Somministrazione mediata da elettroporazione di ribonucleoproteine Cas9 e mRNA in epatociti primari di topo appena isolati

Il vantaggio principale della nostra tecnica è che si tratta di un approccio facile, veloce e riproducibile per la modifica dei geni negli epatociti primari di topo come un modo per generare modelli di malattia in vitro e in vivo. Utilizzando la nostra tecnica, potrebbe essere possibile abbattere un gene bersaglio in epatociti isolati e quindi trapiantarli di nuovo nel paziente, per sostituire le cellule malate con epatociti geneticamente modificati I ricercatori inesperti potrebbero lottare con l'incannulamento e mantenere il catetere stabile durante la perfusione. Si consiglia agli utenti di leggere attentamente e praticare la procedura e i metodi di risoluzione dei problemi prima di iniziare.

A dimostrare la perfusione epatica e l'isolamento degli epatociti saranno Tina Parker, responsabile della struttura clinica, e Ilayda Ates, assistente di ricerca laureata. La procedura di elettroporazione sarà dimostrata da Callie Stuart, un'assistente di ricerca laureata del mio laboratorio. Sotto un piano chirurgico di anestesia.