Isolamento fecale murino e trapianto di microbiota

Qui abbiamo descritto un protocollo per guidare gli altri nello studio dei meccanismi della disbiosi nella malattia, dalla raccolta di campioni fecali all'utilizzo del metodo Swiss roll per studiare i cambiamenti nell'intestino. Per iniziare, spruzzare il torace e i lati del topo eutanasia con etanolo al 70% e aprire con attenzione la pelle e la cavità peritoneale per esporre il tratto gastrointestinale. Isolare il cieco e utilizzare forbici chirurgiche sterili per tagliarlo a metà.

Esporre brevemente il cieco e tagliare 0,5 centimetri prossimalmente dall'ileo e 0,5 centimetri distalmente alla sua giunzione con il colon. Trasferire il cieco isolato su una capsula di Petri sterile. Utilizzare una spatola sterile per trasferire il contenuto cecale in tubi sterili e conservare le aliquote in un congelatore a 80 gradi Celsius.