Name: Continue meting op lange termijn van de renale bloedstroom bij bewuste ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 9 s
Description: Leer continue meting van de renale bloedstroom bij bewuste ratten voor hypertensieonderzoek. Deze methode maakt langetermijnmonitoring in de thuisomgeving mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Deze studie werd ondersteund door subsidies voor wetenschappelijk onderzoek (P01 HL116264, RO1 HL137748). De auteurs willen Theresa Kurth bedanken voor haar advies en hulp bij het onderhouden van de experimentele omgeving als laboratoriummanager.

Het protocol is goedgekeurd door het Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Dahl zoutgevoelige ratten (mannetjes en vrouwtjes), ~ 8 weken oud, 200-350 g, werden gebruikt voor de experimenten.
1. Voorbereiding van dieren
<ol><li>Installeer een bewegingsresponssysteem voor de rat, een perivasculaire flowmodule, spuitpomp, opnameapparaat en software (zie materiaaltabel) in de dierenkamer.</li>
	<li>Plaats de ratten in de kooi om vertrouwd te raken met de omgeving, het voedsel en het watersysteem ten minste de week voorafgaand aan de operatie. Vast de ratten vanaf de dag voor de operatie omdat een hoog maaggehalte de plaatsing van de stroomsonde in de linker nierslagader kan verstoren en tracheale aspiratie kan veroorzaken.</li>
	<li>Sluit een polyurethaanbuis van 5 cm (binnendiameter 0,30 mm en buitendiameter 0,64 mm) aan op het einde van de 90 cm polyurethaanbuis (binnendiameter 0,64 mm en buitendiameter 1,02 mm) met PVC-cement om een femorale arteriële katheter te maken (zie Materiaaltabel).<ol><li>Steriliseer de katheters met een ethyleenoxidesterilisator, de stroomsonde met 2,5% glutaaraldehyde en de chirurgische instrumenten in een stoomautoclaaf. Veeg chirurgische tafels, microscopie en lichten af met 1% natriumhypochloriet.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Operatie
<ol><li>Plaats de RBF-sonde volgens de onderstaande stappen.<ol><li>Verdoof de ratten met 2,0% -2,5% isofluraan in die mate dat de ratten niet reageren op de pijnprikkel. Plaats het op de operatietafel bij 37 °C en injecteer vóór de operatie 0,09 mg/kg buprenorfine SR en 15 mg/kg cefazoline (zie materiaaltabel).</li>
		<li>Scheer de hele buik met een elektrische tondeuse en een gebied op de nek rondde 7e halswervels waar de katheter en de stroom bewijzen draden zullen vertrekken.</li>
		<li>Veeg na het scheren het gebied af met 70% ethanol, 10% povidon-jodium en opnieuw met 70% ethanol.</li>
		<li>Plaats de rat in buikligging. Maak een snede van 1 cm met behulp van een scalpel op de nek en de linkerflank. Voer vervolgens een stompe dissectie uit met een hemostatische tang en maak een onderhuidse ruimte vrij van de flankincisie naar de achterkant van de nek.</li>
		<li>Passeer de stroomsonde door deze onderhuidse tunnel van de nek naar de flankincisie met hemostatische tang.</li>
		<li>Plaats de rat in rugligging. Maak een buikincisie van 4-5 cm in de middellijn.</li>
		<li>Ontleed het gebied rond de nierslagader met een gebogen pincet om een ruimte bloot te leggen die voldoende is om de stroomsonde te plaatsen (zie Materiaaltabel). Doorprik vervolgens botweg de linker quadratus lumborumspier met de hemostatische tang en trek de kop van de stroomsonde in de buikholte.</li>
		<li>Haak de punt van de stroomsonde aan de linker nierslagader en sluit deze aan op de flowmeter (zie Materiaaltabel). Voeg wat gel toe rond de punt van de sonde en de waarde van het debiet verschijnt op de stroommeter. OPMERKING: Hoewel het afhangt van de grootte van de rat, zal een stroom van ongeveer 3-5 ml / min worden waargenomen bij een rat van 230 g.</li>
		<li>Lijm het polyestervezelgaas dat aan de sonde is bevestigd met weefsellijm aan de buikwand en houd vast tot het droog en gebonden is (~ 1-2 min). Zodra de stroom op zijn plaats is, koppelt u de stroomsonde los van de stroommeter en bedekt u de buik met zout ingesmoord gaas en gaat u verder met de stap van het inbrengen van de katheter.</li>
	</ol></li>
	<li>Breng de femorale katheter in volgens de onderstaande stappen. OPMERKING: De methode voor het inbrengen van een met vloeistof gevulde katheter is dezelfde als bij reguliere telemetrie-installaties. Hoewel telemetrie de voorkeur heeft, maakt de arteriële katheter drukmonitoring en periodebloedafname van de bewuste rat mogelijk.<ol><li>Vul eerst de katheter met zoutoplossing en klem deze vast met een vasculaire tang voordat u een huidincisie van 1 cm maakt met behulp van een scalpel op de linkerdij om de dijslagader te ontleden en bloot te leggen. Terwijl u de stroom aan de proximale kant van de dijbeenslagader met een draad blokkeert, brengt u de katheter in.</li>
		<li>Spoel met een kleine hoeveelheid zoutoplossing, sluit deze aan met de juiste grootte roestvrije draad en bind de katheter vast met een draad om deze te bevestigen.</li>
		<li>Zodra de ligatuur rond de katheter is gebonden, maakt u een onderhuidse tunnel door een roestvrijstalen trocar van de dij naar de achterkant van de nek te gebruiken om de katheter naar het nekgebied te brengen. Zet het vast met 3-0 zijden hechtingen die in de trapeziusspier worden geplaatst.</li>
	</ol></li>
	<li>Hecht de sonde.<ol><li>Draai de rat naar de buikligging en steek de cirkelvormige lus van de stroomsonde subcutaan op de flank. Hecht de incisie aan de flank en de nek met 4-0 chirurgische hechting (zie Materiaaltabel).</li>
		<li>Bevestig een huidknop aan de flowsonde en hecht deze met 3-0 zijde aan de achterkant van de nek.</li>
		<li>Sluit de stroomsonde opnieuw aan op de stroommeter, draai de rat terug naar de dorsale positie om RBF te controleren en maak de laatste aanpassingen van de stroomsonde om zijn positie op de nierslagader te optimaliseren.</li>
		<li>Hecht ten slotte de spier met 3-0 zijde en de huid met 4-0 chirurgische hechting.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Herstel van het dier
<ol><li>Na zorgvuldige observatie, totdat de ratten volledig hersteld zijn van de anesthesie, brengen de ratten terug naar een bewegingsrespons-cagingsysteem, sluit de stroomsonde aan op de bloedstroommeter en laat een herstelperiode van ongeveer een week toe om de sonde en stroommeting te stabiliseren. OPMERKING: Opnemen hoeft in deze periode niet te gebeuren.</li>
	<li>Injecteer 3% gehepariniseerde zoutoplossing continu gedurende het onderzoek vanuit de arteriële katheter met een snelheid van 100 μL / h om de stolling te voorkomen.</li>
	<li>Wanneer de stroom na 5-6 dagen stabiliseert, stelt u de kalibratie van de flowmeter in om de bloedstroom te meten op 0-20 ml / min en begint u met de continue registratie van RBF.</li>
</ol>

