Dissociazione cellulare dall'epitelio della lingua e dal mesenchima/tessuto connettivo dei topi embrionali di 12,5 e 8 settimane

L'alto rendimento e la qualità delle cellule provenienti da tessuti complessi sono essenziali per l'analisi sperimentale comunemente usata, come il sequenziamento dell'RNA a singola cellula e le colture primarie di cellule staminali. Questo protocollo genera cellule sane ad alta resa e qualità da diverse regioni e compartimenti tissutali della lingua dei mammiferi, tra cui epitelio della lingua e tessuto connettivo. Per separare l'epitelio dal mesenchima di una lingua del topo E 12.5, trasferire il topo femmina incinta eutanasiato nell'area chirurgica e bagnare l'addome del topo con il 70% di etanolo per evitare che la pelliccia entra nel sito operativo.

Apri l'addome usando forbici sezionanti per esporre le corna uterine che trasportano gli embrioni, sezionare le corna uterine e trasferirle in un 15 millilitri di soluzione di Tirolo fresco in un piatto di coltura di 100 millimetri. Al microscopio sezionato, utilizzare mini forbici e forcep fini per sezionare gli embrioni dalle corna uterine. Aprire la cavità orale con le forceps fini e sezionare la lingua dalla mattinità usando mini forbici.