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Un metodo ad alto throughput in Situ per la stima della ploidia nucleare epatica nei topi
Un metodo ad alto throughput in Situ per la stima della ploidia nucleare epatica nei topi
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JoVE Journal Medicine
A High-Throughput In Situ Method for Estimation of Hepatocyte Nuclear Ploidy in Mice

Un metodo ad alto throughput in Situ per la stima della ploidia nucleare epatica nei topi

Full Text
10,418 Views
08:44 min
April 19, 2020

DOI: 10.3791/60095-v

Fátima Manzano-Núñez1, Ruby Peters2, Deborah J. Burks1,3, Luke A. Noon1,3

1Centro de Investigación Príncipe Felipe (CIPF), 2Department of Physiology, Development and Neuroscience,University of Cambridge, 3Centro de Investigación Biomédica en Red de Diabetes y Enfermedades Metabólicas Asociadas (CIBERDEM)

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Vi presentiamo un metodo robusto, conveniente e flessibile per misurare i cambiamenti nel numero di epatociti e nella ploidia nucleare all'interno di campioni di tessuto fisso/crioconservato che non richiede citometria di flusso. Il nostro approccio fornisce una potente firma a livello campione di citologia epatica ideale per monitorare la progressione delle lesioni epatiche e della malattia.

Questo metodo consente all'utente di generare un profilo di contenuto di DNA nucleare epatocita da sezioni di tessuto 2D per lo studio dello sviluppo epatico, della rigenerazione e delle malattie croniche. Questo approccio automatizzato ad alta produttività può essere applicato a tutte le sezioni di tessuto epatico 2D, fornendo una lettura calibrata internamente della ploidia nucleare per tutti i semplici nuclei di epatociti circolari. I cambiamenti nella ploidia nucleare epatocita sono associati all'invecchiamento, alle malattie croniche del fegato e al cancro.

Questa tecnica fornisce un mezzo semplice per profilare la ploidia nucleare in campioni di fegato fissi o crioconservati. I metodi di profilazione della ploidia in situ hanno un notevole potenziale come strumenti di ricerca e clinici per tracciare la progressione della malattia epatica in quanto non richiedono la desegregazione dei tessuti o l'accesso a materiale fresco. Dopo aver raccolto il campione di tessuto epatico murino, incorporare il lobulo epatico in un criomold riempito medio di temperatura di taglio ottimale e posizionare immediatamente lo stampo sul ghiaccio secco per garantire un rapido congelamento.

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Medicina Numero 158 fegato poliploidia epatocite imaging ad alto contenuto epatologia fattore nucleare epatite 4 alfa (HNF4)Hepatocyte nuclear factor 4 alpha (HNF4

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