<ol><li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChonchol%2C+M+%22Brenner+%26+Rector%27s+The+Kidney%22">Brenner & Rector's The Kidney</a>. 11, Elsevier Inc. Philadelphia, PA. (2019).</li>
<li>Chen, J. -K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li>
<li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li>
<li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li>
<li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li>
<li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states%5BTitle%5D)+AND+%22Urological+Research%22%5BJournal%5D)">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li>
<li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185(1994).</li>
<li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li>
<li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li>
<li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li>
<li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li>
<li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Antioxidants+%26+Redox+Signaling%22%5BJournal%5D)">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants & Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li>
<li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4D+flow+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Magnetic+Resonance+Imaging%22%5BJournal%5D)">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li>
<li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li>
<li>Juárez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li>
<li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li>
<li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li>
<li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li>
<li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li>
<li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li>
<li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li>
<li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthesia%2C+surgery+and+renal+function%3A+Immediate+and+delayed+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia+and+Intensive+Care%22%5BJournal%5D)">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li>
<li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthesia+and+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia+and+Intensive+Care%22%5BJournal%5D)">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li>
<li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728(2018).</li>
<li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li>
<li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het huidige protocol beschrijft een techniek die gebruik maakt van commercieel beschikbare instrumentatie om RBF en arteriële druk continu gedurende vele weken te registreren. Bovendien kan urine worden verzameld met behulp van het apparaat dat wordt beschreven in stap 1.1. Het kan ook worden gebruikt om metabolieten in de urine te evalueren en, wanneer een arteriële katheter wordt geïmplanteerd, bloedafname voor analyse.
Traditioneel worden RBF-metingen acuut verkregen bij chirurgisch bereide...

