마우스 자궁경부 이종 심장 이식 모델을 위한 수정된 커프 기술
February 7th, 2022
본 프로토콜에서, 마우스 심장 이식 모델은 심장 동종이식 거부반응의 메카니즘을 조사하기 위해 사용된다. 이 이종 심장 이식 모델에서는 수술 효율이 향상되고 수정된 커프 기술을 사용하여 심장 이식의 자궁경부 종단 간 문합에 의해 심장 이식편의 생존이 보장됩니다.
마우스 심장 이식 모델은 심장 동종이식편, 면역학적 및 시상주위 거부 메커니즘을 조사하는 데 도움이 됩니다. 이러한 이해는 환자의 장기 생존을 개선하기 위한 독특한 접근 방식을 개발하는 데 도움이 될 것입니다. 이 자궁 경부 이식 수술은 커프 방법을 사용하여 바느질없이 수행됩니다.
따라서 혈관 문합의 복잡성을 줄이고 하체의 혈액 공급 및 정맥 역류에 대한 간섭을 방지합니다. 이 절차를 시연하는 것은 우리 실험실의 외과 의사 인 Dr.Xin Mao가 될 것입니다. 시작하려면 수혜자 마우스를 수술대의 가열 패드에 놓고 수술 부위의 머리카락을 면도합니다.
수술 부위를 소독 한 후 오른쪽 하악 각도에서 꼬리 끝까지 자궁 경부 정중선과 평행 한 1.5-2 센티미터 절개를합니다. 전기 응고제와 마이크로 집게를 사용하여 오른쪽 외부 경정맥의 약 1cm를 해부합니다. atruamatic microvascular clamp로 근위 끝에서 정맥을 자르고 말단부에서 결찰합니다.
정맥의 말단부를 경사 끝과 표면 홈이 있는 22게이지 폴리우레탄 가시 커프를 통해 통과시킵니다. 미세 혈관 클램프를 사용하여 커프의 손잡이로 정맥을 고정하십시오. 8-0 제거 말단부에서 결찰 봉합사를 하고 표면 미늘에 의해 걸린 커프 위로 내강을 뒤집고 표면의 홈에 10-0 수술 봉합사로 고정합니다.
오른쪽 설하선을 절제하여 심장 이식편을 이식하기 위한 포사를 형성하고 상악하악선의 우엽과 우측 흉쇄유돌근을 보존합니다. 마이크로 집게를 사용하여 약 1cm 동안 오른쪽 총 경동맥을 해부하고 근위 끝에 비 외상성 미세 혈관 클램프로 동맥을 자릅니다. 동맥을 합자하고 잘라냅니다.
표면에 경사 끝과 홈이 있는 26게이지 폴리우레탄 가시 커프를 통해 동맥의 말단부를 통과시킵니다. 미세혈관 클램프를 사용하여 커프의 손잡이로 동맥을 고정합니다. 말단부에서 결찰 봉합사를 제거하고 커프 위로 내강을 뒤집은 다음 10-0 수술 봉합사로 표면 미늘과 홈으로 고정합니다.
수혜자의 혈관을 준비한 후 혈전증을 예방하기 위해 혈관에 밀리리터 헤파린 식염수 당 100 국제 단위를 떨어 뜨립니다. 후속 이식을 위해 젖은 식염수 거즈로 자궁 경부 절개를 덮으십시오. 전기 면도기를 사용하여 복부 털을 면도하십시오.
수술 부위를 소독한 후 치골 결합에서 하시포진까지 정중선을 따라 복부를 절개하고 견인기로 절개 부위를 확장합니다. 전기 응고제와 미세 겸자를 사용하여 복부 대동맥과 하대정맥 1cm를 해부하고 하대정맥을 통해 헤파린 밀리리터당 250국제 단위가 보충된 생리식염수 1밀리리터를 주입하여 헤파린을 시행합니다. 복부 대동맥과 하대정맥을 절제하십시오.
