Istituzione di un modello di ratto semplice ed efficace per l'imaging intraoperatorio delle ghiandole paratiroidi

La ghiandola paratiroidea è un piccolo organo con funzioni molto importanti. Il nostro protocollo può essere utilizzato per lo sviluppo di nuove tecnologie di identificazione PG che possono aiutare i chirurghi a proteggerlo durante la tiroidectomia per il cancro della tiroide. Il vantaggio principale di questo modello è che può osservare una chiara differenza tra tiroide e PG attraverso l'imaging negativo di IONP.

Inoltre, il costo e la difficoltà operativa sono considerevolmente inferiori per questo modello di ratto rispetto ai modelli animali di grandi dimensioni. Per iniziare, posizionare una piastra riscaldante preriscaldata sul tavolo chirurgico per sostenere la temperatura corporea dell'animale durante l'intervento chirurgico, quindi trasferire il ratto anestetizzato su un drappo chirurgico posto sul tavolo operatorio. Usando elastici, fissare gli arti del ratto al tavolo operatorio e posizionare un cuscino cilindrico fatto di drappo sotto la spalla del ratto per appoggiare la testa all'indietro, esponendo completamente l'area del collo, quindi applicare la crema depilatoria sulla zona del collo, fino allo spazio sottomandibolare, fino al processo xifoideo e su entrambi i lati all'esterno del muscolo sternocleidomastoideo.

Dopo tre minuti, pulire delicatamente i capelli e la crema depilatoria con un fazzoletto. Successivamente, utilizzando un batuffolo di cotone iodophor, sterilizzare il centro del collo e l'area circostante. da cui vengono rimossi i capelli.

Coprire l'animale con un drappeggio chirurgico, mantenendo il foro allineato con l'area disinfettata. Usando il bisturi, fai un'incisione longitudinale di circa cinque centimetri nella linea mediana anteriore del collo del ratto. Sollevare la pelle lungo entrambi i lati dell'incisione e usando le forbici, tagliate longitudinalmente lungo la linea alba cervicale.

Utilizzare una pinza per separare il muscolo sternoideo e sternotiroideo. Bloccare i muscoli separati davanti al collo usando una pinza vascolare e tirare il tessuto bloccato all'esterno. Usando l'ago, passare la sutura attraverso il tessuto bloccato.

Fai un nodo e fissa la sutura al drappo chirurgico del tavolo operatorio. Individuare la cartilagine tiroidea in base alla sua forma a scudo e la cartilagine cricoide in base alla sua forma ad anello come limite superiore nell'area operativa, quindi individuare la trachea in base alla sua forma tubolare dell'anello cartilagineo nella parte anteriore e centrale del collo come limite inferiore nell'area operativa. Individuare la ghiandola tiroidea, una ghiandola rossa a forma di farfalla sul lato opposto della trachea tra i confini superiore e inferiore.

Quindi, individuare due ghiandole paratiroidi in una forma fusiforme che sono rossastre, ma più leggere della ghiandola tiroidea circostante con un certo confine sui lati superiore ed esterno della ghiandola tiroidea. Scatta una fotografia frontale delle ghiandole paratiroidi con la trachea, la tiroide e la laringe. Sezionare la parte posteriore dell'esofago e usando un divaricatore, esporre il lato destro delle ghiandole paratiroidi.

Scatta una fotografia sul lato destro delle ghiandole paratiroidi con la ghiandola tiroidea e la trachea, e allo stesso modo esponi e cattura il lato sinistro delle ghiandole. Utilizzare una siringa da insulina per iniettare localmente 10 microlitri di sospensione di nanoparticelle di ossido di ferro nero nel centro della ghiandola tiroidea e premere delicatamente il sito di iniezione con una garza per cinque secondi, quindi osservare la rapida diffusione delle nanoparticelle di ossido di ferro nero all'interno delle ghiandole tiroidee, ma non delle ghiandole paratiroidi, poiché colora negativamente le ghiandole paratiroidi e le differenzia dalla tiroide circostante. Cattura le fotografie frontali, sinistre e laterali delle ghiandole paratiroidi colorate negativamente insieme alla trachea, alla ghiandola tiroidea e alla laringe.

Dopo l'iniezione, l'agente di contrasto, nanoparticelle di ossido di ferro nero, si diffondono facilmente all'interno della ghiandola tiroidea e la colorano di nero, ma non possono infiltrarsi nella ghiandola paratiroidea a causa della loro alta densità tissutale. L'analisi istologica delle nanoparticelle di ossido di ferro nero iniettate-tiroide ha rivelato che le ghiandole paratiroidi sono arricchite con cellule principali strettamente allineate, mentre la ghiandola tiroidea presenta molti lumi sciolti che indicano una densità tissutale molto più bassa. Due cose importanti dovrebbero essere ricordate in questa procedura.

In primo luogo, la postura del topo. Si consiglia di appoggiare le orecchie e tornare indietro, esponendo completamente la zona del collo. In secondo luogo, quando iniettiamo gli IONP, dovremmo usare un ago per garantire la precisione perché la superficie della tiroide è piena di vasi sanguigni.

Questa procedura può essere eseguita anche mediante autofluorescenza del PG, che non è invasivo, fornisce informazioni in tempo reale e non utilizza il colorante come mezzo di contrasto, ma il segnale di autofluorescenza è debole e anche l'efficienza dell'imaging è scarsa. Altri ricercatori possono utilizzare questo modello di ratto semplice ed efficace per sviluppare e valutare nuove tecnologie e prodotti di identificazione PG invece di utilizzare animali di grandi dimensioni più complicati e costosi come cani e maiali.