De nieren zijn slechts 0,5% van het lichaamsgewicht, maar rijk aan bloedstroom, het ontvangen van 20% -25% van de totale cardiale output1. De regulatie van de renale bloedstroom (RBF) staat centraal in de nierfunctie, lichaamsvloeistof en elektrolytenhomeostase. Het belang van de regulatie van de bloedstroom naar de nier wordt mooi geïllustreerd door de aanzienlijke toename van RBF in de resterende nier na unilaterale nefrectomie 2,3,4 en door de reducties van RBF die optreden bij nierfalen 5,6,7. Of dergelijke veranderingen in RBF optreden als reactie op veranderingen in de nierfunctie of een afname van de functie als gevolg van vermindering van RBF is een uitdaging om vast te stellen bij verdoofde chirurgisch bereide dieren of menselijke proefpersonen. Er zijn temporele studies nodig waarin de gebeurtenissen vóór en na een gedefinieerde verandering kunnen worden bepaald en bij hetzelfde dier kunnen worden waargenomen tijdens de progressie van gebeurtenissen. In de dier- en mensstudies is RBF indirect geschat door de klaring van para-amino hippuurzuur (PAK)8,9,10 en in recentere tijd door beeldvormingstechnieken zoals echografie 9,11,12, MRI 4,13 en PET-CT14,15 die nuttige momentopnamen van elke nier geven en die de progressie van de ziekte kunnen volgen. Het is een uitdaging om RBF bij kleine dieren te evalueren door middel van echografie of MRI-scans zonder anesthesie. Het was onmogelijk om RBF onder bewuste omstandigheden continu te meten bij dezelfde rat gedurende langere perioden.
Het huidige protocol heeft daarom technieken ontwikkeld die gelijktijdige continue 24 uur/dag metingen van RBF mogelijk maken, die is gecombineerd met continue bloeddrukmeetmethoden voor vrij bewegende ratten zoals eerder beschreven 16,17,18,19,20,21 . Deze technologie maakt de temporele evaluatie van RBF in verschillende modellen van ratten mogelijk om oorzaak-gevolgrelaties in verschillende nieraandoeningen in de toekomst te bestuderen.

<table><tbody><tr><td>1RB probe</td><td>Transonic</td><td>1RB</td><td>ultrasonic flow probe</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Avrio Health</td><td></td><td>povidone-jodium</td></tr><tr><td>Buprenorphine SR-LAB</td><td>ZooPharm</td><td></td><td>Buprenorfine</td></tr><tr><td>Cefazolin</td><td>APOTEX</td><td>NDC 60505</td><td>Cefazolin</td></tr><tr><td>Crile Hemostats</td><td>Fine Surgical Instruments</td><td>13004-14</td><td>Hemostats voor blunt dissectie</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal</td><td>NDC 66794</td><td>Isoflurane</td></tr><tr><td>Medium Clear PVC cement</td><td>Oatey</td><td></td><td>PVC cement</td></tr><tr><td>Mersilene polyester fiber mesh</td><td>Ethicon</td><td></td><td>polyester fiber mesh</td></tr><tr><td>MetriCide28</td><td>Metrex</td><td>SKU 10-2805</td><td>2,5% glutaraldehyde</td></tr><tr><td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td><td>Braintree Scientific</td><td>MRE 025</td><td>gebruik voor katheter</td></tr><tr><td>MINI HYPE-WIPE</td><td>Current Technologies</td><td>#9803</td><td>1% natriumhypochloriet</td></tr><tr><td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td><td>Oatey</td><td>#31018</td><td>PVC cement</td></tr><tr><td>PHD2000 spuitpomp</td><td>Harvard apparatus</td><td>71-2000</td><td>spuitpomp</td></tr><tr><td>Ponemah software</td><td>DSI</td><td></td><td>opname software</td></tr><tr><td>Precision 3630 Tower</td><td>Dell</td><td></td><td>Computer voor opname</td></tr><tr><td>Raturn Stand-Alone System</td><td>BASi</td><td>MD-1407</td><td>een bewegingsresponskooicagesysteem</td></tr><tr><td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td><td>Braintree Scientific</td><td>RPT 040</td><td>gebruik voor katheter</td></tr><tr><td>Silicone cuff</td><td>Transonic</td><td>AAPC102</td><td>huidknoop</td></tr><tr><td>Surgical lubricant steriele bacteriostatic</td><td>Fougera</td><td>0168-0205-36</td><td>gell voor flow probe</td></tr><tr><td>Tergazyme</td><td>Alconox</td><td></td><td>protease bevattend anionisch detergent</td></tr><tr><td>TS420 Perivascular Flow Module</td><td>Transonic</td><td>TS420</td><td>perivascular flow module</td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td>weefselkleefstof</td></tr><tr><td>WinDaq software</td><td>DATAQ</td><td></td><td>opname software</td></tr></tbody></table>