수술용 가위를 사용하여 양쪽의 전방 겨드랑이 라인을 따라 흉부를 절제하여 흉벽을 분리한 다음 8-0으로 상대정맥을 결찰합니다 외과 봉합사. 간상부 하대정맥에 두피 바늘을 삽입합니다. 그런 다음 밀리리터 헤파린당 100단위의 헤파린이 보충된 얼음처럼 차가운 생리 식염수를 간상 하대정맥에서 두피 바늘을 통해 주입하여 혈액색이 바래질 때까지 기증자의 심장을 풍부하게 합니다.
기증자 심근을 보호하기 위해 대동맥궁에서 2-3밀리리터의 얼음처럼 차가운 히스티딘-트립토판-케토글루타레이트 용액으로 기증자 심장을 관류합니다. 상부 및 하부 정맥과 폐정맥을 5-0 수술 봉합사로 유인합니다. 분기하기 전에 기증자 대동맥과 폐동맥을 해부하고 절단하십시오.
그런 다음 상부 및 하부 정맥과 폐정맥을 나누어 기증자의 심장을 제거합니다. 기증자 심장을 거꾸로 된 위치에서 수혜자 마우스의 자궁 경부 주머니에 이식합니다. 전향된 수혜자 경정맥이 있는 커프를 기증자 폐동맥의 내강으로 당겨 종단 간 문합을 수행합니다.
문합을 고정하기 위해 10-0 수술 봉합사를 통해 표면의 홈을 사용하여 커프를 결속시킵니다. 수혜자 경동맥에 대한 기증자 대동맥의 종단 간 문합을 위해 유사한 절차를 사용합니다. 경정맥의 비외상성 미세혈관 클램프를 풀고 경동맥을 풀어 기증자의 심장을 재관류합니다.
심장 이식편을 고정하고 이식편이 비틀어지지 않도록 적절하게 봉합하십시오. 5-0 폴리아미드 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 연속 봉합사로 경추 절개를 봉합합니다. 이 마우스 자궁 경부 이종 심장 이식 모델을 이용하여, 수용자 마우스의 생존율은 약 95.2%이었고, 이식 후 8일 이내에 모든 심장 동종이식편이 소실되었다.
대조적으로, 모든 동종 심장 이식은 4 주 이상 생존했습니다. 회전된 혈관의 더 나은 고정을 위한 홈과 커프, 선박의 반복적인 작동을 방지합니다. 이 수술에서 혈관 문합을 위한 수정된 커프 방법은 다른 장기 이식 동물 모델의 다른 문합에도 적용할 수 있습니다.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
개요
이 프로토콜은 심장 이식 배척 메커니즘을 연구하기 위해 마우스 심장 이식 모델을 활용합니다. 수정된 Cuff 기술을 사용한 경부 끝-끝 문합은 수술 효율성과 이식 생존율을 향상시킵니다.
주요 연구 구성 요소
과학 영역
- 심장 이식
- 면역학
- 수술 기술
배경
- 심장 이식 배척 이해는 이식 결과 개선에 중요합니다.
- 이 모델은 배척에 관련된 면역학적 메커니즘의 조사를 가능하게 합니다.
- 개선된 수술 기술은 더 나은 환자 생존율로 이어질 수 있습니다.
- Cuff 방법은 문합 과정을 단순화합니다.
연구 목적
- 심장 이식 배척의 메커니즘을 조사합니다.
- 더 나은 이식 생존율을 위해 수술 기술을 향상시킵니다.
- 장기 환자 생존을 위한 전략 개발에 기여합니다.
사용된 방법
- 마우스 심장 이식 모델.
- 수정된 Cuff 기술을 사용한 경부 끝-끝 문합.
- 수용 마우스의 수술 전 준비.
- 자격을 갖춘 외과 의사에 의한 수술 절차 시연.
주요 결과
- 심장 이식의 수술 효율성 개선.
- 심장 이식의 생존율 향상.
- 수술 복잡성 감소.
- 수정된 수술 기술의 성공적인 시연.
결론
- 수정된 Cuff 기술은 심장 이식에 효과적입니다.
- 이 접근 방식은 이식 환자의 장기 결과 개선으로 이어질 수 있습니다.
- 이식 배척의 면역학적 측면을 탐구하기 위한 추가 연구가 필요합니다.
