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In vitro Modello enteroide apical-out di enterocolite necrotizzante
In vitro  Modello enteroide apical-out di enterocolite necrotizzante
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JoVE Journal Medicine
In Vitro Apical-Out Enteroid Model of Necrotizing Enterocolitis

In vitro Modello enteroide apical-out di enterocolite necrotizzante

Full Text
2,786 Views
09:11 min
June 8, 2022

DOI: 10.3791/64003-v

Kathryn Burge1, Adam Wilson1, Hala Chaaban1

1Department of Pediatrics, Division of Neonatal-Perinatal Medicine,University of Oklahoma Health Sciences Center and Center for Pregnancy and Newborn Health

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo protocollo descrive un modello di enterocolite necrotizzante apicale (NEC) in un piatto che utilizza enteroidi intestinali piccoli con polarità invertita, consentendo l'accesso alla superficie apicale. Forniamo un protocollo di colorazione immunofluorescente per rilevare l'interruzione epiteliale correlata al NEC e un metodo per determinare la vitalità degli enteroidi apicali-out sottoposti al protocollo NEC-in-a-dish.

Questo protocollo descrive il primo modello apical-out in-a-dish ed è un miglioramento critico rispetto ai modelli enteroidi basali laterali out-a-dish quando si stabilisce la modellazione in vitro di potenziali terapie destinate alla somministrazione orale. Questo metodo consente l'accesso alla superficie apicale degli enteroidi. I composti possono essere aggiunti ai terreni cellulari e i composti vengono assorbiti apicamente come sarebbero in vivo.

I ricercatori interessati a stabilire un sistema in vitro di infiammazione intestinale per testare potenziali terapie orali possono trovare questa tecnica particolarmente utile. I tessuti provenienti da età e specie diverse possono richiedere un'ulteriore standardizzazione. Quindi i pazienti mentre stabiliscono i tempi di inversione di polarità possono essere necessari.

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