Rilevazione basata sull'immunocolorazione di alterazioni dinamiche nelle proteine dei globuli rossi

Il nostro metodo rende possibili indagini meccanicistiche subcellulari nel campo in rapida evoluzione della meccanobiologia fissando modifiche proteiche temporanee in atto e quindi rilevandole con anticorpi specifici. Questo metodo è tecnicamente facile da applicare. I risultati sono altamente validi e riproducibili.

Inoltre, rispetto ad altre tecniche, il nostro metodo potrebbe davvero essere utilizzato efficacemente nel campo emergente della segnalazione post-traduzionale dei globuli rossi, che dipende da modifiche proteiche temporanee, in particolare la meccanosegnalazione dei globuli rossi. Per eseguire la fissazione della proteina RBC, diluire il sangue intero in un rapporto di uno a due in soluzione di paraformaldeide al 4% per 20 minuti a temperatura ambiente. Centrifugare la soluzione di sangue a 132 g per tre minuti a temperatura ambiente e rimuovere con cura il surnatante.