Chirurgia e test comportamentali nel modello di trasposizione del neuroma tibiale nei ratti

Questo metodo aiuta a trovare trattamenti migliori per il dolore neuroma. Il vantaggio di questa tecnica è che è possibile misurare sia il dolore neuromatico che il dolore generalizzato in modo indipendente nello stesso modello di ripetizione. Il modello TNT è particolarmente adatto al test del dolore neuroma, poiché il neuroma stesso può essere stimolato meccanicamente con i monofili di Von Frey.

Inizia posizionando il ratto anestetizzato sulla schiena con la testa a sinistra oa destra. Posizionare la gamba da operare vicino al chirurgo. Esorotatere l'arto posteriore inferiore in modo che il malleolo mediale sia rivolto verso l'alto.

Prima di posizionare il ratto sotto un microscopio chirurgico stereo con ingrandimento 6x, disinfettare l'area rasata con almeno tre cicli alternati di scrub a base di iodio e alcol. Individuare il ginocchio e praticare delicatamente un'incisione longitudinale di due o tre centimetri sul lato mediale della zampa posteriore da metà polpaccio a caviglia usando un bisturi. Se necessario, aprire ulteriormente la pelle e il sottocute con microforbici fino a quando gli strati muscolari sono visibili.

Identificare il fascio neurovascolare superficiale come due o tre linee bianche, viola o rosse che possono muoversi liberamente sugli strati muscolari. Mantenere intatto il fascio neurovascolare. Seziona il posteriore da questo fascio.

Quindi, sezionare per aprire la fascia tra i muscoli gastrocnemio. Tra la fascia dei muscoli, si può trovare il fascio neurovascolare più profondo con il nervo tibiale, che è circa tre volte la dimensione del fascio neurovascolare superficiale. Usa l'osso tibiale come punto di riferimento aggiuntivo, poiché il nervo tibiale vola appena posteriormente all'osso tibiale.

Per sezionare il nervo tibiale libero dai fasci vascolari circostanti, spostare bruscamente il nervo tibiale e tagliare il tessuto esposto che mostra un certo allungamento mentre si muove il nervo tibiale. Una volta esposto l'intero nervo tibiale, riposizionare gli strati muscolari per evitare la disidratazione del nervo fino alla dissezione della pelle pretibiale dal muscolo sottocutaneo. Per sezionare la pelle pretibiale dallo strato muscolare sottocutaneo e creare un tunnel sottocutaneo, tenere la pelle sollevata e spingere la punta smussata nel tessuto parallelo alla pelle usando uno strumento di microchirurgia smussato.

Assicurarsi che l'estremità del tunnel sia posizionata pretibialmente o lateralmente per una facile accessibilità dell'area per il test del neuroma. Dopo aver tagliato il nervo tibiale all'estremità distale vicino alla caviglia, modificare l'ingrandimento del microscopio a 10x o 16x e identificare l'epineurium del nervo tibiale prossimale al taglio effettuato vicino alla caviglia. Oppure, nel caso di una biforcazione più prossimale del nervo tibiale, identificare l'epineurium dei rami della fioriera mediale e laterale prossimale al taglio effettuato vicino alla caviglia.

Posiziona con cura un 8-0 sutura di nylon attraverso l'epineurio dell'estremità del nervo prossimale tenendo l'epineurium con una pinzetta e mettendo l'ago tra il nervo e l'epineurium con un morso di circa 0,5 millimetri. Prendi un morso con l'ago per via sottocutanea alla fine del tunnel sottocutaneo e tira la sutura per trasporre il nervo lateralmente nel tunnel sottocutaneo. Fissare la sutura facendo un nodo.

Posizionare una sutura più spessa di 4-0 con un colore scuro arrossato all'estremità nervosa fissata senza penetrare nella pelle. Assicurarsi che la sutura sia visibile al di fuori della pelle. Controlla se il nervo rimane in posizione dopo aver spostato la zampa e i muscoli.

Tagliare le estremità della sutura con un'estremità di sutura leggermente più lunga sul 4-0, poi sull'8-0 sutura. Cambiare l'ingrandimento del microscopio a 6x e chiudere la pelle con suture intraepidermiche usando il 8-0 sutura. Pulire delicatamente la pelle con cloruro di sodio allo 0,9% usando un batuffolo di cotone.

Se la stanza è fredda, posizionare una piastra elettrica sotto una parte di una gabbia pulita e posizionare il topo nella gabbia sotto un tovagliolo di carta in una posizione comoda. Garantire un facile accesso al cibo e all'acqua. Per stimolare il nervo sterile per l'ipersensibilità, applicare il monofilo sul lato laterale vicino al bordo dei capelli senza toccare i cuscinetti dei piedi.

Per stimolare il nervo tibiale per l'iposensibilità, applicare il monofilamento nel mezzo della superficie della fioriera della zampa posteriore. Per il test del sito del neuroma, tenere i ratti con il naso puntato verso la piega del gomito. Se il topo è tenuto nella mano destra, la zampa posteriore sinistra dovrebbe pendere liberamente tra il pollice destro e l'indice.

Dopo aver verificato che il ratto sia calmo e a suo agio mentre tiene, al basale, posizionare delicatamente il monofilo da 15 grammi sulla superficie pretibiale della zampa posteriore esposta. Dopo l'intervento chirurgico, posizionare il monofilo da 15 grammi sulla sutura visibile e applicare una forza sufficiente al monofilamento per piegare i capelli e tenere premuto per un secondo. Von Frey del sito neuroma ha mostrato che al basale, i ratti hanno risposto al 10-15% delle applicazioni di un monofilamento di 15 grammi.

Una settimana dopo l'intervento chirurgico di trasposizione del neuroma tibiale, il tasso di risposta è aumentato dal 45% al 50% Sul lato controlaterale, le risposte dopo l'intervento chirurgico erano simili al basale. Circa il 20% dei ratti non ha sviluppato un neuroma doloroso e il tasso di risposta non è aumentato rispetto al basale. Alla fine del moncone del nervo tibiale transettato e trasposto 12 settimane dopo l'intervento, tutti i ratti hanno sviluppato un neuroma.

La transezione del nervo tibiale ha ridotto la sensibilità meccanica al centro del lato fioriera della zampa posteriore innervata dal nervo tibiale. L'iposensibilità presente a una settimana dopo l'intervento chirurgico era significativamente diversa dal lato controlaterale e basale da tre settimane dopo l'intervento chirurgico ed è rimasta fino a 12 settimane dopo l'intervento. Nella parte laterale del lato fioriera della zampa posteriore innervata dal nervo surale intatto, i ratti hanno sviluppato ipersensibilità meccanica significativamente diversa dal lato controlaterale e dalla linea di base da una settimana dopo l'intervento.

È persistito per 12 settimane dopo l'intervento chirurgico. Alla zampa controlaterale, la sensibilità meccanica non è stata influenzata rispetto al basale nelle aree innervate dal nervo surale o tibiale. Ricordarsi di creare una lunghezza del nervo tibiale per la gamma di movimento per la trasposizione laterale.

Ricorda anche di contrassegnare questo sito neuroma con una sutura scura.