Un metodo semplice modificato per l'induzione dell'infarto miocardico nei topi

Questo rapporto presenta un approccio unico per l'induzione dell'infarto miocardico nei topi. Il metodo attuale è semplice, fa risparmiare tempo e utilizza i tubi chirurgici e le attrezzature che si trovano facilmente nella maggior parte dei laboratori. La creazione di modelli di infarto del miocardio fornisce una premessa per studiare i meccanismi passati del rimodellamento post-infarto miocardico e la variazione di nuove terapie.

Applicare la crema depilatoria sul petto del topo e attendere un minuto. Quindi rimuovere delicatamente la crema depilatoria e i capelli con una garza bagnata. Fissare il mouse su una piattaforma chirurgica in posizione supina.

Disinfettare l'area chirurgica come descritto nel testo. Quindi posizionare un telo sterile intorno all'area disinfettata. Fai un taglio cutaneo di 0,5 centimetri lungo la linea che collega lo xifoide e l'ascella e separa senza mezzi termini i muscoli pettorale maggiore e pettorale minore usando una pinza.

Aprire il quarto spazio intercostale utilizzando un emostato Micro-Mosquito. Esternare il cuore spingendolo verso il quarto spazio intercostale con l'indice della mano sinistra. Fissare il cuore con la mano sinistra e legare il ramo discendente anteriore sinistro con una sutura 6/0 a tre millimetri dalla sua origine.

Riposizionare rapidamente il cuore nella cavità toracica. Evacuare l'aria dalla cavità toracica premendo delicatamente sulla cavità toracica. Per la gestione del dolore post-operatorio, iniettare buprenorfina per via sottocutanea ogni quattro-sei ore per un massimo di settantadue ore dopo l'intervento.

Posiziona il mouse su un termoforo per riprenderti dall'anestesia. Fissare il topo sottoposto a eutanasia sulla piattaforma chirurgica in posizione supina. Fai un'incisione ventrale di circa tre o quattro centimetri nella parte superiore dell'addome.

Tagliare le costole da entrambi i lati della cavità toracica, quindi rimuovere il diaframma. Perfondere il cuore con 10 millilitri di PBS freddo a quattro gradi Celsius 1X attraverso l'iniezione intraventricolare. Quindi raccogli il cuore tagliando la radice aortica e conservandola immediatamente a meno 80 gradi Celsius.

Tagliate il cuore congelato in fette spesse un millimetro su ghiaccio usando delle lamette da barba. Incubare le fette di cuore preparate in una soluzione all'1% di TTC disciolta in un PBS 1X a 37 gradi Celsius per 10-15 minuti. Quindi fotografa le fette utilizzando una fotocamera digitale.

Dopo la legatura dell'arteria coronaria, l'analisi della colorazione TTC ha indicato l'induzione riuscita dell'infarto miocardico e i cambiamenti temporali delle dimensioni della cicatrice post-infarto miocardico. I risultati dell'analisi di sopravvivenza hanno mostrato mortalità conclamata entro sette giorni dall'infarto miocardico nei topi C57BL/6J maschi e femmine. La rottura ventricolare è stata una ragione comune per la morte post-infarto del miocardio.

La valutazione ecocardiografica post-infarto del miocardio ha dimostrato il successo dell'induzione della disfunzione contrattile e del rimodellamento ventricolare. Quando si tenta di esternare il cuore, non premere prima la cavità toracica e, seguendo la nostra resistenza, indica la necessità di regolare la direzione rispetto alla lode ponderata. A seguito di questa procedura, è possibile eseguire l'iniezione intramiocardica di vettori o cellule virali per testare l'efficacia delle terapie geniche o delle terapie cellulari in materia di malattie cardiache.