continue meting op lange termijn van de renale bloedstroom bij bewuste ratten

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

De nieren spelen een cruciale rol bij het handhaven van de homeostase van lichaamsvloeistoffen. De regulatie van de renale bloedstroom (RBF) is essentieel voor de vitale functies van filtratie en metabolisme in de nierfunctie. Veel acute studies zijn uitgevoerd bij verdoofde dieren om RBF onder verschillende omstandigheden te meten om mechanismen te bepalen die verantwoordelijk zijn voor de regulatie van nierperfusie. Om technische redenen was het echter niet mogelijk om RBF continu (24 uur per dag) te meten bij ongeremde ongedoofde ratten gedurende langere perioden. Deze methoden maken de continue bepaling van RBF gedurende vele weken mogelijk, terwijl tegelijkertijd de bloeddruk (BP) wordt geregistreerd met geïmplanteerde katheters (vloeistof gevuld of door telemetrie). RBF-monitoring wordt uitgevoerd met ratten die in een cirkelvormige servogestuurde rattenkooi worden geplaatst die de ongeremde beweging van de rat gedurende het hele onderzoek mogelijk maakt. Tegelijkertijd wordt het in de knoop raken van kabels van de stroomsonde en arteriële katheters voorkomen. Ratten worden eerst geïnstrumenteerd met een ultrasone flow probe plaatsing op de linker nierslagader en een arteriële katheter geïmplanteerd in de rechter femorale slagader. Deze worden subcutaan naar de nekgeleid en verbonden met respectievelijk de flowmeter en de druktransducer om RBF en BP te meten. Na chirurgische implantatie worden ratten onmiddellijk in de kooi geplaatst om minstens een week te herstellen en de ultrasone sonde-opnames te stabiliseren. Urine opvang is ook haalbaar in dit systeem. De chirurgische en postoperatieve procedures voor continue monitoring worden in dit protocol gedemonstreerd.

De gemiddelde arteriële drukgegevens (figuur 1A) en bloedstroomgegevens (figuur 1B) van een representatieve mannelijke Dahl-zoutgevoelige rat worden weergegeven. De zoutgevoelige ratten van Dahl worden in een kolonie gehouden en gefokt aan het Medical College of Wisconsin. De operatie werd uitgevoerd op de leeftijd van 8 weken en het lichaamsgewicht was 249 g op het moment van de operatie. Ratten kregen een 0,4% NaCl-dieet en het dieet werd op de leeftijd van 10...

Het huidige protocol beschrijft een langdurige continue meting van de renale bloedstroom bij bewuste ratten en tegelijkertijd het registreren van de bloeddruk met geïmplanteerde katheters (met vloeistof gevuld of door telemetrie).

Continue meting op lange termijn van de renale bloedstroom bij bewuste ratten

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

De continue registratie van de renale bloedstroom bij geïnstrumenteerde ratten stelt ons in staat om tijdelijk de volgorde van gebeurtenissen te bepalen die leiden tot het ziekteproces dat we bestuderen. In ons geval is het hypertensie en we proberen te bepalen of een vermindering van de renale bloedstroom, die optreedt bij hypertensie, voorafgaat aan of een gevolg is van de hoge bloeddruk. Het systeem dat we vandaag zullen demonstreren en de voorbereiding van het dier is echt ontworpen om een continue 24-uurs bepaling van de renale bloedstroom gedurende vele weken achter elkaar mogelijk te maken om chronische gebeurtenissen te bestuderen en de rat in hun thuisomgeving, kooien, te bestuderen.Zoals met alle chirurgische technieken, oefening, geduld en aandacht voor detail, zullen we deze procedures onder de knie moeten krijgen totdat het werktuig op tijd kan worden uitgevoerd. Om te beginnen met het scheren van de hele buik in een regio op het dutje rond de zevende nekwervels van een verdoofde rat met een elektrische tondeuse. Veeg na het scheren het gebied drie keer af afwisselend met 10% povidonjodium en 70% ethanol.Plaats de rat in buikligging. Maak een snede van een centimeter m

long-term-continuous-measurement-of-renal-blood-flow-in-conscious-rats

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Chronische catheterisatie van de bloedvaten in de rat is vaak nodig voor de toediening van stoffen, het verkrijgen van bloed steekproef over een periode van tijd of voor directe bewuste bloeddrukmetingen. Femorale arteriële catheterisatie van de rat en de bijbehorende metingen van de bloeddruk in de bewuste dier zal worden aangetoond.

