Rigenerazione delle squame di zebrafish in toto e cultura delle squame ex vivo

Questo protocollo descrive la raccolta e la visualizzazione delle squame elasmoidi del pesce zebra durante la rigenerazione in vivo . Inoltre, viene presentata la coltura ex vivo di queste scaglie fino a 7 giorni dopo la raccolta.

Uno dei vantaggi dell'utilizzo delle squame di pesce per la ricerca è che contengono sia osteoblasti che osteoclasti, essenziali per il rimodellamento osseo. Quando le squame vengono coltivate ex vivo, possiamo studiare le interazioni di queste due popolazioni cellulari insieme alla matrice scheletrica, a differenza della coltura cellulare tradizionale in cui in genere c'è un solo tipo di cellula. Un vantaggio dell'utilizzo delle squame di pesce per la ricerca è che sono abbondanti sul pesce, prontamente pescate, e sono traslucide, consentendo una migliore imaging ex vivo.

Poiché le squame possono rigenerarsi completamente, ci permettono di studiare la rigenerazione ossea che raramente si verifica nei modelli di mammiferi. I protocolli che presentiamo qui ci permettono di sezionare meglio le interazioni cellulari. Questo ci permetterà di testare come i diversi tipi di cellule rispondono all'invecchiamento e ai cambiamenti del ritmo circadiano.