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DOI: 10.3791/64589-v
Junli Chang*1,2, Xingyuan Sun*1,2, Xiaoping Ma1,2, Peng Zhao1,2, Binhao Shi1,2, Yongjun Wang1,2, Xianghui Han1,3, Yanping Yang1,2
1Longhua Hospital,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, 2Key Laboratory of Theory and Therapy of Muscles and Bones,Ministry of Education, 3Institute of Chinese Traditional Surgery, Longhua Hospital,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Qui, presentiamo un protocollo per l'iniezione intra-cardiaca di cellule tumorali della prostata umane per generare un modello murino con lesioni da metastasi ossee.
Questo metodo può aiutare a produrre un modello ideale che imita da vicino il naturale progresso delle metastasi ossee delle cellule tumorali della prostata in vivo. Questa tecnica ha il vantaggio di una metastasi ossea e rappresenta il processo naturale di metastasi ossea delle cellule tumorali della prostata in vivo. Questa tecnica favorisce l'esplorazione dei meccanismi molecolari e lo studio degli effetti terapeutici in vivo per le metastasi ossee del cancro alla prostata.
Il giorno dell'iniezione, prendere dall'80 al 90% di cellule PC3 confluenti marcate con luciferasi coltivate in un piatto di coltura cellulare di 10 centimetri e iniziare a preparare le cellule per l'iniezione lavandole due volte con PBS sterile a freddo. Tripsinizzare le cellule lavate con 1,5 millilitri di tripsina allo 0,25% per tre minuti, dopodiché spegnere la tripsina aggiungendo sei millilitri di mezzo F12 contenente il 10% di siero e raccogliere le cellule in una provetta da centrifuga da 15 millilitri. Trasferire 20 microlitri della sospensione cellulare raccolta in una piastra di conteggio delle celle e calcolare la concentrazione cellulare utilizzando un contatore automatico delle celle.
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