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Editing efficiente del genoma dei topi mediante elettroporazione CRISPR degli zigoti
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JoVE Journal Developmental Biology
Efficient Genome Editing of Mice by CRISPR Electroporation of Zygotes

Editing efficiente del genoma dei topi mediante elettroporazione CRISPR degli zigoti

Full Text
4,158 Views
07:17 min
December 16, 2022

DOI: 10.3791/64302-v

Chantal K. Diallo1, Andrew J. Modzelewski1

1Department of Biomedical Sciences, School of Veterinary Medicine,The University of Pennsylvania

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Qui, descriviamo una semplice tecnica destinata alla generazione efficiente di topi geneticamente modificati chiamata CRISPR RNP Electroporation of Zygotes (CRISPR-EZ). Questo metodo fornisce reagenti di editing mediante elettroporazione negli embrioni con un'efficienza vicina al 100%. Questo protocollo è efficace per mutazioni puntiformi, piccole inserzioni genomiche e delezioni in embrioni di mammifero.

Questo metodo potrebbe controllare gli RNA guida negli embrioni, testare le prime domande sullo sviluppo o creare topi modificati. Qualsiasi progresso in CRISPR Cas9 potrebbe essere utilizzato con questo metodo. Il vantaggio principale di questo metodo è che è facile da imparare e utilizza reagenti disponibili per i laboratori che hanno accesso ai topi.

In futuro, questa tecnica sarebbe utile per correggere una malattia o una mutazione nella prole di un animale da compagnia o di un animale importante per l'agricoltura. Questo metodo è più adatto per generare modelli di mouse. Nel nostro laboratorio, abbiamo utilizzato varianti di questo metodo per studiare gli eventi che circondano la fecondazione e lo sviluppo precoce del preimpianto, in particolare, la regolazione genica nella potenza dell'embrione.

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