26 ottobre 2021
Questo lavoro descrive un protocollo standard per i test sensoriali quantitativi meccanici e termici caldi per valutare il sistema somatosensoriale nei cani. Le soglie sensoriali vengono misurate utilizzando un anestesiometro elettronico di von Frey, un algometro a pressione e un termodo a contatto caldo.
Questo protocollo per la valutazione delle soglie sensoriali nei cani utilizzando test sensoriali quantitativi o QST aiuterà a standardizzare gli studi, consentendo preziosi confronti tra diversi studi. Questa tecnica fornisce un metodo non invasivo per misurare le soglie sensoriali nei cani. Il nostro protocollo aiuta a guidare i ricercatori sulle migliori pratiche per ottenere dati accurati e coerenti.
Questo protocollo può fornire informazioni sui meccanismi della sensazione di dolore nei cani, anche dopo interventi chirurgici e per le malattie associate a stati di dolore cronico. L'aspetto più importante di questa tecnica è essere consapevoli del comportamento canino. Per garantire test sicuri e accurati, tutti i soggetti coinvolti devono essere consapevoli del comportamento e dei livelli di ansia del cane.
Iniziare con l'organizzazione della configurazione dello strumento applicando delicatamente una punta rigida di Von Frey da 0,9 millimetri alla cella di carico, assicurandosi che la cella di carico sia avvitata saldamente nel manipolo. Quindi collegare il cavo dal manipolo al dispositivo di registrazione attraverso il canale M0. Quindi, accendi il dispositivo di registrazione e premi il pulsante max per registrare e visualizzare la forza massima raggiunta quando il cane risponde allo stimolo applicato.
Azzerare lo strumento premendo il pulsante CLR. Per raccogliere i dati e misurare le soglie, istruire il cane a sdraiarsi e quindi aiutare il cane a raggiungere la posizione di decubito laterale. Applicare una contenzione minima o moderata per mantenere il cane in posizione e relativamente fermo.
Fornire un supporto manuale delicato all'arto del cane da testare per mantenere l'arto sollevato dal pavimento e fornire un supporto stabile contro cui applicare la forza senza impedire al cane di ritirare l'arto. Una volta che il cane è calmo e rilassato, con l'arto testato al 70% di estensione, applicare lo stimolo una volta. Posizionare la punta di Von Frey perpendicolarmente alla pelle dell'area da testare.
Se il cane mostra movimenti riflessi dalla sensazione della punta di Von Frey sulla pelle, lasciare che il cane rilassi nuovamente l'arto prima di riapplicare la punta di Von Frey. Quando la pelle non provoca movimenti riflessi, effettuare una misurazione applicando la punta Von Frey. Applicare una forza costantemente crescente con la punta di Von Frey a 20 grammi al secondo fino a quando il cane ritira l'arto, vocalizza.
si gira a guardare lo stimolo, o mostra altri movimenti o risposte comportamentali che indicano la percezione cosciente dello stimolo. Rimuovere lo stimolo quando il cane ritira l'arto o viene raggiunta la forza massima e registrare la forza massima applicata che viene visualizzata sul dispositivo di registrazione. Ripetere le misurazioni per cinque prove, lasciando passare un minuto tra ogni misurazione con il cane in decubito laterale se rimangono relativamente calmi e rilassati con una contenzione minima o assente.
Azzerare lo strumento tra un passaggio e l'altro premendo il pulsante CLR. Successivamente, registra un punteggio di fattibilità da zero a cinque per indicare la facilità di raccolta dei dati. Dare al cane una pausa di cinque minuti prima di iniziare le misurazioni con l'algometro della pressione smussato.
Durante l'installazione dello strumento, assicurarsi che la piccola sonda smussata sia avvitata saldamente nel dispositivo. Quindi accendere il dispositivo di registrazione e premere il pulsante max per continuare quando richiesto sullo schermo. Premere il pulsante dell'unità finché l'unità non viene visualizzata in grammi nella parte superiore dello schermo e premere il pulsante zero per azzerare lo strumento.
Successivamente, posizionare e preparare il cane in decubito laterale per misurare le soglie come menzionato in precedenza. Applicare la sonda smussata perpendicolarmente alla pelle dell'area da testare per applicare una forza costantemente crescente con la sonda a 20 grammi al secondo fino a quando il cane non mostra risposte comportamentali che indicano la percezione cosciente dello stimolo. Rimuovere lo stimolo quando il cane ritira l'arto o viene raggiunta la forza massima.
