Isolamento e coltura di macrofagi sinoviali primari e fibroblasti da tessuto di artrite murina

Il presente studio fornisce un protocollo modificato per isolare i macrofagi sinoviali e i fibroblasti dal tessuto dell'artrite infiammatoria murina.

Sono necessari saggi basati su cellule per chiarire le funzioni molecolari. Negli studi sull'artrite, il metodo per isolare le cellule primarie è ben consolidato nei fibroblasti sinoviali, ma non nei macrofagi sinoviali. Pertanto, abbiamo sviluppato un protocollo per isolare ed espandere sia i macrofagi sinoviali che i fibroblasti sinoviali dai modelli di artrite.

I fibroblasti sinoviali primari del tessuto dell'artrite murina hanno contribuito alla delucidazione dei meccanismi molecolari nella patogenesi dell'artrite. D'altra parte, i macrofagi derivati dal midollo osseo, i macrofagi derivati dai monociti del sangue e le linee cellulari dei macrofagi sono stati spesso utilizzati come risorse macrofagiche per gli studi sull'artrite. Poiché i macrofagi possono acquisire funzioni associate al loro microambiente, le fonti generali di macrofagi possono mancare di risposte specifiche al tessuto artrite.

Inoltre, è difficile ottenere abbastanza cellule sinoviali mediante selezione, poiché la sinovia murina è un tessuto molto piccolo anche nei modelli di artrite. Nel metodo precedente per isolare i fibroblasti sinoviali, i macrofagi sinoviali sono stati scartati. Oltre a ciò, è stato riportato un metodo per isolare ed espandere i macrofagi residenti da alcuni organi.

Pertanto, i protocolli esistenti sono stati modificati in combinazione per isolare ed espandere sia i macrofagi sinoviali che i fibroblasti sinoviali dal tessuto dell'artrite murina. Questo metodo può isolare sia i macrofagi che i fibroblasti dalla sinovia infiammatoria con elevata purezza ed è semplice e riproducibile. Questo metodo consente l'espansione dei macrofagi sinoviali in co-coltura con fibroblasti sinoviali.

Inoltre, il metodo fornisce un vantaggio, in quanto i fibroblasti sinoviali possono essere utilizzati con meno passaggi. Il protocollo stabilito sarebbe un vantaggio per chiarire i meccanismi patologici nell'artrite reumatoide.