dorsale leggermente rivolti a destra e avviare l'ecocardiografo utilizzando le impostazioni appropriate. Quindi, posizionare una sonda ad ultrasuoni sul torace e valutare il gradiente di pressione attraverso l'aorta.

Registra immagini guidate bidimensionali dell'aorta che mostrano la presenza o l'assenza della costrizione aorta ascendente per visualizzare anatomicamente l'efficacia della bande e dello scioglimento. Per valutare l'ipertrofia, posizionare la sonda su un asse corto del ventricolo sinistro a livello muscolare papillare e premere il pulsante di tracciamento della modalità per visualizzare la parete anteriore del ventricolo sinistro, il diametro del ventricolo sinistro e la parete posteriore del ventricolo sinistro in diacetile e sistole. Quindi valutare la funzione sistolica e calcolare la frazione di espulsione e l'accorciamento frazionato secondo protocolli standard.

Per valutare la funzione diastolica, determinare il picco del Doppler post-onda della velocità del flusso mitralico precoce e fogliare usando una vista atipica a quattro camere appena sopra i foglioline mitraliche e registrare le velocità diastoliche precocemente diastolica e sistolica astrale mitralica laterale usando l'imaging doppler post tissue e la vista apicale a quattro camere. Il successo della costrizione aortica può essere verificato da un aumento della pressione ventricolare sinistra e sistolica. E da Doppler velocità di flusso aortico superiori a 2,5 metri al secondo.

Rispetto agli animali operati da Sham, l'ipertrofia del ventricolo sinistro indotta dalla flessione è dimostrata da un aumento della massa del ventricolo sinistro e da una funzione diastolica compromessa come evidenziato da pressioni di riempimento più elevate e pressione diastolica finale ventricolare sinistra. Istologicamente, sette settimane di bande aortiche inducono ipertrofia e fibrosi cardiomiociti significative. Nel mio sottoposto a scioglimento, poiché la rimozione riuscita della stenosi aortica può essere verificata dalle velocità echo Doppler.

Lo scioglimento complessivo favorisce una significativa diminuzione del carico post-carico e dell'ipertrofia del ventricolo sinistro valutata dalla massa LV. Inoltre, si osserva anche una normalizzazione della funzione diastolica. Quando lo si gioca con attenzione l'evitare prolungate collusioni etiche al fine di garantire che l'ossigenazione del sangue rimanga superiore al 90%Questo modello minimo ci consente di studiare il mio rimodellamento cardiaco e il rimodellamento inverso in diversi punti di tempo della progressione della malattia e persino di svegliare i percorsi più disregolati in ogni momento.

Questa procedura consente di valutare il potenziale terapeutico dei farmaci promettenti e di studiare l'impatto di diverse comorbilità nella rimolding e nel recupero inverso del miocardio.