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DOI: 10.3791/64023-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article discusses the use of microfluidic chambers in visual, single-molecule biochemistry. It emphasizes the importance of proper connections and techniques to ensure successful experiments without leaks or bubbles.
La biochimica visiva a singola molecola studiata attraverso camere microfluidiche è notevolmente facilitata utilizzando barili di vetro, siringhe a tenuta di gas, connessioni stabili di tubi alle celle di flusso ed eliminazione delle bolle posizionando valvole di commutazione tra le siringhe e i tubi. Il protocollo descrive due trappole ottiche che consentono la visualizzazione delle transazioni del DNA e delle interazioni intermolecolari.
Il collegamento delle porte per accoppiarsi alle siringhe con tubi è fondamentale perché, quando è fatto bene, non ci sono perdite, non ci sono bolle nella cella di flusso e gli esperimenti possono essere eseguiti ripetutamente utilizzando la stessa cella di flusso per un periodo di un anno con un uso attento. Qui, verranno presentati due semplici metodi per collegare i connettori alle celle di flusso. Questi sono facili, sono riproducibili e consentono allo sperimentatore di adattare facilmente la cella di flusso alle proprie esigenze senza troppi problemi.
L'uso di queste cellule a flusso è stato fatto pensando a esperimenti su singole molecole. In particolare, ciò che chiamiamo biochimica visiva, ma possono essere utilizzati in qualsiasi studio in cui è richiesta la microfluidica e in situazioni in cui deve essere utilizzato il flusso del fluido della lamina. Quindi, per evitare errori, invece di utilizzare preziose celle di flusso per stabilire le tecniche, suggerirei di esercitarsi prima su un vetrino o su un vetrino.
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