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Generazione di organoidi mammari mosaici per provepsinizzazione differenziale
Generazione di organoidi mammari mosaici per provepsinizzazione differenziale
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JoVE Journal Developmental Biology
Generation of Mosaic Mammary Organoids by Differential Trypsinization

Generazione di organoidi mammari mosaici per provepsinizzazione differenziale

Full Text
6,764 Views
09:40 min
March 11, 2020

DOI: 10.3791/60742-v

Stefany Rubio1, Oscar Cazares1, Hector Macias1, Lindsay Hinck1

1Department of Molecular, Cell and Developmental Biology,University of California, Santa Cruz

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

La ghiandola mammaria è una struttura bistrato, che comprende cellule epiteliali mitraeliliali ed interne interne. Presentato è un protocollo per preparare gli organoidi utilizzando la prova differenziale. Questo metodo efficiente consente ai ricercatori di manipolare separatamente questi due tipi di cellule per esplorare le domande riguardanti i loro ruoli nella forma e nella funzione della ghiandola mammaria.

Il nostro metodo è significativo perché consente ai ricercatori di isolare e manipolare diversi tipi di cellule per l'indagine dei loro contributi di lignaggio individuali alla forma e alla funzione dei tessuti. Questa tecnica è un metodo delicato ed efficiente per separare i tipi di cellule e, di conseguenza, l'integrità delle celle viene preservata per le impostazioni cultura 3D. Questa tecnica può anche essere applicata ad altri sistemi per isolare le cellule che non hanno biomarcatori ben caratterizzati.

Per raccogliere le ghiandole mammarie numero due, tre, quattro e cinque da un topo femmina di 10-14 settimane, prima fai un'incisione di un centimetro sulla linea mediana tra i due arti posteriori. Estendere il taglio fino al collo e fare piccoli tagli laterale dall'incisione della linea mediana verso gli arti. Quindi allungare la pelle insegnata prima di fissarla con un perno su ciascun lato dell'animale.

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