Femorale arteriële en veneuze catheterisatie voor bloedafname, Drug Administration en bewust Bloeddruk en hartslag metingen

Meting van de glomerulaire filtratiesnelheid (GFR) is de gouden standaard voor de nierfunctie beoordeling. Hier beschrijven we een high-throughput methode die de bepaling van GFR in bewuste muizen met een enkele bolusinjectie, bepaling van fluoresceïne-isothiocyanaat (FITC)-inuline in plasma en berekening van GFR door een bifasisch exponentieel model laat.

Een High-throughput-methode voor meting van de glomerulaire filtratiesnelheid in Conscious Muizen

Er wordt een methode gepresenteerd om de snelheid van de microcirculatoire bloedstroom te meten in longkankermetastasen van het pleuraoppervlak bij ratten op een geautomatiseerde manier, met behulp van gesloten-borst intravitale longmicroscopie. Dit model heeft het potentieel om als een wijdverbreid hulpmiddel te worden gebruikt om fysiologisch onderzoek uit te voeren naar longmetastasen bij knaagdieren.

Geautomatiseerde Meting van Microcirculatoire snelheid van de bloedstroom in longmetastasen van Rats

Hemodynamische disfunctie in een vroeg stadium is cruciaal voor de ontwikkeling van nierziekte. Toch zijn detectiemethodologieën beperkt. Recente vorderingen in sonografie bieden een niet-invasieve, nauwkeurige optie voor vroege detectie van nierschade. Deze studie schetst een stap-voor-stap sonografische methodologie voor het detecteren van nierdisfunctie met behulp van een door geneesmiddelen geïnduceerde nefrotoxiciteit-ratmodel.

Vroege opsporing van drugs geïnduceerde renale hemodynamische Dysfunction Met behulp van echografische Technologie in Ratten

Het doel van dit protocol is om de principes en technieken te demonstreren voor het meten en berekenen van glomerulaire filtratiesnelheid, urinestroomsnelheid en uitscheiding van natrium en kalium bij een rat. Deze demonstratie kan worden gebruikt om studenten een algemeen conceptueel begrip te geven van hoe nierfunctie kan worden gemeten.

Physiology Lab Demonstratie: glomerulaire filtratiesnelheid in een Rat

De bepaling van de glomerulaire filtratiesnelheid (GFR) is de gouden standaard om de algehele nierfunctie te beoordelen. Traditionele procedures om deze parameter te meten zijn echter omslachtig en vereisen een grote tijdsinvestering. Hier beschrijven we een snellere en minimaal invasieve methode om de GFR transcutaan te bepalen.

Transcutane beoordeling van de nierfunctie in Conscious Knaagdieren

Narcose muizen vertonen niet-fysiologische systemische bloeddruk, die zich verzet tegen de zinvolle beoordeling van autonome Toon gezien de intieme relatie tussen bloeddruk en het autonome zenuwstelsel. Dus, een nieuwe methode om tegelijkertijd record renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste muizen wordt geschetst.

Nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen.

Hier beschrijven we een protocol voor het meten van de glomerulaire filtratie snelheid (GFR) in bewuste, vrij bewegende muizen met behulp van een monitor transdermaal GFR.

Transdermaal meting van de glomerulaire filtratie snelheid in muizen

Hier beschrijven we een setup voor gelijktijdige opname elektrocardiogram en intra-arteriële bloeddruk (BP) in experimentele ratten, die kunnen worden gedaan met standaard uitrusting in dierlijke voorzieningen en kunnen worden toegepast op de fysiologische of farmacologische studies om te onderzoeken van pathogene of therapeutische mechanismen in cardiovasculaire geneeskunde.

Gelijktijdige electrocardiografie opname en invasieve bloed druk meting bij ratten

Hier wordt een protocol voor continue bloed bemonstering tijdens PET/CT-beeldvorming van ratten beschreven om de arteriële invoer functie (AIF) te meten. De catheterisatie, de kalibratie en opzet van het systeem en de gegevensanalyse van de bloed radioactiviteit worden aangetoond. De gegenereerde gegevens bieden invoerparameters voor daaropvolgende bio-kinetische modellering.

Continue bloedafname in kleine dierlijke positron emissie tomografie/computertomografie maakt de meting van de arteriële ingangsfunctie mogelijk

Leer continue meting van de renale bloedstroom bij bewuste ratten voor hypertensieonderzoek. Deze methode maakt langetermijnmonitoring in de thuisomgeving mogelijk.

Continue meting op lange termijn van de renale bloedstroom bij bewuste ratten

Meer video's verkennen