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DOI: 10.3791/63232-v
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Il test ACT1-CUP1, un saggio di crescita del rame, fornisce una rapida lettura dello splicing dell'RNA messaggero precursore (pre-mRNA) e dell'impatto che i fattori di splicing mutante hanno sulla funzione spliceosomale. Questo studio fornisce un protocollo ed evidenzia la personalizzazione possibile per affrontare la questione di splicing di interesse.
Il test ACT1-CUP1 può identificare se una mutazione influenza lo splicing dell'RNA pre-messaggero e dare un'indicazione di quale fase di splicing è più colpita. Il saggio ACT1-CUP1 collega la mutazione del fattore di splicing al suo impatto sul complesso processo di splicing. Utilizza la semplice lettura del fenotipo di crescita e ha un ampio intervallo di sensibilità.
L'uso efficiente del tempo è importante quando si esegue un test ACT1-CUP1. Inizia con un test da cinque a 10 ceppi per ridurre al minimo le aberrazioni di crescita indotte dallo stress. A dimostrare il processo saremo io e Isabelle Marasigan, una ricercatrice universitaria del mio laboratorio.
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