Uso combinato dei saggi di metastasi della vena della coda e dell'imaging in vivo in tempo reale per quantificare la colonizzazione metastatica del cancro al seno e il carico nei polmoni

Il nostro protocollo può essere utilizzato per testare rapidamente e facilmente il ruolo di qualsiasi gene candidato nella colonizzazione metastatica e nella crescita. Il protocollo consente anche il monitoraggio in tempo reale della metastasi, della formazione e della crescita, nonché la quantificazione del numero e delle dimensioni della metastasi negli stessi animali senza la necessità di resezione o colorazione istologica. Placca quattro celle T1 a 150.000 cellule per pozzo in una piastra da 12 po 'in un supporto di crescita completo.

Incubare a 37 gradi Celsius 5% di anidride carbonica durante la notte. Il giorno dopo, aspira i mezzi di crescita dalle cellule. Aggiungere 500 microlitri di supernatante virale luciferasi e 500 microlitri di proteina fluorescente supernatante virale per infettare simultaneamente le cellule con i supernatanti virali della luciferasi e della proteina fluorescente.