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Ingegneria genetica mediata da Agrobacterium tumefaciens di microalghe verdi, Chlore...
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JoVE Journal Bioengineering
Agrobacterium tumefaciens-Mediated Genetic Engineering of Green Microalgae, Chlorella vulgaris

Ingegneria genetica mediata da Agrobacterium tumefaciens di microalghe verdi, Chlorella vulgaris

Full Text
4,688 Views
08:00 min
October 27, 2023

DOI: 10.3791/65382-v

M. Reza Roushan1, Chuchi Chen1, Parisa Ahmadi1, Valerie C. A. Ward1

1Department of Chemical Engineering,University of Waterloo

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo protocollo delinea l'utilizzo della trasformazione mediata da Agrobacterium tumefaciens (AMT) per l'integrazione di geni di interesse nel genoma nucleare della microalga verde Chlorella vulgaris, portando alla produzione di trasformanti stabili.

Lo scopo della ricerca si è concentrato sullo sviluppo e l'ottimizzazione di un protocollo per la trasformazione della clorella vulgaris. Il nostro obiettivo era quello di creare un ceppo transgenico stabile di chlorella vulgaris utilizzando agrobacterium tumefaciens e un plasmide specifico, pCAMBIA1302, che permettesse loro di inserire il gene di interesse e il potenziale per applicazioni biotecnologiche. Ingegneria metabolica e biologia sintetica, microscopia e imaging, editing genetico CRISPR-Cas9, bioinformatica, modellazione computazionale, telerilevamento e imaging satellitare, nanotecnologie, bioprocessi e processi a valle.

Questo studio introduce un protocollo ottimizzato di trasformazione dell'agrobacterium tumefaciens per la microalga chlorella vulgaris utilizzando un plasmide e un marcatore specifici. Getta le basi per migliorare le microalghe attraverso la tecnologia, superando i precedenti limiti negli strumenti di trasformazione affidabili per C. vulgaris.

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Trasformazione mediata da Agrobacterium Tumefaciens ingegneria genetica microalghe verdi clorella vulgaris protocollo AMT gene reporter proteina fluorescente verde (mGFP5) marcatore di resistenza agli antibiotici igromicina B selezione dei mutanti terreno tris-acetato-fosfato (TAP) trasformazione stabile cassetta T-DNA colonie transgeniche PCAMBIA1302 vettore di espressione vegetale

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