Isolamento dei mitocondri senza tag in due fasi per migliorare la scoperta e la quantificazione delle proteine

Il nostro laboratorio studia i cambiamenti nei mitocondri e nel metabolismo energetico e come questi influenzano processi sia sani che patologici come l'attivazione immunitaria, il cancro o i disturbi metabolici. Il nostro obiettivo è quello di aiutare a sviluppare nuovi trattamenti per un'ampia varietà di disturbi fornendo una migliore comprensione della funzione mitocondriale e del metabolismo energetico. Strumenti come la proteomica basata sulla spettrometria di massa, la metabolomica e gli schermi genetici CRISPR-Cas9 stanno diventando sempre più popolari per identificare i meccanismi molecolari sia nella funzione mitocondriale che nel metabolismo energetico in specifici tipi e ambienti cellulari.

A differenza di altri metodi, il nostro protocollo impiega due fasi di purificazione, centrifugazione differenziale e cattura immunitaria per l'isolamento mitocondriale. Ciò offre diversi vantaggi, come una migliore rimozione dei contaminanti, ed è anche un potente strumento per identificare nuove proteine mitocondriali. Il nostro protocollo fornisce informazioni sulla composizione e, quindi, sulla funzione mitocondriale in diversi tipi di cellule e ambienti.

Questo può aiutarci a comprendere meglio i processi normali come l'attivazione immunitaria, ma anche i processi patologici come il cancro. Ci concentreremo sui macrofagi mitocondriali. Testeremo come la composizione dei mitocondri cambia durante la risposta immunitaria per comprendere meglio la loro funzione.

I nostri risultati potrebbero portare allo sviluppo di farmaci con, ad esempio, effetti anti-infiammatori.