Dopo aver registrato la forza massima applicata dal dispositivo di registrazione, ripetere le misurazioni per un totale di cinque prove. Consentire al cane di rimanere in decubito laterale per sedersi, stare in piedi o muoversi nella stanza QST per mantenere il comfort durante l'intervallo tra le prove. Quindi sostituire il cane in decubito laterale prima della misurazione successiva.
Registra un punteggio di fattibilità da zero a cinque per indicare la facilità con cui sono stati raccolti i dati. Concedere al cane una pausa di cinque minuti prima di iniziare le misurazioni con la sonda termica calda. Prima di iniziare l'esperimento, prepara il cane come spiegato prima.
Quindi applicare il thermode sulla pelle dell'area da testare e fare clic sul pulsante di avvio nell'angolo in basso a sinistra della scheda del test per avviare il test. Quando il cane mostra movimenti o risposte comportamentali che indicano la percezione cosciente dello stimolo o quando viene raggiunta la massima latenza, rimuovere il termodo fermando contemporaneamente il cronometro. Registra la latenza per il prelievo.
Ripetere le misurazioni per un totale di cinque prove facendo prima clic sul pulsante di arresto e quindi facendo clic sul pulsante di pre-test tra una misurazione e l'altra per interrompere il riscaldamento del thermode. Ciò consentirà al software di ricalibrare il termodo per prepararsi all'applicazione successiva. Registra un punteggio di fattibilità da zero a cinque per indicare la facilità con cui sono stati raccolti i dati.
L'analisi rappresentativa riassume i dati QST meccanici e termici caldi di un gruppo di cani sani e indolori. I dati delle misurazioni della soglia sensoriale dell'estetimetro elettronico di Von Frey non hanno mostrato alcun effetto significativo del peso corporeo sulle soglie sensoriali. Un impatto simile del peso corporeo è stato notato nei dati delle soglie sensoriali dell'algometro della pressione sondato smussato.
D'altra parte, i dati raccolti per la latenza sensoriale della sonda termica calda hanno mostrato un effetto significativo del peso corporeo sulla latenza sensoriale. La media complessiva, la deviazione standard e l'intervallo delle soglie sensoriali per il QST meccanico e termico caldo sono stati riassunti nello stesso gruppo di cani sani senza dolore. Ciò fornisce valori di riferimento per i futuri ricercatori che utilizzano queste tecniche: è molto importante identificare in modo affidabile la risposta comportamentale del cane che indica la percezione cosciente dello stimolo, che può apparire diversa per cani diversi.
Oltre ai test sensoriali quantitativi, la raccolta di informazioni comportamentali attraverso questionari convalidati per i proprietari e test di reattività emotiva può aiutare a fornire una valutazione completa dello stato affettivo del cane.
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Questo studio presenta un protocollo standard per il test quantitativo della sensibilità (QST) nei cani, finalizzato a valutare il sistema somatosensoriale mediante metodi meccanici e termici caldi. Utilizzando strumenti come l'anestesiometro elettronico di von Frey e l'algiometro a pressione, il protocollo mira a standardizzare le valutazioni, consentendo confronti tra diversi studi.
Il test sensoriale quantitativo (QST) nei cani fornisce un approccio standardizzato e non invasivo per valutare la funzione somatosensoriale, sostenendo la ricerca traslazionale sul dolore e lo sviluppo di modelli comparativi. L'individuazione di soglie sensoriali di riferimento e di endpoint comportamentali consente una valutazione preclinica più predittiva di potenziali analgesici e una riduzione dei rischi meccanicistici nei percorsi di neuroscienza veterinaria e comparativa. Protocolli QST standardizzati facilitano il confronto dei dati tra studi e tra sedi diverse, rafforzando le decisioni strategiche nel discovery iniziale e nella ricerca traslazionale.
QST si integra nel percorso dalla scoperta alla fase preclinica come lettura funzionale per la validazione del bersaglio, l'ottimizzazione del composto leader e lo sviluppo di biomarcatori traslazionali nei percorsi per il dolore e i disturbi sensoriali.