Cristallografia a raggi X per studiare la transizione di stato oligomerica della termotoga maritima M42 Aminopeptidasi TmPep1050

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13 maggio 2020

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Questo protocollo è stato sviluppato per studiare la transizione dimero-dodecamero di TmPep1050, un'amminopeptidasi M42, a livello strutturale. È una pipeline semplice che parte dalla purificazione delle proteine all'elaborazione dei dati a raggi X. La cristallogenesi, l'indicizzazione del set di dati e la sostituzione molecolare sono state enfatizzate attraverso un caso di studio, variante TmPep1050H60A H307A.

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Purificazione del dodecamer

Chapters in this video

0:04

Introduction

1:03

Activity Assay

2:19

Apoenzyme Preparation

3:32

Dimer Preparation

4:03

Microseeding

5:01

X-Ray Diffraction

5:48

Indexation

6:50

Molecular Replacement

8:04

Model Building

9:07

Results: Representative Thermotoga Maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 Oligomeric State Transition

10:50

Conclusion

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