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DOI: 10.3791/63127-v
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This protocol describes the use of fluorescent or luminescent-expressing recombinant SARS-CoV-2 for in vivo and ex vivo live imaging of viral detection and tracking in K18 human ACE2 transgenic mice. This technique allows for effective evaluation of therapeutics for SARS-CoV-2 infection.
Questo protocollo descrive la dinamica delle infezioni virali utilizzando la luciferasi e la fluorescenza che esprimono la ricombinante (r)SARS-CoV-2 e un sistema di imaging in vivo (IVIS) in topi transgenici K18 hACE2 per superare la necessità di approcci secondari necessari per studiare le infezioni da SARS-CoV-2 in vivo.
Il nostro protocollo ha descritto l'uso di SARS-CoV-2 ricombinante fluorescente o luminescente per il rilevamento virale di imaging live in vivo ed ex vivo e il tracciamento virale nel modello murino transgenico ACE2 umano K18 dell'infezione da SARS-CoV-2. Il vantaggio principale di questa tecnica è l'applicazione e la fattibilità del rilevamento e del tracciamento virale per studi in vivo ed ex vivo di SARS-CoV-2 nel modello murino transgenico ACE2 umano K18. L'uso dell'imaging in vivo di SARS-CoV-2 nel modello murino transgenico DI ACE2 umano K18 rappresenta un'opzione eccellente per valutare le terapie per il trattamento dell'infezione da SARS-CoV-2 in vivo.
L'implementazione dei reporter SARS-CoV-2 rappresenta un'opzione eccellente per valutare la patogenicità, la replicazione virale e il trofismo in vivo. Per gli studi in vivo con luciferasi che esprime SARS-CoV-2, si raccomanda la rasatura dei topi e l'imaging tempestivo dopo l'iniezione del substrato per migliorare il segnale di bioluminescenza. Iniziare il monitoraggio della bioluminescenza avviando il sistema di imaging in vivo, o IVIS, e impostando i parametri, fare clic sulla modalità immagine su Bioluminescenza, quindi aprire il filtro e impostare il tempo di esposizione su Auto.
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