Stabilire un modello di lesione del midollo spinale per contusione murina basato su una tecnica minimamente invasiva

Le tecniche minimamente invasive riducono le correnti di instabilità, causate da danni fisici eccessivi. Coltivare per analizzare con precisione il microambiente del midollo spinale. Questa tecnica combina il classico principio di prelievo di Alan con una procedura operativa di precisione per stabilire un modello riproducibile di lesione del midollo spinale.

L'obiettivo principale di questo protocollo è quello di familiarizzare con la struttura anatomica. Che è più facile da seguire anche per il secondo anno come me. A dimostrare la procedura sarà Xiangchuang Fan A postgraduate presso l'ospedale Qilu, Zhongze Yuan e Zimeng Yang.

Entrambi studenti universitari presso lo Shandong University Cheeloo College of Medicine. Per iniziare assemblare la piattaforma con un tavolo operatorio chirurgico sopra uno stabilizzatore t-bral e una punta d'impatto. Metti la punta, che consente una localizzazione accurata del midollo spinale nella manica.

Selezionare le masse corrette delle gocce di peso per l'esperimento, che sono 1,3, 2,0 e 2,7 grammi rispettivamente per i gruppi lieve, moderato e grave. Inserire il perno di trazione nei fori della caduta di peso. Assemblare la caduta di peso sulla parte superiore del manicotto con il perno di trazione montato nella scanalatura sul braccio XYZ, in modo che, una volta completata la localizzazione, il peso venga rilasciato per colpire la punta del dispositivo d'urto.

Di conseguenza, contusing il midollo spinale e cambiamenti nel midollo spinale sono osservati al microscopio. Posizionare il mouse in posizione prona in una parte designata del tavolo operatorio. Esplora la 13a costola su un lato dalla parte ossea, sotto il microscopio operatorio.

Esplora il processo spinoso nella linea mediana toccando leggermente l'area dell'angolo costovertebrale e poi verso il rostrale per individuare lo spazio interspinoso tra la 12a e la 13a vertebra toracica. Esplora lo spazio interspinoso tra la 9a e la 10a vertebra toracica dallo spazio della 12a e 13a vertebra toracica al lato rostrale. Sezionare il muscolo paraspinale lungo il processo spinoso del T9 alle faccette articolari anteriori e posteriori di entrambi i lati con micro forbici.

Ritrarre i muscoli paraspinali con micro divaricatori e pulire il tessuto molle sulla lamina, e nello spazio spinoso inters del T8 a T9, e T9 a T10, con micro forbici. Per eseguire la laminectomia T9, bloccare il processo spinoso di T9 con una pinza da microchirurgia. Leggermente sollevate inserire le micro forbici parallelamente, lungo il lato laterale dorsale destro della lamina.

Evitare danni al midollo spinale e tagliare la lamina con micro forbici. Ripeti sul lato sinistro e il midollo spinale può essere esposto. Prima di fissare la vertebra, allentare il braccio universale e bloccare lentamente le articolazioni dalla 9a alla 10a sfaccettatura su entrambi i lati della vertebra con la micro pinza per zanzare dello stabilizzatore vertebrale.

Stringere le viti sulle micro pinze per zanzare e la vertebra è così stabilizzata. Regolare il midollo spinale sul piano orizzontale. Stringere il braccio universale e la vertebra è fissa.

Una volta che il midollo spinale di livello T9 è esposto e la vertebra è fissa, mirare al midollo spinale dalla punta all'interno della manica sotto il microscopico operativo. Dopo aver individuato lo spazio interspinoso da T12 a T13, abbassare il manicotto fino a quando l'estremità del dispositivo d'urto è coerente con il segno sulla finestra di osservazione e viene raggiunta l'altezza specificata di 22 millimetri. Estrarre il perno di trazione per rilasciare il peso.

Rimuovere il dispositivo d'urto quando la contusione è terminata e osservare il grado di lesione del midollo spinale al microscopio operatorio. Nel gruppo mite, l'alterazione del colore rosso chiaro può essere vista mentre nel gruppo moderato. La vista della ferita mostra un rosso scuro in tre o quattro secondi, e forse si può osservare l'eminenza.

Nel gruppo grave, le manifestazioni rosso scuro possono apparire immediatamente e si manifesta l'evidente eminenza nella dura, ma la dura è ancora in una forma coerente. L'area della lesione è aumentata gradualmente in modo significativo dai gruppi lievi a gravi il primo giorno dopo l'infortunio. Nel frattempo, la continuità della sostanza bianca su entrambi i lati del midollo spinale era migliore nel gruppo lieve.

Con piccoli vacuoli rotondi osservabili, che sono le caratteristiche dell'edema interstiziale. Nel gruppo moderato, la sostanza bianca mostrava scarsa continuità e la struttura della sostanza bianca ventrale non era ordinata. Nel gruppo grave, la sostanza bianca ventrale ha mostrato un'interruzione più grave e una vasta area della cavità è apparsa al centro della lesione.

Inoltre, il tessuto circostante ha mostrato un evidente riempimento dei globuli rossi e i globuli rossi vicino al canale centrale si sono riuniti in strisce. Cicatrici sovrapposte che formavano astrociti erano visibili al centro di tutti e tre i gruppi di lesioni. Con la lunghezza dell'area della lesione, aumentando con la gravità della lesione, mentre il diametro della cicatrice diminuiva.

Questo, suggerisce la presenza di contrattura cicatriziale, che può portare ad una diminuzione del diametro del midollo spinale. La rimozione dei tessuti molli davanti e dietro la lamina il più possibile facilita il rilassamento della lamina e previene danni al midollo spinale durante il taglio parallelo. La presente tecnica fornisce un modello animale semplice, riproducibile e meno invasivo.

lesione del midollo spinale post-traumatico, in particolare lesione da contusione.