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Ricostituzione della citoarchitettura e della funzione dei tessuti epiteliali umani su un chip d'...
Ricostituzione della citoarchitettura e della funzione dei tessuti epiteliali umani su un chip d'...
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JoVE Journal Bioengineering
Reconstituting Cytoarchitecture and Function of Human Epithelial Tissues on an Open-Top Organ-Chip

Ricostituzione della citoarchitettura e della funzione dei tessuti epiteliali umani su un chip d'organo open-top

Full Text
2,467 Views
09:46 min
February 17, 2023

DOI: 10.3791/64633-v

Varone Antonio1, Adya Panchal2, Magdalena Kasendra3, Barrile Riccardo2,3

1Merk Sharp & Dohme LLC, 2Department of Biomedical Engineering,University of Cincinnati, 3Center for Stem Cell and Organoid Medicine,Cincinnati Children's Hospital Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Il presente protocollo descrive le capacità e le modalità di coltura essenziali dell'Open-Top Organ-Chip per il successo della creazione e della maturazione di colture organo-on-chip a tutto spessore di tessuti primari (pelle, alveolo, vie aeree e intestino), fornendo l'opportunità di indagare diversi aspetti funzionali dell'interfaccia di nicchia epiteliale/mesenchimale e vascolare umana in vitro.

I metodi tradizionali di coltura diffusa spesso non riescono a ricapitolare il complesso ambiente degli organi viventi, portando alla perdita di marcatori e funzioni tessuto-specifici. Abbiamo sviluppato un chip open-top che combina coltura diffusa e principio microfluidico per imitare da vicino il microambiente dei tessuti epiteliali. Includendo segnali biochimici e biomeccanici che sono naturalmente presenti negli organi viventi ma spesso trascurati dai tradizionali modelli in vitro, il chip open-top rappresenta un'alternativa migliore tra i sistemi chiusi.

A dimostrare la procedura sarà oggi Adya Panchal, una studentessa di ricerca nel mio laboratorio. Per iniziare, portare i reagenti necessari sotto l'armadio di biosicurezza sul ghiaccio. Coltura di cellule mesenchimali tessuto-specifiche per ottenere dall'80% al 90% di confluenza e quindi dissociare le cellule usando tripsina o altri metodi secondo le raccomandazioni del produttore.

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