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DOI: 10.3791/64377-v
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In questo lavoro, un approccio di ricostituzione in vitro è impiegato per studiare la poroelasticità dei gel di actomiosina in condizioni controllate. Viene quantificata la dinamica del gel di actomiosina e del solvente incorporato, attraverso la quale viene dimostrata la poroelasticità della rete. Discutiamo anche le sfide sperimentali, le insidie comuni e la rilevanza per la meccanica del citoscheletro cellulare.
Abbiamo sviluppato un approccio in vitro per caratterizzare la meccanica dei gel di actomiosina poroelastici come sistema modello del citoscheletro cellulare e, più in generale, del citoplasma, che hanno dimostrato di comportarsi come un materiale attivo poroelastico. Questo metodo fornisce informazioni su come la contrattilità della miosina contribuisce all'emergere di un flusso di fluido e su come le velocità della rete e del citosol sono correlate nel tempo e nello spazio. Questo semplice approccio ci consente di estrarre le proprietà meccaniche di sistemi in evoluzione dinamica senza utilizzare attrezzature o tecniche sofisticate in cui strumenti convenzionali come AFIM non possono essere impiegati.
Questo metodo può fornire approfondimenti sulla reologia dei materiali attivi poroelastici indipendentemente dalla specificità del gel attivo e del fluido incorporato. Per iniziare, posizionare da 10 a 12 coprivetrini numero 1,5 in un supporto in politetrafluoroetilene fatto in casa e preparare la soluzione di Piranha in un becher da 400 millilitri. Preparare la soluzione sul ghiaccio in una cappa chimica.
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